Proliferation und Zellzyklusveränderungen von Lungenfibroblasten an Hand der Pulse-Labeling-Methode unter dem Einfluss einer Kokultur mit bestrahlten Fibroblasten oder TGF-Beta 1:
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| Veröffentlicht: |
2004
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| Beschreibung: | Würzburg, Univ., Diss., 2004 |
| Beschreibung: | 67 S. graph. Darst. |
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Seite
1. EINLEITUNG 1
II. FRAGESTELLUNG 4
III. MATERIAL UND METHODIK 5
Grundlagen der Zellbehandlung 5
1 Zellisolierung 5
2. Kulturbedingungen 5
2 1 Bestandteile des Kulturmediums 5
2.2 Medium Wechsel 6
3. Passage der Zellen 7
4. Zellzählung und -aussaat 7
5 Einfrieren und Auftauen der Zellen 8
5.1 Einfrieren 8
5.2 Auftauen 8
A. Messung des Proliferationsverhaltens von Rattenlungen-
fibroblasten unter dem Einfluss von TGF-ßl mittels
BrdU-Immunoassay 9
1 Messprinzip 9
2 Versuchsdurchführung 10
B. Kinetische ZellzykJusanalyse von Rattenlungenfibroblasten
mittels Bromodeoxyuridine-Labeling und Flowcytometer 12
1. Grundlagen der Messmethode 12
2. Datenauswertung 14
3. Reagenzien und Lösungen •
4 Versuchsablauf 19
4.1 Proliferationskinetik von Rattenlungenfibroblasten unter dem
EinflussvonTGF-ßl 19
4.2 Zellzyklusverhalten von Rattenlungenfibroblasten unter dem
Einfluss einer Kokultur mit bestrahlten Fibroblasten 20
5. Protokoll der Farbe-Prozedur mit den fixierten Zellen 25
IV. ERGEBNISSE 27
A. Messung des Proliferationsverhaltens von Rattenlungen¬
fibroblasten unter dem Einfluss von TGF-ßl mittels
BrdU-Immunoassay 27
B. Kinetische Zellzyklusanalyse von Rattenlungenfibroblasten
mittels Bromodeoxyuridine-Labeling und Flowcytometer 29
1 Proliferationskinetik von Rattenlungenfibroblasten unter dem
EinflussvonTGF-ßl 29
2 Zellzyklusverhalten von Rattenlungenfibroblasten unter dem
Einfluss einer Kokultur mit bestrahlten Fibroblasten 33
V. DISKUSSION 39
A. Messung des Proliferationsverhaltens von Rattenlungen¬
fibroblasten unter dem Einfluss von TGF-ßl mittels
BrdU-Immunoassay 41
B. Kinetische Zellzyklusanalyse von Rattenlungenfibroblasten
mittels Bromodeoxyuridine-Labeling und Flowcytometer 44
1. Proliferationskinetik von Rattenlungenfibroblasten unter dem
EinflussvonTGF-ß1 45
2. Zellzyklusverhalten von Rattenlungenfibroblasten unter dem
Einfluss einer Kokultur mit bestrahlten Fibroblasten 48
VI. ZUSAMMENFASSUNG 52
VII. LITERATURVERZEICHNIS 53
VIII. ANHANG 61
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