Einfluss von Substance P auf die Freisetzung der Mediatoren Interleukin 6, Interleukin 8 und Tumornekrosefaktor a [alpha] dermaler Mastzellen des Menschen:
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Format: | Mikrofilm Buch |
Sprache: | German |
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2004
|
Ausgabe: | [Mikrofiche-Ausg.] |
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INHALTSVERZEICHNIS
INHALTSVERZEICHNIS
I.
E
INLEITUNG
1
1.1.
AKTUELLER
STAND
DER
FORSCHUNG
.
1
I.2.
MASTZELLEN
(MASTOZYTEN)
.
1
1.2.1.
ENTWICKLUNG,
DIFFERENZIERUNG,
VORKOMMEN
UND
EIGENSCHAFTEN
I.2.2.
MORPHOLOGIE
UND
SUBTYPEN
(HETEROGENITAET)
I.2.3.
STIMULATION,
AKTIVIERUNG
UND
SIGNALTRANSDUKTION
I.2.4.
MEDIATOREN
1.
2.4.1.
INTERLEUKIN
6
(IL-6,
INTERFERON-SS2,
BSF-2,
MGI-2A)
I.2.4.2.
INTERLEUKIN
8
(IL-8,
NAP-1,
MONAP,
NAF,
TCF,
LAI)
1.2.4.3.
TUMORNEKROSEFAKTOR
A
(TNF-A,
CACHECTIN)
1.2.5.
KLINISCHE
BEDEUTUNG
1.3.
SUBSTANCE
P
.
11
1.3.1.
HISTORISCHER
HINTERGRUND
I.3.2.
AKTUELLE
DATEN
I.4.
ZIELE
DIESER
ARBEIT
.
15
II.
M
ATERIAL
UND
M
ETHODEN
16
11.1.
MATERIAL
.
16
11.1.1.
REAGENZIEN
FUER
DIE
ISOLIERUNG
VON
MASTZELLEN
11.1.2.
STIMULANZIEN
ZUR
AKTIVIERUNG
VON
MASTZELLEN
11.1.3.
REAGENZIEN
FUER
DIE
POLYMERASE-KETTENREAKTION
(PCR)
11.1.4.
GERAETE
11.1.5.
MEDIEN
11.1.5.1.
24
H
-
MEDIUM
ZUR
MASTZELLKULTUR
11.1.5.2.
24
H
-
STIMULATIONSMEDIUM
II.
1.5.3.
TRANSPORTMEDIUM
11.1.5.4.
DISPERGIERMEDIUM
ZUR
MASTZELLISOLATION
11.1.6.
PUFFER/LOESUNGEN
11.1.6.1.
PIPES-STOCK
(10X)
II.
1.6.2.
PAG-LOESUNG
(PIPES-ALBUMIN-GLUCOSE-LOESUNG)
II.
1.6.3.
PAG-CM
(PIPES-ALBUMIN-GLUCOSE
MIT
CALCIUM
UND
MAGNESIUM)
11.1.6.4.
MACS-PUFFER
INHALTSVERZEICHNIS
11.1.7.
REAGENZIEN
FUER
DIE
PCR
11.1.7.1.
PCR-MIX
II.
1.7.2.
AGAROSE-GEL
(2%IG)
II.
2.
METHODEN
.
23
11.2.1.
ISOLIERUNG
MENSCHLICHER
MASTZELLEN
11.2.1.1.
TRENNUNG
VON
EPIDERMIS
UND
DERMIS
II.
2.1.2.
DISPERGIERUNG
DER
DERMIS
II.
2.1.3.
STIMULATIONSKONTROLLE
UND
AUFREINIGUNG
DER
MASTZELLEN
11.2.1.3.1.
STIMULATIONSKONTROLLE
11.2.1.3.2.
AUFREINIGUNG
DER
MASTZELLEN
II.
2.2.
STIMULATION
DER
AUFGEREINIGTEN
MASTZELLEN
MIT
SUBSTANCE
P
II.2.3.
BESTIMMUNG
DER
MEDIATORENPRODUKTION
UND
MEDIATORENFREISETZUNG
MITTELS
ELISA
11.2.3.1.
VORBEREITUNG
11.2.3.2.
MESSUNG
DES
EXTRAZELLULAEREN
MEDIATORENGEHALTES
11.2.3.3.
MESSUNG
DES
INTRAZELLULAEREN
MEDIATORENGEHALTES
11.2.4.
QUANTIFIZIERUNG
MIT
DEM
LIGHTCYCLER
11.2.4.1.
ISOLIERUNG
DER
MASTZELL-RNA
UND
TRANSKRIPTION
IN
CDNA
11.2.4.2.
QUANTITATIVE
REAL-TIME-PCR
.
11.3.
STATISTISCHE
AUSWERTUNG
DER
MESSERGEBNISSE
.
38
II.
E
RGEBNISSE
39
111.1.
MEDIATORENFREISETZUNG
AUS
DERMALEN
MASTZELLEN
DURCH
.
39
SUBSTANCE
P
III.
1.1.
SEZERNIERUNG
DER
MEDIATOREN
INTERLEUKIN
6,
INTERLEUKIN
8
UND
TNF-A
NACH
STIMULIERUNG
MIT
SUBSTANCE
P
UEBER
24
STUNDEN
III.
1.2.
UNTERSUCHUNG
DER
SYNERGISTISCHEN
WIRKUNG
VON
SUBSTANCE
P
(30
PM)
UND
ANTI-LGE
(1:20.000)
III.
2.
INTRAZELLULAERER
MEDIATORENGEHALT
DERMALER
MASTZELLEN
NACH
.
43
STIMULIERUNG
MIT
SUBSTANCE
P
UEBER
24
STUNDEN
III.
3.
UNTERSUCHUNG
ZUR
GENETISCHEN
REGULATION
VON
INTERLEUKIN
6,
.
45
INTERLEUKIN
8
UND
TNF-A
DURCH
SUBSTANCE
P
IN
HAUTMASTZELLEN
MITTELS
QUANTITATIVE
REAL-TIME
PCR-ANALYSE
(LIGHTCYCLER)
111.3.1.
EINFLUSS
VON
SUBSTANCE
P
AUF
DIE
EXPRESSION
VON
LNTERLEUKIN-6-MRNA
III.
3.2.
EINFLUSS
VON
SUBSTANCE
P
AUF
DIE
EXPRESSION
VON
LNTERLEUKIN-8-MRNA
III.
3.3.
EINFLUSS
VON
SUBSTANCE
P
AUF
DIE
EXPRESSION
TNF-A-MRNA
INHALTSVERZEICHNIS
111.4.
ZUSAMMENFASSUNG
DER
ERGEBNISSE
.
49
111.4.1.
ELISA-MESSUNGEN
III.4.2.
LIGHTCYCLER-MESSUNGEN
IV.
D
ISKUSSION
50
IV.
1.
MEDIATOREN
.
52
IV.
1.1.
INTERLEUKIN
6
IV.
1.2.
INTERLEUKINS
IV.
1.3.
TUMORNEKROSEFAKTOR
A
IV.2.
KLINISCHE
RELEVANZ
.
57
V.
Z
USAMMENFASSUNG
59
VI.
L
ITERATUR
60
VII.
D
ANKSAGUNG
69
VIII.
L
EBENSLAUF
70
IX.
E
RKLAERUNG
AN
E
IDES
S
TATT
71 |
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