Die Rolle der Thrombozyten- und Leukozyten-Endothelzell-Interaktion in der Atherogenese: eine In-vivo-Studie an der ApoE-Knock-out-Maus
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2003
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INHALTSVERZEICHNIS
INHALTSVERZEICHNIS
1 EINLEITUNG 1
2 SCHRIFTTUM 2
2.1 ALLGEMEINES ZUR ATHEROSKLEROSE.2
2.2 MORPHOLOGIE UND PHYSIOLOGIE DER THROMBOZYTEN (BLUTPLAETTCHEN).7
2.2.1 STRUKTUR DER THROMBOZYTEN.7
2.2.2 SEKRETORISCHE FUNKTION DER THROMBOZYTEN.9
2.2.3 PHYSIOLOGIE DER THROMBOZYTENAKTIVIERUNG.10
2.2.4 THROMBOZYTENMEMBRANREZEPTOREN.12
2.2.4.1 INTEGRINE.13
2.2.4.2 LEUCINREICHE GLYKOPROTEINE.14
2.2.4.3 SELEKTINE.14
2.2.4.4 REZEPTOREN VOM IMMUNGLOBULINTYP.15
2.3 INTERAKTION ZWISCHEN THROMBOZYTEN UND ENDOTHELZELLEN.15
2.4 THROMBOZYTEN UND IHRE FUNKTION IM ENTZUENDUNGSGESCHEHEN.17
2.5 HEMMUNG DER THROMBOZYTEN-ADHAESION.17
2.6 MAUSMODELLE ZUR ATHEROSKLEROSE.19
2.7 METHODEN ZUR CHARAKTERISIERUNG DER ATHEROSKLEROSE MIT DER
DUPLEX-SONOGRAPHIE. 20
2.8 MODELL ZUR QUANTIFIZIERUNG DER ATHEROSKLEROSE.21
2.8.1 CHARAKTERISIERUNG DER ZELL-ZELL-INTERAKTION MIT HILFE DER
INTRAVITALMIKROSKOPIE 21
2.8.2 IMMUNHISTOLOGIE/VCAM-1 -EXPRESSION.22
3 EIGENE UNTERSUCHUNGEN 23
3.1 ZIELE DER ARBEIT.23
3.1.1 MORPHOLOGISCHE CHARAKTERISIERUNG DER ATHEROSKLEROSE IN IHREM
VERLAUF.23
3.1.2 CHARAKTERISIERUNG DER FUER DIE THROMBOZYTENADHAESION AN DIE
GEFAESSWAND
VERANTWORTLICHEN REZEPTOREN.23
3.1.3 BEDEUTUNG DER THROMBOZYTENADHAESION FUER DIE ATHEROPROGRESSION.24
3.2 KINETIK DER ZELL-ZELL-INTERAKTION IM VERLAUF DER ATHEROGENESE.24
3.2.1 ALLGEMEINES ZUM VERSUCHSAUFBAU.24
3.2.2 VERSUCHSTIERE.24
3.2.2.1 DAS KNOCK-OUT-MODELL.24
3.2.2.2 HALTUNG.25
3.2.2.3 A
NZAHL UND EINTEILUNG DER VERSUCHSGRUPPEN.25
3.2.2.3.1 MORPHOLOGISCHE CHARAKTERISIERUNG DER ATHEROSKLEROSE IN IHREM
VERLAUF25
BIBLIOGRAFISCHE INFORMATIONEN
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INHALTSVERZEICHNIS
32
.
2
.
3.2 CHARAKTERISIERUNG DER FUER DIE THROMBOZYTENADHAESION AN DIE GEFAESSWAND
VERANTWORTLICHEN REZEPTOREN.27
3.2.2.33 BEDEUTUNG DER THROMBOZYTENADHAESION FUER DIE ATHEROPROGRESSION.27
3.2.3 ALLGEMEINES VORGEHEN.28
3.2.4 NARKOSE.28
3.2.5 DUPLEX-SONOGRAPHIE.29
3.2.6 INTRAVITALMIKROSKOPIE.29
3.2.7 PRINZIPIEN DER FLUORESZENZMIKROSKOPIE.30
3.2.7.1 ALLGEMEINE VORAUSSETZUNGEN.30
3
.
2
.
