Untersuchungen zum Einfluß der Endothelzellen auf die Fibrinolyse:
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| Format: | Buch |
| Sprache: | German |
| Veröffentlicht: |
2004
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| Beschreibung: | 88 S. Ill., graph. Darst. 21 cm |
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1 Einleitung 3
1.1 Endothelzellen 3
1.1.1 Funktion der Endothelzellen 3
1.1.2 Allgemeine physiologische Bedeutung der Endothelzellen 4
1.1.3 Einwirken der EC auf Gerinnung und Fibrinolyse 4
1.1.4 HUVEC -Repräsentanten der Endothelzellen 5
1.2 Gerinnung 5
1.3 Fibrinolyse 7
1.3.1 Aktivatoren der Fibrinolyse 7
1.3.2 Inhibitoren der Fibrinolyse 10
1.4 Beeinflussung der Gerinnung und Fibrinolyse durch Endothelzellen 14
1.5 HELLP Syndrom - Hypertensive Erkrankungen in der Schwangerschaft 16
1.5.1 Häufigkeit und Symptomatik 16
1.5.2 Ursachen der Präeklampsie und Schwangerschaftsinduzierten Hypertonie 18
1.5.3 Therapie der Präeklampsie 19
2 Problemstellung 20
3 Material und Methoden 21
3.1 Zellkultur 21
3.1.1 Isolierung von Primärkulturen der HUVEC 21
3.2 Methoden in der Zellkultur 21
3.2.1 Kultur von HUVEC 21
3.3 Versuche zur Fibrinolyse 22
3.3.1 Versuche mit blockierenden Antikörpern 22
3.4 Vitalitätsbestimmungen 24
3.5 Fibrinolyseversuche mit HUVEC, die mittels geburtshilflicher Seren inkubiert
werden 25
3.5.1 T-PA-Bestimmung in Lysaten mittels ELISA 26
3.5.2 U-PA-Bestimmung in den Lysaten 26
3.5.3 PAI-1-Bestimmung in den Lysaten 27
3.5.4 Versuchsaufbau der Fibrinotyse-Versuche 27
3.5.5 Auswahl des Puffermediums 28
4 Ergebnisse 30
4.1 Versuchsablauf 30
4.2 Hemmung der Fibrinolyse/Antifibrinolyse durch Antikörper 31
4.2.1 Analyse der Sekretionsüberstände vor und nach Stimlation bzw. NichtStimulation 39
4.3 Vitalität und Aktivität der HUVEC nach Inkubation mit 80%igem Patienten-Serum
42
4.3.1 XTT-TEST 42
4.3.2 Vitalfärbung Ethidiumbromid/Acridinorange (siehe Material und Methoden) 44
4.3.3 Lyseversuche mit Seren aus der Geburtshilfe 48
4.3.4 HELLP-Seren 52
4.3.5 T-PA-Bestimmmung nach Stimulation über 24 Stunden mit unterschiedlichen Seren 53
4.3.6 PAI-Bestimmung nach Stimulation über 24 Stunden mit bestimmten Seren
(gynäkologische Seren) 55
5 Diskussion 57
5.1 Diskussion der Methodik 57
5.1.1 Zellkultur-Untersuchungen 57
5.1.2 Das Gerinnungsmodell 58
Inhaltsverzeichnis 2_
5.1.3 HUVEC als Velreter der Endothelzellen 58
5.1.4 Plasminogen als Versuchsstoff 59
5.2 Fibrinolysesystem 60
5.2.1 Fibrinolyseverhalten der HUVEC (EC) 60
5.2.2 Stimulation von EC 60
5.3 Versuche mit inhibierenden Antikörpern 63
5.3.1 Untersuchungen zur Bedeutung von t-PA und u-PA mittels Antikörpern 63
5.3.2 Unterschiedliche Funktionen von t-PA und u-PA 64
5.3.3 Probleme bei der Nutzung von Antikörpern 65
5.3.4 Nachweis von t-PA im Serum/Überstand 65
5.4 Vitalität der Zellen 66
5.5 Einfluß von geburtshilflichen Seren auf Endothelzellen und die Fibrinolyse 67
5.5.1 Ätiologie des HELLP-Syndrom und der Präeklampsie 67
5.5.2 Theorie der Endothelschädigung - oder Aktivierung? 68
6 Zusammenfassung 73
7 Anhang 74
8 Abkürzungsverzeichnis 76
9 Literaturverzeichnis 77
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