Gentransfer löslicher Guanylylzyklase in Endothelzellen und vaskuläre glatte Muskelzellen mit Replikations-defizienten Adenoviren:
Gespeichert in:
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| Sprache: | German |
| Veröffentlicht: |
2003
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| Beschreibung: | Würzburg, Univ., Diss., 2003 |
| Beschreibung: | 49 S. Ill., graph. Darst. |
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Einleitung 1_
Übersicht 1
Der NO/cGMP-Signalweg 2
WO und die NO-Synthasen 2
Funktionen und Regulation der löslichen Guanyiylzyklase 2
Der Second Messenger cGMP. 5
Pathophysiologie der Restenose 6
Pathophysiologie der Gefäßretraktion und des Gefäßumbaus 6
Pathophysiologie der Ausbildung der hyperplastischen Neointima 7
Die Rolle von NO in der Pathophysiologie der Gefäßretraktion und des
Gefäßumbaus 7
Die Rolle von NO in der Pathophysiologie der Ausbildung der
hyperplastischen Neointima 7
Therapeutisches Potential des NO/cGMP-Systems 9
Fragestellungen 10
Material 11_
Chemikalien 11
Zellkultur 13
Geräte 13
Sonstiges Material 14
Verwendete Lösungen 15
Matrices für SDS-Polyacrylamidgelelektrophorese 16
Methoden 17_
Konstruktion der rekombinanten adenoviralen hsGC-Vektoren 17
Zellkultur 18
Infektion der Zellinien 18
Zellemte 19
Proteinbestimmung nach Bradford 19
Polyacrylamidgelelektrophorese und Western Blot 20
sGC-Aktivitätsassay 22
Proltferations-Assay 23
Ergebnisse 24
Abhängigkeit der sGC-Expression und -Aktivität von der Menge an
adenoviralen Vektoren 24
sGC - Expression 24
sGC -Aktivität 25
Zeitabhängigkeit der sGC 27
sGC - Expression 27
sGC- Aktivität 28
Infektion mit einer Untereinheit 29
sGC - Expression 29
sGC-Aktivität 30
Enzymcharakterisierung rekombinanter sGC 30
Abhängigkeit der sGC -Aktivität vom Substrat GTP 31
Abhängigkeit der sGC-Aktivität von verschiedenen NO-Donoren und
Cofaktoren 32
Abhängigkeit der sGC-Aktivität vom NO-Donor DEANONOate 32
Abhängigkeit der sGC-Aktivität vom NO-Donor SNP 32
Antiproliferativer Effekt von sGC 34
Diskussion 35
Zusammenfassung 39
Literaturverzeichnis 40
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