Charakterisierung eines blutdruckregulierenden Genortes auf Chromosom X bei der Ratte:
Gespeichert in:
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| Format: | Abschlussarbeit Buch |
| Sprache: | German |
| Veröffentlicht: |
2003
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INHALTSVERZEICHNIS
1
EINLEITUNG
1
1.1
DER
BLUTDRUCK
ALS
EIN
KOMPLEXES
QUANTITATIVES
MERKMAL
1
12
STRATEGIEN
ZUR
ANALYSE
MOLEKULARGENETISCHER
FAKTOREN
4
1.2.1
TIEREXPERIMENTELLE
HYPERTONIEMODELLE
AM
BEISPIEL
DER
RATTE
6
1.2.2
EXPERIMENTELLE
KREUZUNGEN
VON
INGEZUECHTETEN
RATTENSTAEMMEN
8
1.2.3
GENOMISCHE
RESSOURCEN
FUER
KOSEGREGATIONS-UND
KOPPLUNGSANALYSEN
10
13
ZURUECKLIEGENDE
STUDIEN
ZUR
GENETIK
DER
HYPERTONIE
BEI
DER
RATTE
12
1.3.1
INTERVALLKARTIERUNGEN
IN
RATTENMODELLEN
DER
SALZSENSITIVEN
HYPERTONIE
12
1.3.2
INTERVALLKARTIERUNG
IM
SABRA
RATTENMODELL
14
1.3.3
DAS
POLYGENETISCHE
HYPERTONIEMODELL
DER
SHRSP
15
1.3.4
UNTERSUCHUNGEN
VON
KANDIDATENGENEN
DES
RAAS
15
1.3.5
DAS
MONOGENETISCHE
HYPERTONIEMODELL
TGR(MREN2)27
17
1.3.6
DAS
RENIN
BINDENDE
PROTEIN
(RENBP)
UND
HYPERTONIE
18
1A
ZIELSETZUNGEN
DER
VORLIEGENDEN
ARBEIT
19
1.4.1
INTERVALLKARTIERUNG
AUF
CHROMOSOM
X
BEI
DER
SABRA
RATTE
19
1.4.2
KANDIDATENGENANALYSE
VON
RENBP
20
2
MATERIAL
UND METHODEN
22
2.1
TIEREXPERIMENTELLER
TEIL
22
2.1.1
TIERE
FUER
DIE
KOSEGREGATIONSANALYSE
22
2.1.1.1
KREUZUNGSSTRATEGIE
/
23
2.1.1.2
PHAENOTYPISIERUNG
24
2.1.1.3
ENTNAHME
VON
ORGANEN
25
2.1.2
TIERE
FUER
DIE
UNTERSUCHUNG
DER
KANDIDATENGENE
25
2.1.2.1
DIAET
26
2.1.2.2
BLUTDRUCKMESSUNGEN
26
2.1.2.3
ENTNAHME
VON
ORGANEN
26
22
ANALYTISCHE
METHODEN
27
2.2.1
ISOLIERUNG
GENOMISCHER
DNA
27
2.2.2
POLYMERASEKETTENREAKTION
27
2.2.2.1
KONVENTIONELLE
PCR
28
2.2.2.2
LONG-RANGE-PCR
(PCR
VON
GROSSEN
AMPLIFIKATEN)
28
2.2.2.3
AUFREINIGUNG
VON
PCR-PRODUKTEN
29
2.2.3
GELELEKTROPHORESE
29
2.2.3.1
AGAROSEGEL
30
II
2.2.4
INTERVALLKARTIERUNG
/
KOSEGREGATIONSANALYSE
30
2.2.4.1
PRAEPARATION
VON
DNA-VORRATS
UND
ARBEITSPLATTEN
31
2.2.4.2
RADIOAKTIVE
MARKIERUNG
VON
OLIGONUKLEOTIDEN
31
2.2.4.3
PCR
BEI
DER
INTERVALLKARTIERUNG
31
2.2.4.4
POLYACRYLAMIDGEL
(PAA)-ELEKTROPHORESE
32
2.2.5
KLONIERUNG
/
SUBKLONIERUNG
VON
DNA
IN
PLASMID-VEKTOREN
33
2.2.5.1
LIGATION
34
2.2.5.2
TRANSFORMATION
34
2.2.5.3
HERSTELLUNG
DER
KIRIMRMEDIEN
34
2.2.5.4
ANZUCHT
UND
SELEKTION
VON
BAKTERIELLEN
KLONEN
35
2.2.5.5
MINIPRAEPARATION
VON
PLASMID-DNA
36
2.2.5.6
KONSERVIERUNG
VON
BAKTERIERIKLONEN
36
2.2.6
RESTRIKTIONSSPAKUNGEN
VONDNA
37
2.2.7
DNA-SEQUENZIERUNG
38
