Die Bedeutung des Tumorsuppressors PTEN und des Cyclin-abhängigen Kinase-Inhibitors p27kip1 beim Ovarialkarzinom:
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2004
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adam_text | Inhaltsverzeichnis
1 Einleitung. 9
1.1 Ovarialkarzinom 9
1.1.1 Epidemiologie 9
1.1.1.1 Häufigkeit von Tumorerkrankungen allgemein 9
1.1.1.2 Häufigkeit des Ovarialkarzinoms 10
1.1.2 Alter 11
1.1.3. Ätiologie 12
1.1.4 Ausbreitung 13
1.1.5 Symptome 13
1.1.6 Diagnostik 15
1.1.7 Morphologische Faktoren 16
1.1.7.1 Histologische Klassifikation 16
1.1.7.2 Stadieneinteilung 18
1.1.7.3 Grading 20
1.1.8 Therapie 21
1.1.8.1 Operation 21
1.1.8.2 Chemotherapie 22
1.1.8.3 Therapiealternativen 23
1.1.9 Nachbehandlung 24
1.1.10 Prognose und Prognosefaktoren 26
1*2 Kanzerogenese 28
1.2.1 Der Zellzyklus 28
1.2.2. Regulation des Zellzyklus durch Cyclin-aktivierte Proteinkinasen 29
1.2.3 Faktoren und Schritte der Kanzerogenese 32
1.2.4 Onkogene 33
1.2.5 Tumorsuppressorgene 35
1.3 PTEN und p27Upl 36
1.3.1 Der Tumorsuppressor PTEN und seine Funktion 36
1.3.2 Der Tumorsuppressor p27llI 1 und seine Funktion 41
1.4 Problem und Fragestellung ....................................44
2 Material und Methode..... 46
2.1 Untersuchungsmaterüil.....46
2.1.1. Gewebeproben 46
2.2 Untersuchungsmethode. 47
2.2.1. Grundlagen der Immunhistochemie 47
2.2.2. Gegenüberstellung wichtiger Verfahren 48
2.2.2.1. Die direkte Methode und die indirekte Methode 48
2.2.2.3 Peroxidase-Anti-Peroxidase-Methode und Avidin-Biotin-Komplex Methode 49
2.2.3 Vorbereitung der Objektträger 51
2.2.4 Gewebeaufbereitung 52
2.2.5 Verwendete Materialien 53
2.2.5.1 Reagenzien 53
2.2.5.2 Chemikalien 53
2.2.5.3 Geräte 54
6
2.2.5.4 Lösungen 54
2.2.6 Hämatoxyllin-Eosin Färbung 55
2.2.7 Optimierung des immunhistochemischen Färbeverfahrens 56
2.2.8 Immunhistochemischer Nachweis von PTEN 57
2.2.9 Immunhistochemischer Nachweis von p27 p 59
2.3 Auswertung 61
2.3.1 Immunreaktiver Score 61
2.3.2 Statistik 63
3 Ergebnisse. 64
3.1 Patientinncnkollektiv 64
3.1.1 Beschreibung des analysierten Kollektives 64
3.1.2 Altersverteilung 65
3.1.3 Häufigkeitsverteilung des histologischen Typs 67
3.1.4 Häufigkeitsverteilung des FIGO-Stadiums 68
3.1.5 Häufigkeitsverteilung des Differenzierungsstadiums 70
3.1.6 Häufigkeitsverteilung Primär-Metastase-Rezidiv im Gesamtkollektiv 71
3.1.7 Häufigkeitsverteilung der Lokalisation des entfernten Gewebes 72
3.1.8 Häufigkeitsverteilung Therapiemodus unter den 122 Patienten 73
3.1.8.1 Operationsart 73
3.1.8.2 Chemotherapie 74
3.2 Tumorsuppressorgenexpression 75
3.2.1 Häufigkeitsverteilung der PTEN und p27klp -Expression und des „Torres -Scores75
3.2.2 PTEN/p27kip -Expression in Abhängigkeit vom Alter 80
3.2.3 PTEN/p27klpl- Expression in Abhängigkeit von der Histologie 84
3.2.4 PTEN/p27kipl- Expression in Abhängigkeit vom FIGO-Stadium 86
3.2.5 PTEN/p27klpl- Expression in Abhängigkeit vom Differenzierungsstadium 88
3.2.6 PTEN/p27klpl- Expression in Abhängigkeit vom Tumorstatus Primärtumor,
Metastase, Rezidiv 91
3.2.7 Vergleich der PTEN/p27klpl- Expression (Korrelation) 94
3.2.8 Vergleich der PTEN-Expression der Immunhistochemie mit der PTEN-Expression
im Westem-Blot 99
3.2.9 Einzellfallanalysen 100
3.2.9.1 PTEN-Expression im Progressionsverlauf 100
3.2.9.2 p27klpl Expression im Progressionsverlauf. 104
3.3. VTmiv21üfi als Prognosefaktor 109
3.3.1 Häufigkeitsverteilung rezidivfreie Zeit in Jahren 109
3.3.2 Rezidivfreies Überleben im 1. Jahr in Abhängigkeit vom PTEN/p27klpl-Status ..111
3.3.3. Rezidivfreies Oberleben im 1. Jahr in Abhängigkeit von klassischen
Prognosefaktoren 113
3.3.3.1 Rezidivfreies Überleben im 1 .Jahr in Abhängigkeit vom Alter 113
3.3.3.2 Rezidivfreies Überleben im 1. Jahr in Abhängigkeit vom histologischen
Tumortyp 114
3.3.3.3 Rezidivfreies Überleben im 1. Jahr Abhängigkeit vom FIGO-Stadium 115
3.3.3.4 Rezidivfreies Überleben im 1. Jahr in Abhängigkeit vom
Differenzierungsstadium 116
7
4 Diskussion 118
4.1 Bewertung unseres Untersuchungskollektives 118
4.2 Immunhistochemie 119
4.3Tumorsuppressorgenexpression 120
4.3.1 Nukleare Lokalisation von PTEN 120
4.3.2 Nukleare Lokalisation von p27kl1 121
4.3.3 Quantität des immunhistochemischen Nachweises von PTEN 122
4.3.3.1 Quantität des immunhistochemischen Nachweises von PTEN im Vergleich
zum Nachweis mit Hilfe anderer Methoden (Westem-Blot, LOH, PCR, RT-PCR).. 124
4.3.4 Quantität des immunhistochemischen Nachweises von p27klpl 125
4.3.4.1 Quantität des immunhistochemischen Nachweises von p27 lpl im Vergleich
zum Nachweis mit Hilfe anderer Methoden (Western-Blot, LOH, PCR, RT-PCR).. 128
4.3.5 Bedeutung eines PTEN- Expressionsverlustes 129
4.3.6 Bedeutung eines p27klp -Expressionsverlustes 130
4.4 Korrelation der PTEN zu p27kipI Expression 131
4.5 PTEN und p27kipl als Prognosefaktoren 133
4.5.1 PTEN als Prognosefaktor 133
4.5.2 p27kipl als Prognosefaktor 135
4.6 Ausblick 136
5 Zusammenfassung. 137
6 Literaturverzeichnis. 138
7 Vorabveröffentlichung. 167
8 Lebenslauf. 168
8
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