Tumormarker in der Pädiatrie: modifizierte Nucleoside
Gespeichert in:
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Veröffentlicht: |
Hamburg
Kovač
2004
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adam_text | VII
Inhaltsverzeichnis
1 Einführung 1
2 Zur Definition und zur Anwendung von Tumormarkern 5
2.1 Die Tumormarker 5
2.1.1 Einführung 5
2.1.2 Definition der Tumormarker 6
2.1.3 Klassifizierung der Tumormarker 6
2.1.4 Kriterien an einen Tumormarker 8
2.1.5 Konzentrationen von Tumormarkern 12
2.1.6 Klinischer Einsatz von Tumormarkern 12
2.1.7 Zeitplan zur Bestimmung von Tumormarkern 1S
2.1.8 Störeinflüsse bei der Bestimmung von Tumormarkern 16
2.2 Tumormarker in der Pldiatrischen Onkologie 18
2.3 Nucleoside ab Tumormarker 21
2.3.1 Historie 21
2.3.2 Nucleoside als Tumormarker bei unterschiedlichen malignen
Erkrankungen 23
2.4 Ansteigen der Nucleosidspiegel bei anderen Erkrankungen 27
2.5 Nucleoside als Tumormarker in der PJdUtrischen Onkologie 30
2.6 Probenmaterial 32
2.7 Die unterschiedlichen Nachweismethoden Ar Nucleoside 34
3 Biochemie der Nucleoside 37
3.1 Definition des Nudeofids 37
3.2 Die unterschiedlichen Nacleoside 38
33 Biosynthese der Hauptradeotide 42
3.3.1 Synthese von Purinnucleotiden 42
3.3.2 Regulierung der Purirmucleotid-Biosynthese 45
3.3.3 Purin-Recycling 46
Vffl
3.3.4 Synthese von Pyrimidinnucleotiden 47
3.3.5 Regulierung der Pyrimidinnucleotid-Biosynthese 49
3.4 Katabolismus der Nucleotide 51
3.4.1 Abbau der Purine 52
3.4.2 Abbau der Pyrimidine 54
3.5 Interkonversion von modifizierten Nucleosiden 55
3.6 Kompartimentierung 56
3.6.1 Intra-und extrazelluläres Kompartiment 56
3.6.2 Intrazelluläre Kompartimentierung 56
3.7 Die Transfer-RNA 57
3.7.1 Struktur der tRNA 57
3.7.2 Prozessierung der tRNA 59
3.7.3 Funktion der tRNA 61
3.8 tRNA Modifizierungen 62
3.8.1 Die unterschiedlichen modifizierten Nucleoside 62
3.8.2 Positionen der modifizierten Nucleoside in der tRNA 68
3.8.3 Vorkommen von modifizierten Nucleosiden in
unterschiedlichen Organismen 71
3.8.4 Synthese der modifizierten Nucleoside in der tRNA 72
3.8.4.1 Die Enzyme 72
3.8.4.2 Metabolische Aspekte bei der Synthese von
modifizierten Nucleosiden 75
3.8.4.3 Einfluß von unterschiedlichen Faktoren auf die
Modifizierungen der tRNA 76
3.8.5 Funktion der modifizierten Nucleoside in der tRNA 77
3.8.5.1 Modifizierte Nucleoside neben dem 3 -Ende
des Anticodons (Position 37) 78
3.8.5.2 Modifizierte Nucleoside in der Wobble Position
(Position 34) 80
3.8.5.3 Modifizierte Nucleoside in anderen Positionen
der Anticodonregion 81
K
3.8.5.4 Modifizierte Nucleoside außerhalb der Anticodon-
region 81
3.8.6 Regulatorische Rolle der modifizierten Nucleoside in
dertRNA 82
4 Material und Methode 84
4.1 Die Bestimmungsmethode 84
4.1.1 Erstellen der Absorptionsspektren 8 5
4.1.2 Probenaufbereitung 88
4.1.3 Apparative HPLC-Bedingungen 92
4.1.4 Bestimmung der Retentionszeiten der Nucleoside 93
4.1.5 Kalibrieren der HPLC-Anlage 97
4.1.6 Übertragung der Methode auf biologisches Material 101
4.1.7 Formulieren des Endergebnisses 103
4.2 Validierung der Methode 103
4.2.1 Prüfung auf apparative Reproduzierbarkeit 103
4.2.2 Prüfung auf Reproduzierbarkeit des gesamten Ansatzes 105
4.2.3 Linearitätskontrolle des Meßbereiches 107