YY2.2.7.1
CYCLE-SEQUENCMG
38
2.2.7.2
SYNTHESE
DER
SEQUENZIERPROBEN
VON
RENBP
39
2,2.8
CHROMOSOMALE
"
LOKALISATION
VON
RENBP
40
2.2.8.1
RATTEN/HAMSTER
RH-ANALYSE
40
2.2.8.2
FISH
42
2.2.8.3
SOMATIC-CELL-HYBND-ANALYSE
42
2.2.9
ISOLIERUNG
VON GESAMT-RNA
43
2.2.10
ANALYSE
DER
GENEXPRESSION
44
2.2.10.1
REVERSE
TRANSKRIPTION-PCR
(RT-PCR)
44
2.2.10.2
SUBKLONIERUNG
DER
SONDENMATRIZEN
45
2.2.10.3
LINEARISIERUNG
UND
AUFREINIGUNG
DER
PLASMIDE
46
2.2.10.4
VITRO
TRANSKRIPTION
47
2.2.10.5
SEPARATION
DER
RNA-SONDEN
IM
PAA-GEL
47
2.2.11
RPA
49
2.2.11.1
KOPRAEZIPITATION
UND
HYBRIDISIERUNG
50
2.2.11.2
RN
ASE-VERDAUREAKTION
30
22.11.3
SEPARATION
UND
DETEKTION
DER
PROTEKTIONIERTEN
FRAGMENTE
51
2.2.12
STATISTISCHE
ANALYSE
UND
KOPPLUNGSANALYSE
52
3
ERGEBNISSE
54
3.1
INTERVALLKART
IEROAG
/
KOSEGREGATHTNSANALYSE
54
3.1.1
PHAENOTYPISIERUNG
DER
F
R
-UND
F
2
-KOHORTEN
VON
SN/Y
TMDSBH/Y
54
3.1.2
ANALYSE
DER
MIKROSATELLITENMARKER
60
3.1.3
KOSEGREGATIONSANALYSE
UND
QTL-KARTIERUNG
61
3.1.4
KOPPLUNGSKARTE
FUER
RATTENCHROMOSOM
X
MIT
DEM
BLUTDRUCK-QTL
SS-X
63
34
RENBP-KANDIDATENGENANALYSE
65
3.2.1
SEQUENZIERUNGEN
65
3.2.1.1
SEQUENZIERUNG
DER
5
'
-REGION
UND
DER
CDNA
VON
RENBP
65
3.2.1.2
SEQUENZIERUNG
DER
INTRONS
8
UND
9
VON
RENBP
66
III
3.2.2
CHROMOSOMALE
KARTIERUNG
VON
RENBP
67
3.2.2.1
RH-ANALYSE
67
3.2.2.2
SOMATIC-CELL-HYBRID-ANALYSE
67
3.2.23
FISH
68
3.2.3
PHAENOTYPISCHE
CHARAKTERISIERUNG
DER
WKY
HD
UND
SHRSP
HD
69
3.2.4
RENBP-GENEXPRESSION
IN
TIEREXPERIMENTELLEN
MODELLEN
DER
HYPERTONIE
70
3.2.4.1
ENTWICKLUNG
DER
RNA-SONDEN
FUER
DAS
RPA
71
3.2.4.2
GENEXPRESSION
VON
REN
UND
RENBP
IN
VERSCHIEDENEN
GEWEBEN
DER
RATTE
72
3.2.43
GENEXPRESSION
VON
REN
UND
RENBP
UNTER
EXPERIMENTELLEN
BEDINGUNGEN
73
4
DISKUSSION
81
4.1
FEINKARTIERUNG
EINES
BLUTDRUCK-QTL
AUF
RATTENCHROMOSOM
X
81
4.1.1
PHAENOTYPISIERUNG
81
4.1.2
MIKROSATELLITENMARKER
UND
KOPPLUNGSKARTE
VOM
RATTEN-X-CHROMOSOM
83
4.1.3
KOSEGREGATION
DER
PHAENOTYPEN
MIT
DEN
GENOTYPEN
IN
DEN
FI-KOHORTEN
84
4.1.4
PARALLELEN
ZU
FRUEHEREN
STUDIEN
86
4.1.5
AUSBLICK
90
4.2
RENBP-KANDIDATENGENANALYSE
92
4.2.1
SEQUENZIERUNGEN
VON
RENBP
92
4.2.2
X-CHROMOSOMALE
FEINKARTIERUNG
VON
RENBP
94
4.2.3
PHAENOTYPISIERUNG
DER
WKY
HD
UND
SHRSP
HD
95
4.2.4
GENEXPRESSION
VON
RENBP
UND
REN
95
5
ZUSAMMENFASSUNG
99
6
LITERATURVERZEICHNIS
102
ANHANG
I
MATERIAL
I
TABELLE
SSLP
DER
INTERVALLKARTIERUNG
IX
TABELLE
RELATIVE
ALLEIGROESSEN
DER
SSLP
XIII
GENSEQUENZEN
XV
LEBENSLAUF
PUBLIKATIONEN |
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