Präklinische experimentelle Untersuchungen zu Indirubin-3'-monoxamin, einem neuen Inhibitor cyclin-abhängiger Kinasen für die Therapie des Harnblasenkarzinoms:
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2003
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INHALTSVERZEICHNIS:
SEITE
1.
EINLEITUNG
8
1.1.
DAS
HAMBLASENKARZINOM
9
1.1.1.
EPIDEMIOLOGIE
9
1.1.2.
AETIOLOGIE
10
1.1.3.
PATHOGENESE
UND
STADIENEINTEILUNG
11
1.1.4.
MOLEKULARE
BIOLOGIE
DES
HAMBLASENKARZINOMS
14
1.1.5.
PROGNOSE
DES
HAMBLASENKARZINOMS
15
1.2.
THERAPIE
DES
HAMBLASENKARZINOMS
16
1.2.1.
THERAPIE
DES
OBERFLAECHLICHEN
BLASENKARZINOMS
16
1.2.2
.
THERAPIE
DES
MUSKELINFILTRIERENDEN
BLASENKARZINOMS
18
1.2.3.
THERAPIE
DES
METASTASIERTEN
BLASENKARZINOMS
19
1.3
DER
ZELLZYKLUS
'
22
1.3.1
DIE
ROLLE
DER
CDKS
IN
ZELLZYKLUS
23
1.3.2.
DER
CDK1/CYCLINB-KOMPLEX
UND
DER
EINTRITT
IN
DIE
MITOSE
24
1.4.
APOPTOSE
25
1.5.
STOERUNGEN
BEIM
HAMBLASENKARZINOM
IN
ZELLZYKLUS
UND
APOPTOSE
27
1.6.
PACLITAXEL
1.6.1.
GESCHICHTE
,
GEWINNUNG
UND
NEBENWIRKUNGEN
29
1.6.2.
ZELLULAERE
WIRKMECHANISMEN
30
1.7.
INDIRUBIN
UND
LNDIRUBIN-3-MONOXAMIN
1.7.1
GESCHICHTE,
GEWINNUNG
UND
NEBENWIRKUNGEN
32
1.7.2.
ZELLULAERE
WIRKMECHANISMEN
33
1.8.
FRAGESTELLUNG
34
2.
MATERIAL
UND
METHODEN
2.1.
ZELLLINIEN
35
2.2.
KULTUR
DER
ZELLEN
35
2.3.
ANSETZEN
DER
MEDIKAMENTENLOESUNGEN
37
2.4.
ZELLPROLIFERATIONSTEST
UND
ZYTOTOXIZITAETSASSAY
37
2.5.
STATISTISCHE
AUSWERTUNG
DER
ZYTOTOXIZITAETSASSAYS
39
2.6.
DURCHFLUSSZYTOMETRIE
41
2.6.1.
APOPTOSEDETEKTION
MITTELS
ANNEXIN
V-FITC
UND
PROBIDIUMIODID
42
2.6.2.
DETEKTION
VON
SURVIVIN
43
2.7.
IMMUNOBLOTTING
IM
WESTERN-BLOT
45
2.7.1.
IMMUNOBLOTTING
MIT
ANTIKOERPER
GEGEN
PARP
49
2.7.2.
IMMUNOBLOTTING
MIT
ANTIKOERPER
GEGEN
CDK1
50
2.7.3.
IMMUNBLOTTING
MIT
ANTIKOERPER
GEGEN
SURVIVIN
50
2.8.
3.
FOTOGRAFISCHE
DOKUMENTATION
ERGEBNISSE
51
3.1.
ERGEBNISSE
DER
RT1
1
2-ZELLEN
52
3.1.1.
ERGEBNISSE
DER
ZYTOTOXIZITAETSASSAYS
52
3.1.2
APOPTOSEDETEKTION
BEI
BEHANDELTEN
RT112
ZELLEN
58
3.1.3.
SURVIVINEXPRESSION
DER
RT112-ZELLEN
61
3.1.4.
VERAENDERUNG
DER
CDK1
-EXPRESSION
NACH
BEHANDLUNG
63
3.1.5.
3.2.
FOTOGRAPHISCHE
DOKUMENTATION
DER
BEHANDELTEN
RT112-ZELLEN
ERGEBNISSE
DER
RT4-ZELLEN
64
3.2.1.
ERGEBNISSE
DER
ZYTOTOXIZITAETSASSAYS
65
3.2.2
APOPTOSEDETEKTION
BEI
BEHANDELTEN
RT4-ZELLEN
70
3.2.3.
SURVIVINEXPRESSION
DER
RT4-ZELLEN
74
3.2.4.
VERAENDERUNG
DER
CDK1-EXPRESSION
NACH
BEHANDLUNG
76
3.2.5.
3.3.
FOTOGRAPHISCHE
DOKUMENTATION
DER
BEHANDELTEN
RT4-ZELLEN
ERGEBNISSE
DER
T24-ZELLEN
77
3.3.1.
ERGEBNISSE
DER
ZYTOTOXIZITAETSASSAYS
78
3.3.2
APOPTOSEDETEKTION
BEI
BEHANDELTEN
T24-ZELLEN
83
3.3.3
SURVIVINEXPRESSION
DER
T24-ZELLEN
87
3.3.4.
VERAENDERUNG
DER
CDK1-EXPRESSION
NACH
BEHANDLUNG
88
3.3.5.
3.4.
FOTOGRAPHISCHE
DOKUMENTATION
DER
BEHANDELTEN
T24-ZELLEN
ERGEBNISSE
DER
SUP-ZELLEN
89
3.4.1.
ERGEBNISSE
DER
ZYTOTOXIZITAETSASSAYS
90
3.4.2
APOPTOSEDETEKTION
BEI
BEHANDELTEN
SUP-ZELLEN
95
3.4.3.
SURVIVINEXPRESSION
DER
SUP-ZELLEN
99
3.4.4.
VERAENDERUNG DER
CDK1-EXPRESSION
NACH
BEHANDLUNG
101
3.4.5.
FOTOGRAPHISCHE
DOKUMENTATION
DER
BEHANDELTEN SUP-ZELLEN
102
4.
DISKUSSION
103
5.
ZUSAMMENFASSUNG
122
6.
LITERATURVERZEICHNIS
123
7.
DANKSAGUNG
144
8.
ANHANG
145
9.
LEBENSLAUF
149 |
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