Bedeutung des erblichen Polymorphismus im Gen von Cytochrom-P450-2C9 in der Arzneitherapie mit dem Antiepileptikum Phenytoin:
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| Format: | Buch |
| Sprache: | German |
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2004
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1 EINLEITUNG
1 Einleitung und Zielsetzung der Arbeit 1
1.1 Bedeutung der Pharmakokinetik von Arzneimitteln 3
1.2 Beteiligung von Cytochrom P450 Enzymen
am Metabolismus von Pharmaka 5
1.3 Genetische Polymorphismen im Arzneistoffwechsel 8
1.4 Cytochrom P450 2C9 (CYP2C9) 10
1.4.1 CYP2C9 und Genotypen 11
1.4.2 CYP2C9 und ethnische Allelverteilung 13
1.4.3 CYP2C9 und verstoffwechselte Substrate 14
1.4.4 CYP2C9 und Inhibitoren und Induktoren 15
1.5 Epilepsien 16
1.5.1 Pharmakotherapie 17
1.5.2. Antikonvulsiva 17
1.6 Phenytoin 18
1.6.1 Absorption 18
1.6.2 Verteilung 19
1.6.3 Ausscheidung 20
1.6.4 Pharmakokinetik und Biotransformation 21
1.7 Therapeutisches Drug Monitoring von Phenytoin 22
2 Material und Methoden
2.1 Konzentrationsanalysen von Phenytoin 25
2.1.1 High Performance Liquid Chromatography 26
2.1.2 Aufbau und Instrumentierung HPLC 27
2.1.3 Konzentrationsanalyse 29
2.2 Immunologische Messungen 30
2.2.1 Enzyme Multiplied Immunoassay Technique 30
2.3 Molekulargenetische Analysen 32
2.3.1 Lyse der Erythrozyten 32
2.3.2 Prinzip der DNA Extraktion 33
2.3.3 Extraktion der DNA 34
2.4 Polymerase Ketten Reaktion 35
2.4.1 Reagentien 36
2.4.2 Methodik der PCR 37
2.5 Gel Elektrophorese 39
2.6 Restriktionsfragment Längenpolymorphismus 40
2.6.1 Prinzip des RFLP 41
2.6.2 Restriktion Sau 96 (Cyp 2C9*2) 41
2.6.3 Restriktion Sty I (Cyp 2C9*3) 42
2.7 Methoden der statistischen Analyse 44
3 Ergebnisse
3.1 Messwerte 45
3.1.1 Blutkonzentrationen in Relation zur Dosis 46
3.1.2 Enzym immunologisch ermittelte Blutkonzentrationen 47
3.1.3 Mittels HPLC ermittelte Phenytoin Plasmakonzentrationen 48
3.1.4 HPLC Messungen zum Phenytoin Metaboliten pHPPH gesamt 49
3.1.5 Konzentration des Phenytoin Metaboliten pHPPH unkonjugiert 49
3.1.6 HPLC:Phenytoin/HPLC Metabolit pHPPH ges. Quotient 50
3.1.7 Dosis normierte Blutkonzentrationen 50
3.1.8 Die auf das Körpergewicht normierte Phenytoin Tagesdosis 51
3.2 Biologische Einflußfaktoren der Blutkonzentrationen 52
3.2.1 Blutkonzentrationen und Geschlecht 52
3.2.2 Blutkonzentrationen und Alter 56
3.2.3 Blutkonzentrationen und Gewicht 60
3.2.4 Blutkonzentrationen und Inhibitoren und Induktoren 64
3.3 Ergebnisse der Genotypisierung des CYP2C9 67
3.3.1 Häufigkeit der untersuchten Genotypen des CYP2C9 67
3.3.2 Häufigkeit der untersuchtenAllele des CYP2C9 68
3.4 Genotypus und Messwerte 69
3.5 Allele und Messwerte 74
4 Diskussion
4.1 Zusammenfassung der Ergebnisse 80
4.2 Häufigkeit der CYP2C9 Varianten im Vergleich
zu anderen Untersuchungen 81
4.3 Phenytoin und CYP2C9 in der Literatur 83
4.3.1 In Vivo Untersuchungen 83
4.3.2 In Vitro Untersuchungen 85
4.4 Diskussion der Messwerte 87
4.5 Genotypus und phänotypische Ausprägung 89
4.6 Ausblick 91
5 Zusammenfassung 93
6 Literaturverzeichnis 96
Danksagung 110
Lebenslauf 111
Eidesstattliche Erklärung 113
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