AP1510-abhängige Transkriptionskontrolle in genetisch modifizierten C6-Gliomzellen:
Gespeichert in:
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|---|---|
| Format: | Mikrofilm Buch |
| Sprache: | German |
| Veröffentlicht: |
2004
|
| Ausgabe: | [Mikrofiche-Ausg.] |
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| Online-Zugang: | Inhaltsverzeichnis |
| Beschreibung: | Münster (Westfalen), Univ., Diss., 2004. - Mikrofiche-Ausg.: 2 Mikrofiches : 24x |
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INHALTSVERZEICHNIS
1.
EINLEITUNG
1
1.1
GLIOME
1
1.2
GENTHERAPEUTISCHE
STRATEGIEN
6
1.2.1
ZELLZYKLUSKONTROLLE
/
INDUKTION
VON
APOPTOSE
7
1.2.2
YYSUIZID
"
-GENTHERAPIE
7
1.2.3
IMMUN-GENTHERAPIE
8
1.2.4
ANTI-ANGIOGENESE-GENTHERAPIE
8
1.3
GENTRANSFER
9
1.4
GENREGULATION
/
TRANSKRIPTIONSKONTROLLE
10
1.5
DIMERIZER-SYSTEM
11
1.6
ZIELSETZUNG
16
2.
MATERIAL
UND
METHODEN
18
2.1
MATERIAL
18
2.1.1
CHEMIKALIEN
18
2.1.2
RESTRIKTIONSENZYME
19
2.1.3
DNA-GROESSENSTANDARD
19
2.1.4
PLASMIDE
19
2.1.5
HAEUFIG
VERWENDETE
PUFFER,
LOESUNGEN
UND
MEDIEN
20
2.1.5.1
ALLGEMEINE
DNA
UND
PROTEINPUFFER
20
2.1.5.2
ANTIBIOTIKA
20
2.1.5.3
MEDIEN
UND
LOESUNGEN
FUER
DIE
KULTUR
EUKARYOTISCHER
ZELLEN
21
2.1.6
EUKARYOTISCHE
ZELLLINIE
21
2.1.7
GERAETE
UND
SONSTIGE
HILFSMITTEL
21
2.2
METHODEN
22
2.2.1
KULTIVIERUNG
VON
SAEUGETIERZELLEN
22
2.2.1.1
ALLGEMEINES
22
2.2.1.2
AUFTAUEN
UND
AUSSAAT
VON
SAEUGETIERZELLEN
23
2.2.1.3
KULTIVIERUNG
UND
TRANSFER
VON
SAEUGETIERZELLEN
23
2.2.1.4
ANLEGEN
VON
DAUERKULTUREN
24
2.2.1.5
ZELLZAHLBESTIMMUNG
24
2.2.1.5.1
ZELLZAHLBESTIMMUNG
MIT
DER
NEUBAUER-ZAEHLKAMMER
24
2.2.1.5.2
ZELLZAHLBESTIMMUNG
MIT
YYCASY
1
MODEL
DT
"
24
2.2.1.6
AUFZEICHNUNG
EINER
ZELLGROESSENVERTEILUNG
MIT
YYCASY
1
MODEL
DT
"
25
2.2.2
PRAEPARATION
VON
NUKLEINSAEUREN
26
2.2.2.1
KONZENTRATIONSBESTIMMUNG
VON
DNA
26
2.2.2.2
MAXI-PRAEPARATION
VON
PLASMID-DNA
26
2.2.2.3
ANALYTISCHER
VERDAU
VON
PLASMID-DNA
27
2.2.2.4
PRAEPARATIVE
LINEARISIERUNG
VON
PLASMID-DNA
28
2.2.2.5
KONTROLLE
DES
RESTRIKTIONSVERDAUES
VON
PLASMID-DNA
29
2.2.2.6 PHENOL-CHLOROFORM-REINIGUNG
DER
LINEARISIERTEN
DNA
29
2.2.2.7 ETHANOLFALLUNG
29
2.2.3
ETABLIERUNG
DER
ZELLLINIE
C6-PCEN
30
2.2.3.1
STABILE
T
RANSFEKTION
DER
C6-ZELLEN
3
0
2.2.3.2 SELEKTION
MIT
G4
18
32
2.2.3.3
PICKEN
VON
KOLONIEN
32
2.2.4
TRANSIENTE
TRANSFEKTION
MIT
REPORTERGENEN
33
2.2.5
QUANTITATIVER
LACZ-ASSAY
35
2.2.6
QUANTITATIVE
BESTIMMUNG
DER
PROTEINKONZENTRATION
36
2.2.7
ZYTOCHEMISCHER
NACHWEIS
VON
SS-GALAKTOSIDASE
37
3.