4.2.4 Bestimmung der unteren Nachweisgrenze 109
4.2.5 Zusammenfassung 112
4.3 Die Probanden 112
4.3.1 Kollektiv der gesunden Probanden 112
4.3.2. Kollektiv der Malignompatienten 113
4.4 Gewinnung des Probenmaterials 113
5 Ergebnisse der Studie 115
5.1 Ergebnisse aus dem Kollektiv der gesunden Probanden 115
5.1.1 Struktur des Kontrollkollektivs 115
5.1.2 Nachweisbare Nucleoside 116
5.1.3 Geschlechtsabhängigkeit der Nucleosidkonzentrationen 117
5.1.4 Altersabhängigkeit der Nucleosidkonzentrationen 117
X
5.1.4.1 Altersabhängigkeit der Nucleosidkonzentrationen
vom 1. bis zum 19. Lebensjahr 118
5.1.4.2 Altersabhängigkeit der Nucleosidkonzentrationen
im ersten Lebensjahr 121
5.1.5 Funktionsgesetze, die die Veränderungen der Nucleosid¬
konzentrationen mit steigendem Alter beschreiben 126
5.1.6 Angabe von Referenzwerten für die unterschiedlichen
Nucleoside 128
5.1.7 Einrichten von definitiven Altersklassen 134
5.1.8 Angabe von Referenzwerten für die unterschiedlichen
Nucleoside in den neu eingerichteten Altersklassen 136
5.1.9 Korrelationen der Nucleosidkonzentrationen untereinander
bei gesunden Testpersonen 138
5.2 Ergebnisse aus dem Kollektiv der Tumorpatienten 140
5.2.1 Struktur des Patientenkollektivs 140
5.2.2 Nachweisbare Nucleoside 142
5.2.3 Vergleich der Nucleosidkonzentrationen von Malignom¬
patienten vor Einleitung der Therapie mit den aufgestellten
Referenzwerten 142
5.2.4 Statistische Auswertung der Nucleosidkonzentrationen bei
gesunden Testpersonen und Tumorpatienten zum Zeitpunkt
der Diagnose 148
5.2.5 Vergleich der Nucleosidkonzentrationen von Patienten
in einer gesicherten Remission mit den aufgestellten
Referenzwerten 153
5.2.6 Statistische Auswertung der Nucleosidkonzentrationen von
Patienten in Remission einer malignen Erkrankung 160
5.2.7 Korrelationen der Nucleosidkonzentrationen untereinander
bei Malignompatienten zum Zeitpunkt der Diagnose 163
5.2.8 Einfluß von therapeutischen Maßnahmen auf die Nucleosid¬
konzentrationen 164
5.2.9 Langzeitbeobachtung 170
XI
5.3 Veränderungen der Nucleosidkonzentrationen durch andere
Einflüsse 173
5.4 Weitere Peaks 174
6 Diskussion 176
6.1 Diskussion der Bestimmungsmethode 176
6.1.1 Auswahl der zu bestimmenden Nucleoside 176
6.1.2 Optimierung der Bestimmungsmethode 178
6.1.3 Auswahl des Probenmaterials 180
6.1.4 Alternative Nachweisverfahren 182
6.1.5 Qualitätskriterien für Trennungen 182
6.1.6 Vorschläge zur weiteren Optimierung der Methode 183
6.2 Diskussion der Ergebnisse der Studie 185
6.2.1 Die Probanden 185
6.2.2 Geschlechtsabhängigkeit der Nucleosidkonzentrationen 186
6.2.3 Altersabhängigkeit der Nucleosidkonzentrationen 187
6.2.4 Die Referenzwerte 190
6.2.5 Nucleosidkonzentrationen bei Malignompatienten vor
Beginn der Therapie 191
6.2.6 Nucleosidkonzentrationen von Patienten in Remission
einer malignen Erkrankung 194
6.2.7 Auswirkung der antineoplastischen Therapie auf die
Nucleosidkonzentrationen 195
6.2.8 Langzeitbeobachtung 196
6.2.9 Veränderungen der Nucleosidkonzentrationen durch
andere Einflüsse 197
6.3 Biochemische Betrachtungen 198
6.4 Abschließende Bewertung von Nucleosiden als potentielle
Tumormarker bei malignen Erkrankungen im Kindesalter 200
7 Zusammenfassung 203
8 Literaturverzeichnis 208
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