TNF-a-Freisetzung bei myokardialer Ischämie, Reperfusion: Rolle von TACE und kardialen Mastzellen
Gespeichert in:
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| Format: | Buch |
| Sprache: | German |
| Veröffentlicht: |
2004
|
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| Beschreibung: | München, Univ., Diss., 2004 |
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INHALTSVERZEICHNIS
INHALTSVERZEICHNIS
I.
EINLEITUNG
.
1
1.
1
MYOKARDIALE
ISCHAEMIE
UND
REPERFUSIONSSCHAEDEN
.
1
1.1.1
BILDUNG
VON
OXIDANZIEN
UND
RADIKALEN
IM
REPERFUNDIERTEN
MYOKARD
.
2
1.1.2
TUMOR-NEKROSE-FAKTOR-A
(TNF-A)
.
4
1.1.3
ROLLE
VON
TNF-A
FUER
DEN
MYOKARDIALEN
REPERFUSIONSSCHAEDEN
.
6
1.2
TNF-A
CONVERTING
ENZYME
(TACE/ADAM17)
.
8
1.3
FRAGESTELLUNG
UND
EXPERIMENTELLER
ANSATZ
.
10
II.
MATERIAL
UND
METHODEN
.
.
11
II.
1
MATERIAL
UND
BEZUGSQUELLEN
.
11
II.
1.1
SUBSTANZEN
.
11
II.
1.2
PUFFER
UND
LOESUNGEN
.
14
II.
1.3
NUCLEINSAEUREN
.
18
II.
1.4
ANTIKOERPER
.
18
II.
1.5
ELISA-KITS
.20
II.
1.6
TIERE
.20
II.2
METHODEN
.
20
II.2.
1
VERSUCHE
AM
ISOLIERTEN
RATTENHERZEN
.
20
II.2.2
ZELLKULTUR
.
24
II.2.3
ISOLIERUNG
VON
ZELLEN
AUS
HUMANEM
PERIPHEREN
BLUT
.
25
II.2.4
LYSE
VON
ZELLEN
.
25
II.2.5
HOMOGENISIERUNG
VON
HERZEN
FUER
TACE-WESTEM
BLOT
.
26
II.2.6
OXIDATIVE
STIMULIERUNG
VON
ZELLEN
.26
II.2.7
NACHWEIS
VON
TNF-A
IM
UEBERSTAND OXIDATIV
STIMULIERTER
ZELLEN
.
27
II.2.8
MESSUNG
VON
TNF-A
AUF
DER
OBERFLAECHE
OXIDATIV STIMULIERTER
ZELLEN
.
27
INHALTSVERZEICHNIS
II.2.9
SPALTUNG
DES
FLUOROGENEN
PEPTIDS
DABCYL-TNF-A-EDANS
.
28
II.2.
10
SPALTUNG
VON
AC-SPLAQAVR.SSSR.-NH2
DURCH
INTAKTE
ZELLEN
.
29
II
.2.11
HIGH
PRESSURE
LIQUID
CHROMATOGRAPHY
(HPLC)
.29
II.2.
12
HISTOCHEMISCHE
UND
IMMUNHISTOCHEMISCHE
METHODEN
.30
II
.2.13
IMMUNFLUORESZENZ-MIKROSKOPIE
.
31
II.2.
14
SDS-POLYACRYLAMID-GELELEKTROPHORESE
(SDS-PAGE)
.
31
II.2.15
WESTERN
BLOTTING
.
31
II.2.
16
ANFAERBUNG
VON
PROTEINEN
AUF
NITROZELLULOSEMEMBRANEN
.
31
II.2.
17
IMMUNOLOGISCHER
NACHWEIS
VON
PROTEINEN
AUF
NITROZELLULOSEMEMBRANEN
.
31
II.2.18
STATISTISCHE
METHODEN
.
32
III.
ERGEBNISSE
.
33
III.
1
ISCHAEMISCHE,
REPERFUNDIERTE
RATTENHERZEN
SETZEN
TNF-A
FREI
.
33
III.2
QUELLEN
FUER
TNF-A
UND
TACE
IM
HERZEN
.
35
III.3
ROLLE
DER
MASTZELLDEGRANULATION
FUER
DIE
POSTISCHAEMISCHE
TNF-A
FREISETZUNG
AUS
RATTENHERZEN
.
37
III.4
TNF-A-FREISETZUNG
AUS
RATTENHERZEN
IST
ABHAENGIG
VOM
REDOX
STATUS
.
39
III.4.
