Aktivität von Transkriptionsfaktoren der STAT-Familie im kolorektalen Karzinom:
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| Format: | Abschlussarbeit Buch |
| Sprache: | German |
| Veröffentlicht: |
2004
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Inhaltsverzeichnis
EINLEITUNG 1
1. Tumorgenese 1
1.1. Allgemeines 1
1.2. Genetische Veränderungen und ihre Ursachen 1
1.3. Zellwachstum, Fehlfunktion von Signalproteinen 3
1.3.1. Onkogene 3
1.3.2. Tumorsuppressorgene 4
1.4. Adenom-Karzinom-Seqenz 4
1.5. Zellzyklus und Apoptose 6
2. Kolorektale Tumoren 9
2.1. Epidemiologie 9
2.1.1. Inzidenzen, Demographie 9
2.2. Ätiologie 10
2.2.1. Risikofaktoren 10
2.2.2. Entstehung kolorektaler Karzinome 10
2.3. Lokalisation 11
2.4. Metastasierung 11
2.5. Pathologie 12
2.5.1. Wachstumsformen 12
2.5.2. Histologische Typen 12
2.5.3. Klassifikationen 13
2.5.3.1. Malignitätsgrad 13
2.5.3.2. TNM-Klassifikation 13
2.6. Diagnostik und Screening 14
2.7. Therapie 15
2.7.1 Konventionelle Therapiestrategien 15
2.7.2. Neuere molekularbiochemische Therapieansätze 16
3. Jak-Stat-Signalweg 17
4. Ziele der Arbeit 22
MATERIAL UND METHODEN 23
1. Materialien 23
1.1. Herstellernachweis 23
1.2. Antikörper 25
2. Methoden 26
2.1. Zeil- und Gewebelyse 26
2.2. SDS-Polyacrylamid-Gelelektrophorese 27
2.3. Western Blotting 28
2.4. Stripping der Nitrocellulosemembran 31
2.5. Electrophoretic mobility shift assay (EMSA) 31
2.5.1. Supershift 32
2.6. Kultivierung der Zelllinien 33
2.7. Zytokinstimulation von Zelllinien 34
Inhaltsverzeichnis
2.8. Zytokinstimulation der Zelllinien in serumfreien Medium 34
2.9. Histologisch-mikroskopische Gewebeschnittuntersuchungen 35
2.10. Sammlung pathologisch-morphologischer Daten der Karzinom- und Randgewebs-
proben 36
ERGEBNISSE 37
1. Aktivität und Expression von Stat-Proteinen im kolorektalen Karzinom und
angrenzenden Gewebe 37
1.1. Stat 1- und Stat3-Aktivität 37
1.2. Stat3-Expression 43
2. Charakterisierung des Stat3 -Signalweges in ausgewählten Modellzelllinien des
kolorektalen Karzinoms 45
2.1. Stat3-Expression und Aktivierung 45
2.2. Einfluss von Zytokinstimulationen auf die DNA-Bindung 47
2.2.1. Interleukin 6-Familie 47
2.2.2. Interferon-y 49
3. StatS im kolorektalen Karzinom und in kolorektalen Zelllinien 50
3.1. Stat5-Aktivierung und -Expression in malignen kolorektalen Tumoren und
angrenzendem Gewebe 50
3.2. Stat5-Aktivierung in den kolorektalen Karzinomzelllinien HT29, CaCo2 und
SW480 53
4. Morphologie der kolorektalen Tumor- und Randgewebe und Versuch der
Korrelation mit Daten zur Stat-Aktivierung 54
4.1. Entzündungszeichen im Gewebestroma 55
4.2. Gesammelte pathologisch-morphologische Daten 58
4.2.1. Zusammengefasste Daten der kolorektalen Karzinomgewebsproben 59
4.2.2. Vergleich pathologisch-morphologischer Daten der kolorektalen Tumor- und
Randgewebsproben 62
DISKUSSION 66
1. Stat3 im kolorektalen Karzinom 66
2. Andere Stat-Proteine in kolorektalen Karzinomen 78
3. Biochemische Charakterisierung der Patientenproben im Kontext von
pathologisch-morphologischen Daten 85
ZUSAMMENFASSUNG 88
REFERENZEN 90
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