ERGEBNISSE
39
3.1
ETABLIERUNG
EINER
STABIL
TRANSFIZIERTEN
ZELLLINIE
39
3.1.1
TRANSFEKTION
MIT
PCEN-F3P65/Z
1
F3/NEO
39
3.1.2
REGULATION
DER
SS-GALAKTOSIDASE-EXPRESSION
IN
DEN
MIT
PCEN-
41
F3P65/Z1F3/NEO
TRANSFIZIERTEN
C6-ZELLEN
3.1.2.1
UNTERSUCHUNGEN
ZUR
REGULATION
DER
SS-GALAKTOSIDASE-EXPRESSION
41
MITTELS
EINES
QUANTITATIVEN
LACZ-ASSAYS
3.1.2.1.1
REGULATION
DER
SS-GALAKTOSIDASE-EXPRESSION
NACH
TRANSFEKTION
42
MIT
DEM
EFFECTENEYY-KIT
3.1.2.1.2
REGULATION
DER
SS-GALAKTOSIDASE-EXPRESSION
NACH
TRANSFEKTION
46
MIT
DER
KALZIUMPHOSPHAT-METHODE
3.1.2.1.3
EINFLUSS
UNTERSCHIEDLICHER
MENGEN
PLH/LACZ-DNA
AUF
DIE
REGU-
50
LATION
DER
SS-GALAKTOSIDASE-EXPRESSION
3.1.2.2
UNTERSUCHUNGEN
ZUR
REGULATION
DER
SS-GALAKTOSIDASE-EXPRESSION
52
AUF
EINZELZELLEBENE
MITTELS
LACZ-ZYTOCHEMIE
53
3.1.2.2.1
REGULATION
DER
SS-GALAKTOSIDASE-EXPRESSION
AUF
EINZELZELLEBENE
NACH
TRANSFEKTION
MIT
DEM
EFFECTENEYY
KIT
3.1.2.2.2
REGULATION
DER
SS-GALAKTOSIDASE-EXPRESSION
AUF
EINZELZELLEBENE
56
NACH
TRANSFEKTION
MIT
DER
KALZIUMPHOSPHAT-METHODE
3.1.2.2.3
EINFLUSS
UNTERSCHIEDLICHER
MENGEN
PLH/LACZ-DNA
AUF
DIE
REGULA
59
TION
DER
SS-GALAKTOSIDASE-EXPRESSION
AUF
EINZELZELLEBENE
.
4.
DISKUSSION
61
4.1
ALLGEMEINE
EINFUEHRUNG
61
4.2
ETABLIERUNG
DER
ZELLLINIE
C6-PCEN
62
4.2.1
C6-GLIOMZELLEN
ALS
EXPERIMENTELLES
MODELLSYSTEM
ZUR
ERFORSCHUNG
62
DER
GLIOMBIOLOGIE
UND
ZUR
EVALUATION
NEUER
THERAPIESTRATEGIEN
4.2.2
EFFIZIENZ
DES
DIMERIZER-SYSTEMS
IN
STABIL
MIT
PCEN-
64
F3P65/Z1F3/NEO
TRANSFIZIERTEN
C6-ZELLEN:
QUANTITATIVER
LACZ-ASSAY
4.2.3
EFFIZIENZ
DES
DIMERIZER-SYSTEMS
IN
STABIL
MIT
PCEN-
70
F3P65/Z1F3/NEO
TRANSFIZIERTEN
C6-ZELLEN:
ZYTOCHEMISCHER
NACH
WEIS
VON
SS-GALAKTOSIDASE
4.3
BEMERKUNGEN
ZU
DEN
VERWENDETEN
TRANSFEKTIONSVERFAHREN
72
4.4
AUSBLICK
76
5.
LITERATURVERZEICHNIS
78
6.
DANKSAGUNG
93
7.
LEBENSLAUF
94
8.
ANHANG |
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