1
DIE
TNF-A-FREISETZUNG
WAEHREND
DER
REPERFUSION
IST
ABHAENGIG
VON
MOLEKU
LAREM
SAUERSTOFF
UND
VOM
EXTRAZELLULAEREN
REDOXSTATUS
.
39
III.4.2
BEI
NICHTISCHAEMISCHEN
HERZEN
WIRD
DURCH
BEHANDLUNG
MIT
OXIDANZIEN
EINE
TNF-A-FREISETZUNG
AUSGELOEST
.40
III.5
ROLLE VON
TACE
FUER
DIE
POSTISCHAEMISCHE
TNF-A-FREISETZUNG
AUS
DEM
HERZEN
.
41
III.
5.1
ISCHAEMIE/REPERFUSION
FUEHRT
WEDER
ZU
EINER
INDUKTION,
NOCH
ZUR
VERMEHRTEN
PROTEOLYTISCHEN
AKTIVIERUNG
VON
MYOKARDIALEM
TACE
.
42
III.5.2
ISCHAEMIE/REPERFUSION
BEWIRKT
KEINE
SIGNIFIKANTE
ZUNAHME
DER
TACE-SPEZIFI
SEHEN
PROTEOLYTISCHEN
AKTIVITAET
IN
HERZGEWEBE
.
43
III.5.3
EIN
MMP-INHIBITOR
HEMMT
DIE
FREISETZUNG
VON
TNF-A
AUS
RATTENHERZEN
.
45
III.6
OXIDATIVE
AKTIVIERUNG
VON
TACE
IM
ZELLMODELL
.
46
III.6.
1
SPALTUNG
VON
TNF-A-PEPTID
DURCH
INTAKTE
PBL
UND
PBL
MEMBRANFRAKTIONEN
.
46
III.6.2
AKUTE
ABGABE
VON
TNF-A
IN
DEN
UEBERSTAND
OXIDATIV
STIMULIERTER
ZELLEN
.
47
III.6.3
AKUTE
FREISETZUNG
VON
TNF-A
VON
DER
OBERFLAECHE
OXIDATIV
STIMULIERTER
ZELLEN
.
49
III.
7
HMC-1
ALS
MODELL
FUER
MASTZELLEN
.
51
III.
7.1
HMC
1
EXPRIMIEREN
TACE,
JEDOCH
KAUM
TNF-A
.
51
III.7.2
DIE
SPALTUNG
EINES
TNF-A-PEPTIDS
DURCH
HMC-1
IST
OXIDATIV
STIMULIERBAR
.
52
III.7.3
DIE
BEHANDLUNG
VON
HMC-1
MIT
OXIDANZIEN
FUEHRT
NICHT
ZU
EINER
VERMEHRTEN
PROTEOLYTISCHEN
AKTIVIERUNG
VON
TACE
.
54
III.7.4
VORARBEITEN:
TRANSIENTE
EXPRESSION
VON
TNF-A
IN
HMC-1
.
55
INHALTSVERZEICHNIS
IV.
DISKUSSION
.57
IV.
1
DIE
POSTISCHAEMISCHE
TNF-A-FREISETZUNG
AUS
HERZEN
IST
ABHAENGIG
VON
REDOX-STRESS
.
57
IV.2
ROLLE
VON
MASTZELLEN
.
59
IV.2.1
QUELLEN
FUER
TNF-A
IM
HERZGEWEBE
.
59
IV.2.2
TNF-A-FREISETZUNG
AUS
MASTZELLEN:
DEGRANULATION
ODER
REGULIERTE
EXOZYTOSE?
.
60
IV.2.
3
KETOTIFEN
ALS
INHIBITOR
DER
TNF-A-FREISETZUNG
AUS
DEM
HERZEN
.
61
IV.3
ROLLE
VON
TACE
.
62
IV.4
OXIDATIVE
AKTIVIERUNG
VON
TACE
IM
ZELLMODELL
.
63
IV.5
HMC-1
ALS
MODELL
FUER
KARDIALE
MASTZELLEN
.
65
IV.6
TNF-A-EXPRIMIERENDE
HMC-1:
EIN
GEEIGNETES
MODELL
FUER
STUDIEN
ZUR
OXIDATIVEN
TACE-AKTIVIERUNG?
.
67
V.
ZUSAMMENFASSUNG
.
68
VI.
LITERATURVERZEICHNIS
.
73
VII.
PUBLIKATIONEN
.
86
VIII.
ANHANG
.88
VIII.
1
ABKUERZUNGEN
.
88
VIII.
2
SEQUENZEN
.
90 |
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