Entwicklung eines Routineverfahrens zur Identifizierung von HCV-Genotypen:
Gespeichert in:
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| Format: | Abschlussarbeit Buch |
| Sprache: | German |
| Veröffentlicht: |
2001
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| adam_text | Inhaltsverzeichnis
1 EINLEITUNG 6
1.1 Ziel der Arbeit 7
2 EINLEITENDE AUSFÜHRUNGEN ZUM HEPATITIS C VIRUS 8
2.1 Das Hepatitis C Virus (HCV) 8
2.1.1 Morphologie und molekularer Aufbau 9
2.1.2 Virusproteine 13
2.1.3 Infektionsmechanismus und Virusvermehrung (Replikation) 14
2.2 Epidemiologie der HCV Infektion 16
2.3 Klinische Erscheinung 19
2.4 Nachweis der HCV Infektion 22
2.4.1 Bildgebende Verfahren und Leberbiopsie 22
2.4.2 Serologische Diagnostik 22
2.4.3 Molekularbiologische Diagnostik 24
2.5 Therapie der Hepatitis C Virusinfektion 25
3 MATERIAL UND METHODEN 27
3.1 Untersuchungsmaterial 27
3.2 Sequenzvergleiche der HCV 5 NCR 27
3.2.1 Durchführung 27
3.3 Kontrolle der Primer und PCR Bedingungen durch simulierte PCR 29
3.4 Polymerase Ketten Reaktion 29
3.4.1 Amplicor® HCV Test und Amplicor® HCV Monitor Test 30
3.4.2 Genotypenspezifische nested PCR 31
3.4.3 Agarose Gelelektrophorese 32
3.5 Statistische Auswertung der Genotypen Verteilung 34
4 ERGEBNISSE 35
4.1 Sequenzvergleiche der 5 NCR verschiedener HCV Genotypen 35
4.2 Die PCR Primersysteme zur Identifizierung der HCV Genotypen 1 und 3 36
4.2.1 Eigenschaften der verwendeten Primer 36
4.3 Nachweis der Genotypen 1 und 3 42
4.3.1 Seminested PCR mit einem Genotyp spezifischen Primer 42
4.3.2 Nested PCR mit zwei Genotyp spezifischen Primern 46
4.4 Verteilung der HCV Genotypen 49
4
4.5 Anamnestische Begleitparameter der HCV Infektion 53
5 DISKUSSION 57
6 ZUSAMMENFASSUNG 64
7 LITERATURVERZEICHNIS 66
8 ANHANG
Danksagung
Erklärung
Lebenslauf
5
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