Differentielle Chemokin-Expression bei der murinen Toxoplasma-Enzephalitis: Kinetik, zelluläre Quellen sowie Regulation durch Interferon-g [Interferon-gamma] und wirtsgenetische Faktoren:
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2004
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Inhaltsverzeichnis
1. Einleitung 6
1.1 Rekrutierung, Adhäsion und Migration von Immunzdlen im ZNS 6
1.2 Chemokine 6
13 Die murine Toxoplasma-Enzephalitis 8
2. Material und Methoden 10
2.1. Versuchsaufbau 10
2.1.1 Versuchstiere 10
2.1.2 Infektion mit Toxoplasma (T.) gondii 10
2.13 Experimentelles Vorgehen und Gewebeaufarbeitung 10
2.1.4 Liste der verwendeten Antikörper 11
2.2. Immunhistochemie 12
23. Durchflußzytometrie / FACS-Analyse 14
f
1
4
2.4. Reverse Transkriptase-Polymerasenkettenreaktion (RT-PCR)
und Ribonuklease Protection Assay (RPA) zur Untersuchung
der Zytokin und Chemokin mRNA 16
2.4.1 mRNA-Extraktion 16
2.43. cDNA-Synthese 18
2.43 RT-PCR 18
2.4.4 Gelelektrophorese 22
2.4.5 Southern Blot 22
2.4.6 Hybridisierung 23
2.4.7 Detektion 23
2.4.8 Ribonuklease Protection Assay (RPA) 24
2.5 In Situ Hybridisierung zur Klärung der Frage nach den zellulären
Quellen von CRG-2/IP-10, RANTES, MuMIG und MCP-1 im ZNS 27
2.6 Statistische Auswertung 32
3. Fragestellung und Ergebnisse 33
3.1 Induktion der Toxoplasma-EmephaVitis in C57BL/6-, BALB/c-
undlFN-Y^-Mäusen 33
3.2 Chemokine werden in C57BL/6-, BALB/c- und BFN-Y^-Mäusen
unterschiedlich exprhniert 39
33 Sowohl residente Gehirnzellen als auch entzündliche Leukozyten
exprimieren Chemokin mRNA bei der TE und werden durch
spezifische Chemokinprofile charakterisiert 43
5
4. Diskussion 50
5. Zusammenfassung 56
6. Literaturverzeichnis 58
7. Abkürzungsverzeichnis 67
8. Danksagung 69
9. Lebenslauf 70
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