Einfluss von Trophoblastzellen auf die Interleukinproduktion, Rezeptorexpression und intrazelluläre Signaltransduktion allogener Lymphozyten:
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| Format: | Abschlussarbeit Buch |
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2004
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| adam_text | Titel: Einfluss von Trophoblastzellen auf die Interleukinproduktion, Rezeptorexpression und intrazelluläre
Autor: Storl, Frank
Jahr: 2004
INHALTSVERZEICHNIS
Zusammenfassung Seite I -III
1. Einleitung Seite 01
1.1 Schwangerschaft und Immunsystem Seite 01
1.2 Immunregulatorische Vorgänge Seite 04
1.3 Zytokine und Zytokinrezeptoren Seite 06
1.4 Signaltransduktion Seite 11
1.4.1 Die Familie der Janus-Kinasen Seite 14
1.4.2 Die Familie der STAT-Proteine Seite 14
2. Zielstellung und Arbeitshypothese Seite 15
3. Methoden Seite 16
3.1 Plazenten Seite 17
3.2 Lymphozytenspender Seite 17
3.3 Lymphozytenzellkultur Seite 17
3.4 Konservierung der Zellen Seite 18
3.5 Isolierung von peripheren Blutlymphozyten (PBL) Seite 18
3.6 Lymphozytenstimulierung Seite 18
3.7 Durchflusszytometrie Seite 18
3.7.1 Grundlagen Seite 18
3.7.2 Darstellung durchflusszytometrisch ermittelter Ergebnisse Seite 20
3.7.2.1 korrelierte Zweiparameterdarstellung Seite 20
3.7.3 Definieren der Gates (Auswertfenster) Seite 20
3.8 Intrazelluläre Interleukinbestimmung Seite 20
3.9 Isolierung von Trophoblastzellen Seite 21
3.10 Trophoblastzellkultur Seite 23
3.11 Vitalitätstestung Seite 23
3.12 Zellzählung Seite 24
3.13 Zelllyse für Western Blot und Proteinbestimmung nach Bradford Seite 24
3.14 Polyacrylamid-Gel-Elektrophorese (PAGE) Seite 25
3.15 Western Blot Seite 25
3.16 Statistik Seite 26
4. Material Seite 27
4.1 Chemikalien und Reagenzien Seite 27
4.2 Puffer Seite 29
4.3 Medien Seite 29
4.3.1 Spezielle Zusätze für die Zellkultur Seite 29
4.4 Antikörper Seite 30
4.4.1 Monoklonale Antikörper (mAK) gegen CD Antigene Seite 30
4.4.2 Monoklonale konjugierte Antikörper gegen intrazelluläre
Interleukine Seite 31
4.4.3 Monoklonale Antikörper gegen JAK und STAT Proteine Seite 31
4.4.4 polyklonale konjugierte Antikörper (pAK) Seite 31
4.4.5 Stimulatoren zum Nachweis intrazellulärer Zytokine Seite 31
4.5 Geräte Seite 32
4.6 Sterile Zellkulturgefäße Seite 33
5. Ergebnisse Seite 34
5.1 Bestimmung lymphozytärer Aktivierungsmarker Seite 34
5.1.1 HLA-DR Expression Seite 34
5.1.2 CD69 Expression Seite 37
5.1.3 CD71 Expression Seite 39
5.1.4 CD25 Expression Seite 42
5.1.5 CD 122 Expression Seite 46
5.1.6 CD 132 Expression Seite 48
5.2 Bestimmung von intrazellulären Interleukinen Seite 51
5.2.1 Interferon-gamma (IFN-y) Seite 51
5.2.2 Interleukin-2 (IL-2) Seite 53
5.2.3 Interleukin-4 (IL-4) Seite 56
5.2.4 InterIeukin-10 (IL-10) Seite 58
5.3. Bestimmung intrazellulärer Signaltransduktionsmoleküle Seite 61
5.3.1 JanusKinase 1 (JAK1) Seite 61
5.3.2 Janus Kinase 3 (JAK3) Seite 63
5.3.3 Signal Transducers and Activators of Transcription 1 (STAT1) Seite 66
5.3.4 Signal Transducers and Activators of Transcription 3 (STAT3) Seite 69
5.3.4.1 Signal Transducers and Activators of Transcription 3-ß
(STAT3-ß) Seite 72
5.3.4.2 Vergleich und Analyse der Relationen und Beziehungen
zwischen STAT3-Banden und STAT3-ß-Banden Seite 75
5.3.5 Signal Transducers and Activators of Transcription 5 (STAT5) Seite 77
6. Diskussion Seite 80
6.1 Trophoblastzellen Seite 80
6.2 Interleukin-2-Rezeptorketten (CD25, CD122, CD132) Seite 82
6.3 Intrazelluläre Interleukine Seite 83
6.4 intrazelluläre Signaltransduktoren JAK und STAT Seite 87
6.5 STAT 3-ß Seite 89
6.6 plazentare immunaktive Substanzen Seite 90
Literaturverzeichnis Seite 92
Abkürzungsverzeichnis Seite 102
Selbstständigkeitserklärung
Lebenslauf
Danksagung
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