Der Einfluss der Wachstumsfaktoren VEGF und bFGF auf die angiogene Aktivität humaner Pankreasadenokarzinom-Zellinien unter Hypoxie:
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2004
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|---|---|
| adam_text | I Inhaltsverzeichnis
Inhaltsverzeichnis
Seite
1. Einleitung 1
2. Material und Methoden 5
2.1 Material 5
2.1.1 Zellkultur 5
2.1.2 RNA-Extraktion 6
2.1.3 cDNA-Synthese 6
2.1.4 PCR 6
2.1.5 Proteinextraktion 7
2.1.6 Western Blot 7
2.1.7 ELISA 7
2.1.8 Endothelzell-Proliferationsassay 8
2.1.9 Dreidimensionaler Angiogeneseassay 8
2.2 Methoden 9
2.2.1 Zellkultur 9
2.2.2 RNA-Extraktion 1°
2.2.3 cDNA-Synthese 11
2.2.4 PCR 12
2.2.4.1 PCRfürbFGF 13
2.2.4.2 PCRfürVEGF 14
2.2.5 Proteinextraktion 15
2.2.6 Western Blot 16
2.2.7 ELISA 17
2.2.8 Endothelzell-Proliferationsassay 18
2.2.9 Dreidimensionaler Angiogeneseassay 19
2.2.10 Statistische Analyse 20
II Inhaltsverzeichnis
3. Ergebnisse 21
3.1 VEGF-Expression unter normoxischen Bedingungen 21
3.1.1 RNA-Ebene 21
3.1.2 Proteinebene 22
3.1.3 VEGF-Sekretion 23
3.2 Auswirkungen von moderater und starker Hypoxie 23
auf die VEGF-Expression
3.2.1 RNA-Ebene 24
3.2.2 Proteinebene 25
3.2.3 VEGF-Sekretion 25
3.3 Angiogene Aktivität 25
3.3.1 Endothelzell-Proliferationsassay 25
3.3.2 Dreidimensionaler Angiogeneseassay 26
3.4 Expression von bFGF 27
4. Diskussion 28
5. Zusammenfassung 33
6. Literaturverzeichnis 34
7. Anhang 42
7.1 Chemikalien 42
7.2 Geräte 43
8. Danksagung 44
9. Lebenslauf 45
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