Zusammenhang zwischen Transferrin- und intrazellulärem Cholesterinstoffwechsel:
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| Format: | Abschlussarbeit Buch |
| Sprache: | German |
| Veröffentlicht: |
2004
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| adam_text | Inhaltsverzeichnis
Inhaltsverzeichnis
1 Einleitung 4
1.1 Rezeptor-vermittelte Endozytose 4
1.1.1 LDL-Rezeptor-Stoffwechselweg 5
1.1.2 Transferrin-Rezeptor-Stoffwechselweg 6
1.2 Cholesterinhomöostase 8
1.3 Cholesterin-assoziierte Erkrankungen 9
1.3.1 Tangierkrankheit 12
1.3.2 Wolmankrankheit 15
1.4 Ziel der Arbeit 16
2 Material und Methoden 17
2.1 Geräte 17
2.2 Chemikalien 17
2.3 Verbrauchsmaterialien 17
2.4 Cholesterinbestimmung 18
2.5 Pulse-Chase-Experimente 19
2.5.1 Zellkultur 19
2.5.2 Aufnahmeexperimente mit radioaktiv markiertem Transferrin 20
2.5.3 Pulse-Chase-Experimente mit radioaktiv markiertem Transferrin 20
2.6 Quantifizierung von Transferrinrezeptor, LDL-Rezeptor und Caveolin mittels Western
Blotting 21
2.6.1 SDS-Page 21
2.6.2 Western Blot 22
2.7 Indirekte Immunfluoreszenz 23
1
Inhaltsverzeichnis
2.7.1 Transfektion 23
2.7.2 Immunfluoreszenz 24
3 Ergebnisse 2§
3.1 Charakterisierung des Liganden Transferrin 26
3.2 Cholesterinbestimmung 27
3.2.1 Fibroblasten 28
3.2.2 Humane Hepatomazellen (HuH7) 30
3.3 Aufnahmeexperimente 33
3.3.1 Fibroblasten nach Inkubation in Vollmedium 33
3.4 Pulse-Chase-Experimente 34
3.4.1 Fibroblasten nach Inkubation in LPDS 34
3.4.2 Fibroblasten nach Inkubation in Vollmedium 38
3.4.3 Hepatomazellen nach Inkubation in LPDS mit und ohne Zusatz von LDL 42
3.5 Darstellung von Transferrinrezeptor, LDL-Rezeptor und Caveolin mittels
Western Blot 45
3.6 Immunfluoreszenz 48
3.6.1 Darstellung von Transferrin und seinem Rezeptor in Fibroblasten 48
3.6.2 Darstellung von Transferrin und seinem Rezeptor in vorinkubierten Hepatomazellen 50
3.6.3 Darstellung des ABCl-Transporters in transfizierten ovarialen Hamsterzellen 55
4 Diskussion 57
5 Zusammenfassung «
6 Literaturverzeichnis §4
7 Anhang ZQ
7.1 Abkürzungsverzeichnis 70
2
INHALTSVERZEICHNIS
7.2 Abbildungsverzeichnis 71
7.3 Danksagung 73
7.4 Lebenslauf 74
7.5 Erklärung 75
3
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