Die Bedeutung struktureller Alterationen im BRCA1-Gen beim sporadischen Mammakarzinom:
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INHALTSVERZEICHNIS
Seite
Abkürzungsverzeichnis 7
1. Einleitung 9
1.1 Klinik des Mammakarzinoms 9
1.2 Molekulargenetik des Mammakarzinoms 11
1.3 Genetische Alterationen beim familiären Mammakarzinom 13
1.3.1 Penetranz des familiären Mammakarzinoms 13
1.3.2 Mutationen in den Genen BRCA1 und BRCA2 14
1.3.3 Funktion der BRCA-Gene 17
1.3.4 Weitere Gene für das familiäre Mammakarzinom 18
1.4 Genetische Alterationen im sporadischen Mammakarzinom 21
1.4.1 Mögliche Bedeutung der BRCA-Gene im sporadischen Mammakarzinom 23
2. Fragestellung 25
3. Material 27
3.1 Gewebe-und Blutproben 27
3.2 Geräte 28
3.3 Chemikalien 29
3.4 Lösungen 31
4. Methoden 34
4.1 Gewebe-und Tumorproben 34
4.2 Isolierung genomischer DNA 34
4.2.1 DNA-Extraktion aus Blut 34
4.2.2 DNA-Extraktion aus Tumorgewebe 35
4.2.3 DNA-Extraktion aus Paraffin-eingebettetem Gewebe 35
4.3 Polymerasekettenreaktion 36
4.4 LOH-Nachweis durch Mikrosatellitenmarker 37
6
4.5 Agarose-Gelelektrophorese 37
4.6 Polyacrylamid-Gelelektrophorese 38
4.7 Silberfärbung 38
4.8 Sequenzanalyse 39
4.9 Exon 13-Duplikation/ Exon 22-Deletion 42
5. Ergebnisse 44
5.1 Allelverluste im BRC A1 -Gen auf Chromosom 17q21 in sporadischen
Mammakarzinomen 44
5.2 Nachweis von Mikrodeletionen im BRCA1-Gen mittels SNP-Analyse 45
5.3 Allelverluste in anderen, Mammakarzinom-relevanten Kandidatenregionen 47
5.4 Exon 13-Duplikation/Exon 22-Deletion 50
5.5 Prognosefaktoren 52
6. Diskussion 53
7. Zusammenfassung 58
8. Literaturverzeichnis 59
9. Lebenslauf 72
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