Intranukleär replizierende Negativstrang-RNA-Viren: Untersuchungen zum Vermehrungszyklus von Influenza-A-Viren und dem Virus der Bornaschen Krankheit
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| Format: | Buch |
| Sprache: | German |
| Veröffentlicht: |
2002
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| Beschreibung: | Gießen, Univ., Habil.-Schr., 2002 |
| Beschreibung: | 107 S. Ill., graph. Darst. : 21 cm |
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INHALTSVERZEICHNIS
ZUSAMMENFASSUNG 4
EINLEITUNG 6
Geschichte I g
Wirtsspektrum und Verbreitung von Influenza-1 iren und©ß*jltS.Ch« |. 7
Klinische Manifestation 8
Influenza-Viren g
BDV g
Morphologie und Vermehrungszyklus 9
Influenza-Viren g
B°r IIIIZIZZZZ 17
Antigene Eigenschaftenschaften, Variabilität ...jh Pp^.„;„i„cir j 23
Influenza-Viren 23
Genomreplikation 25
Influenza-Viren 25
BDV IIIIIIIIIIIIIIII™25
Methoden zur reversen Genetik für Negativstrang RNA-Viren 27
Influenza-Viren 27
Nichtsegmentierte NegativstrangRNA-Viren (NNS Viren) 30
Virus/Wirt-Interaktionen bei Influenza-Viren und BDV 32
ERGEBNISSE 34
Arbeiten zur Reversen Genetik von Influenza-Viren .34
Expressionsplasmidfir Virusgenom (vRNA)-ähnliche RNA-Polymerase I (Poll) Transkripte 34
In vivo Rekonstitution von biologisch aktiven Ribonukleoprotein-Komplexen (RNPs): Etablierung eines
Plasmid-gestütztenReplikations-SystemsflirVL-RNA 36
Untersuchung vom trans-aktiven Komponenten des Plasmid-gestützten Replikationssystems 40
Influenza Virus abhängige CAT-Genexpression der VL-RNA und ihre Verpackung in neugebildete Virionen
41
Erzeugung klonaler, rekombinanter Influenza-A-Viren mittels der Plasmid-gestützten reversen Genetik... 43
Entwicklung einer neuen Selektionstechnik zur Generierung rekombinanter Influenza-A-Viren mit
synthetischen Hämagglutinin-Segmenten 44
Bedeutung der N-Glykane an Asparagin 123 und 149 des H7-Hämagglutinins des Geflügelpest Virus
(FPV)Jur die Virusvermehrung 45
Erzeugung rekombinanter Influenza-A-Viren mit H7-Hämagglumin und Nl- bzw. N2-Neuraminidase 46
Wachstumscharakteristika der rekombinanten Influenza-A-Viren 46
Arbeiten zur Reversen Genetik für das Virus der Bornaschen Krankheit (BDV) 50
Reverses Genetik System Jür BDV J0
KomP «KSequenzierungzweierBDV-Genome BDVStammH1766undNo/98) 50
Phylogenetischer Stammbaum und Kodierungsstrategie von vier verschiedenen BDV-Isolaten 51
Neu identifizierter offener Leserahmen s3
2
Zusammenfasssung
Primärstruktur der BDVPolymerase 54
Die 5- und 3-Enden des BDV-Genoms 56
Rolle der viral induzierten Raf/MEK/ERK-Signalkaskade für die Vermehrung von Influenza-Viren 61
Aktivierung der Raf/MEK/ERK-Signaltransduktionskaskade durch Influenza Virus Infektion 61
Bedeutung der Raf/MEK/ERK Kaskade fir die Influenza-A-Virus Vermehrung. 64
Wirkung von U0126 aufvirale Genomreplikation, Akkumulation -riraler Proteine und
Transkriptionsaktivität der viralen RNPs 67
Intra-zelluläre Verteilung der RNPs und viraler Kernexport-Proteine 70
In vitro und in vivo Phosphorylierung von NP, Ml und NEP durch ERK 72
Beeinflussung der Kernexport-Funktion von NEP durch U0126 74
Rolle der viral induzierten Raf/MEK/ERK-Signalkaskade für die Vermehrung von BDV 76
Aktivierung der Raf/MEK/ERK-Signaltransduktionskaskade durch BDV Infektion 76
Inhibition der Raf/MEK/ERK-Signaltransduktionskaskade und die Ausbreitung von BDV in Zellkultur 78
Einfluß der 110126-Behandlung von BDV-inflzierten Zellen auf die Bildung von infektiösen Virionen 80
V0126 ist für CRL 1405- und OL-Zellen nicht toxisch 81
DISKUSSION 82
Reverse Genetik zur funktionellen Analyse von Influenza-Viren 82
Grundlagen zur Etablierung der Reversen Genetik für BDV 86
Die RafTMEK/ERK-Signaltansduktionskaskade: eine wichtige VirusAVirt Interaktion für die Vermehrung von
Influenza-Viren und BDV 91
LITERATUR 97
DANKSAGUNGEN 104
ABKÜRZUNGSVERZEICHNIS 105
3
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