Detektion von Borrelia burgdorferi sensu lato Spezies mittels PCR und reverse line blotting bei Patienten mit verschiedenen klinischen Manifestationen einer Lyme-Borreliose:
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2003
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INHALT
1.
EINLEITUNG
1.1.
GESCHICHTE
UND
EPIDEMIOLOGIE
DER
LYME-BORRELIOSE
5
1.2.
KLINISCHE
MANIFESTATIONSFORMEN
DER
LYME-BORRELIOSE
6
1.3.
DER
ERREGER
B.
BURGDORFERI
UND
SEIN
VEKTOR
IXODES
10
1.4.
PHYLOGENETISCHE
KLASSIFIKATION
VON
B.
BURGDORFERI
SENSU
LATO
14
1.5.
ZIEL
UND
FRAGESTELLUNG
DER
VORLIEGENDEN
ARBEIT
19
2.
MATERIAL
UND
METHODEN
2.1.
KULTIVIERUNG
VON
BORRELIA
BURGDORFERI-ISOLATEN
21
2.2.
AUSWAHL
DES
PATIENTENKOLLEKTIVES
22
2.3.
AUFBEREITUNG
VON
PATIENTENPROBEN
2.3.1.
URIN
UND
GELENKPUNKTAT
22
2.3.2.
LIQUOR
CEREBROSPINALIS
22
2.3.3.
GEWEBE
23
2.3.4.
ALKALISCHE
LYSE
23
2.4.
DIE
POLYMERASE-KETTEN-REAKTION
2.4.1.
REAKTIONSPRINZIP
23
2.4.2.
KOMPONENTEN
25
2.4.3.
PIPETTIERSCHEMA
UND
TEMPERATURPROFIL
DER
BORRELIENSPEZIFISCHEN
PCR
28
2.5.
GELELEKTROPHORESE
30
2.6.
DER
REVERSE
LINE
BLOT
2.6.1.
REAKTIONSPRINZIP
30
2.6.2.
FIXIERUNG
DER
SONDEN
AUF
DER
MEMBRAN
32
2.6.3.
HYBRIDISIERUNG
33
2.7.
KOLORIMETRISCHE
DETEKTION
34
3.
ERGEBNISSE
3.1.
NACHWEIS
UND
DIFFERENZIERUNG
VON
DREI
VERSCHIEDENEN
BORRELIA
BURGDORFERI
SENSU
LATO
SPEZIES
AUS
KULTIVIERTEN
BORRELIENSTAEMMEN
3.1.1.
ZIELGEN:
OSPA
36
3.1.2.
ZIELGEN:
5S/23S
RRNA
39
3.2.
NACHWEIS
UND
DIFFERENZIERUNG
VON
DREI
VERSCHIEDENEN
BORRELIA
BURGDORFERI
SENSU
LATO
SPEZIES
AUS
UNTERSUCHUNGSMATERIAL
VON
BORRELIOSE-PATIENTEN
3.2.1.
AUSWAHL
UND
CHARAKTERISIERUNG
DES
PATIENTENKOLLEKTIVES
42
3.2.2.
ERMITTELTE
BORRELIENSPEZIES
IM
REVERSEN
LINE
BLOT
44
4.
DISKUSSION
48
5.
ZUSAMMENFASSUNG
61
6.
SCHRIFTENVERZEICHNIS
64
7.
VERZEICHNIS
HAEUFIG
BENUTZTER
ABKUERZUNGEN
74
8.
LISTE
DER
VERWENDETEN
GERAETE
UND
CHEMIKALIEN
75
9.
LEBENSLAUF
77
10.
PUBLIKATIONEN
78
11.
ERKLAERUNG
DER
ANTRAGSTELLERIN
79
12.
DANKSAGUNG
80
4 |
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