Untersuchungen zum Wirkmechanismus des Angiogeneseinhibitors Endostatin:
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| Format: | Abschlussarbeit Buch |
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| Veröffentlicht: |
2004
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| adam_text | Inhaltsverzeichnis 1
Inhaltsverzeichnis
1. Einleitung 1
1.1. Adulte Gefäßneubildung 2
1.2. Regulation der Angiogenese 6
1.2.1. Körpereigene Stimulatoren der Angiogenese 6
1.2.1.1. VEGF 7
1.2.2. Körpereigene Inhibitoren der Angiogenese 9
1.2.2.1. Endostatin 9
1.3. Einfluß von hämodynamischen Faktoren auf die 11
Angiogenese
1.4. Hypoxie 13
1.5. Ziel der Dissertation 15
2. Material und Methoden 16
2.1. Kultivieren von Endothelzellen 16
2.2. Zellinkubation 16
2.2.1. Inkubation mit chemischen Substanzen 16
2.2.2. Shear Stress-Exposition 17
2.3. „Scratched wound assay 17
2.4. Hypoxie 18
2.5. Nachweis von NO mittels DAF-2-DA Assay 18
2.6. Transfektion von Plasmid-DNA 19
2.7. Proteinanalyse 19
2.7.1. Aufarbeitung phosphorylierter Proteine 19
2.7.2. Bestimmung der Proteinkonzentration 20
2.7.3. Auftrennung von Proteinen in SDS- 20
Polyacrylamidgelen
2.7.4. Western Blot 20
2.8. Statistik 21
Inhaltsverzeichnis
3. Ergebnisse 22
3.1. Charakterisierung des Einflusses von Endostatin auf 22
den Akt/eNOS Signaltransduktionsweg
3.1.1. Einfluss von Endostatin auf die VEGF-induzierte 22
NO-Freisetzung und Endothelzellmigration
3.1.2. Endostatin wirkt stromabwärts von Akt 24
3.2. Exogen zugeführtes NO kann den Endostatineffekt 26
inhibieren
3.3. Wirkung von Endostatin auf die Phosphorylierung von Akt 27
und eNOS
3.4. Wirkung von Endostatin auf die Shear Stress- 30
vermittelte Endothelzellmigration
3.5. Der Einfluß von Endostatin auf die Hypoxie-vermittelte 31
Endothelzellmigration
4. Diskussion 32
4.1. Bedeutung des Einflusses von Endostatin auf den 32
Akt/eNOS-Signaltransduktionsweg
4.1.1. Inhibierung der VEGF-induzierten NO-Freisetzung 34
4.1.2. Wirkung von Endostatin stromabwärts des Akt/eNOS- 34
Signaltransduktionsweges
4.1.3. Der Endostatineffekt kann inhibiert werden 37
4.2. Bedeutung der endostatinabhängigen 37
Proteinphosphorylierung
4.2.1. Dephosphoryiierung der eNOS 38
4.2.2. Einfluß auf die Akt-Phosphorylierung 40
4.3. Endostatin und die durch Schubspannung vermittelte 40
Endothelzellmigration
4.4. Endostatin und die Hypoxie-vermittelte 40
Endothelzellmigration
Inhaltsverzeichnis III
5. Zusammenfassung 42
6. Abkürzungsverzeichnis 45
7. Literaturverzeichnis 46
8. Teilpublikationen 58
9. Danksagung 59
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