1.2 AUFBAU DES ARBEITSPLATZES.33
3.2.8 FLUORESZENZFARBSTOFFE.34
3.2.9 THROMBOZYTENPRAEPARATION.36
3.2.10 BESTIMMUNG DER THROMBOZYTENZAHL.36
3.2.11 PRAEPARATION DES EMPFANGERTIERES.37
3.2.12 MIKROSKOPIERSCHEMA.40
3.2.13 DOKUMENTATION.41
3.2.13.1 PROTOKOLL FUER DIE AUSWERTUNG DER IVM.42
3.2.13.1.1 DATENBLATT FUER EINZELTIERAUSWERTUNG.42
3.2.13.1.2 DATENBLATT FUER ZUSAMMENFASSUNG EINER OP-GRAPPE.43
3.2.14 OP-PROTOKOLL.43
3.2.15 AUSWERTUNG DER VIDEOAUFZEICHNUNGEN. 44
3.2.16 HISTOLOGIE.45
3.2.16.1 PATHOLOGISCH-ANATOMISCHE UNTERSUCHUNG (SUDAN III-FAERBUNG).45
3.2.16.2 HAEMATOXYLIN-EOSIN-FAERBUNG (H & E).46
3.2.17 IMMUNHISTOLOGIE AUF YYVASCULAR CELLULAR ADHESION MOLECULE-1 "
(VCAM-1).46
3.3 MOLEKULARE MECHANISMEN DER THROMBOZYTENADHAESION.47
3.3.1 GLYKOPROTEIN IBA. 47
3.3.2 GLYKOPROTEIN ILB-IIIA.47
3.3.3 HEMMUNG DER THROMBOZYTENADHAESION IN DER INTRAVITALMIKROSKOPIE.48
3.4 BEDEUTUNG DER THROMBOZYTENADHAESION FUER DIE ATHEROGENESE.48
3.4.1 CHRONISCHE BLOCKADE DES GPIBA.48
3.4.2 HISTOMORPHOMETRIE.49
3.5 STATISTISCHE BERECHNUNGEN UND DOKUMENTATION.50
3.6 ERGEBNISSE.52
INHALTSVERZEICHNIS
3.6.1 MORPHOLOGISCHE CHARAKTERISIERUNG DER ATHEROSKLEROSE IN IHREM
VERLAUF UNTER
VERWENDUNG DER HISTOLOGIE.52
3.6.1.1 HAEMATOXYLIN-EOSIN FAERBUNG.52
3.6.1.2 NACHWEIS DER FETTEINLAGERUNG IN ATHEROSKLEROTISCHE GEFAESSE.53
3.6.1.3 NACHWEIS DER ENTZUENDUNGSREAKTION.54
3.6.1.4 CHARAKTERISIERUNG DER GEFAESSFUNKTION MITTELS
DOPPLER-SONOGRAPHIE.55
3.6.1.5 CHARAKTERISIERUNG DER ZELLADHAESION AN DIE GEFAESSWAND IN VIVO.57
3.6.1.5.1 THROMBOZYTENADHAESION.57
3.6.1.5.2 LEUKOZYTENADHAESION.60
3.6.2 CHARAKTERISIERUNG DER FUER DIE THROMBOZYTENADHAESION AN DIE
GEFAESSWAND
VERANTWORTLICHEN REZEPTOREN.63
3.6.2.1 DIE BLOCKADE DES GPIBA MITTELS ANTI-GPIBA.64
3.6.2.1.1 INTRAVITALMIKROSKOPIE.64
3.6.2.1.2 TRANSIENT-ADHAERENTE THROMBOZYTEN BEI ADHAESIONSHEMMUNG.64
3.6.2.1.3 PERMANENTE THROMBOZYTENADHAESION BEI ADHAESIONSHEMMUNG.66
3.6.3 BEDEUTUNG DER THROMBOZYTENADHAESION FUER DIE ATHEROPROGRESSION.68
3.6.3.1 ALLGEMEINES ZUM VERSUCHSAUFBAU.68
3.6.3.2 CHARAKTERISIERUNG DER GEFAESSFUNKTION MIT DER
DUPLEX-SONOGRAPHIE.68
3.6.3.3 MORPHOLOGISCHE CHARAKTERISIERUNG DER ATHEROPROGRESSION NACH
CHRONISCHER
BLOCKADE DES GPIBA.69
3.6.3.4 HISTOMORPHOMETRIE.71
3.7 VERWENDETE REAGENZIEN.72
3.7.1 TYRODE-PUFFER.72
3.7.2 PARAFORMALDEHYD 4%.72
4 DISKUSSION 73
4.1 EINLEITUNG UND ZIELSETZUNG.73
4.2 DISKUSSION DER ANGEWANDTEN METHODEN.74
4.2.1 DAS MAUSMODELL.74
4.2.2 DUPLEX-SONOGRAPHIE.74
4.2.3 CHARAKTERISIERUNG DER ZELL-ZELL-INTERAKTION MITTELS
INTRAVITALMIKROSKOPIE.75
4.2.4 MORPHOLOGISCHE CHARAKTERISIERUNG UND QUANTIFIZIERUNG DER
ATHEROSKLEROSE.76
4.3 ERGEBNISSE.77
4.3.1 DIE ATHEROSKLEROSE IN IHREM VERLAUF.77
4.3.2 MOLEKULARE MECHANISMEN DER ADHAESION.78
INHALTSVERZEICHNIS
4.3.3 BEDEUTUNG DER THROMBOZYTENADHAESION FUER DIE ATHEROPROGRESSION.79
4.4 AUSBLICK.80
5 ZUSAMMENFASSUNG 81
6 S UMMARY 82
7 LITERATURVERZEICHNIS 83
8 TABELLENVERZEICHNIS 99
9 ABBILDUNGSVERZEICHNIS 100
10 ABKUERZUNGSVERZEICHNIS 102
11 DANKSAGUNG 104
12 LEBENSLAUF 106 |
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