Selenoprotein P in der kolorektalen Karzinogenese:
Gespeichert in:
| 1. Verfasser: | |
|---|---|
| Format: | Buch |
| Sprache: | German |
| Veröffentlicht: |
2002
|
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| Online-Zugang: | Inhaltsverzeichnis |
| Beschreibung: | Würzburg, Univ., Diss., 2003 |
| Beschreibung: | IV, 85 S. Ill., graph. Darst. |
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INHALTSVERZEICHNIS
I
INHALTSVERZEICHNIS
1
EINLEITUNG.
-
.
1
1.1
KOLOREKTALE
KARZINOGENESE
.
1
1.1.1
TUMORSUPPRESSOR-PATHWAY
.
2
1.1.2
MUTATOR-PATHWAY
.
3
1.2
ROS
UND
KARZINOGENESE
.
6
1.3
SELEN
UND
SELENOPROTEINE
.
8
1.3.1
SELEN
.
8
1.3.2
SELENOPROTEINE
.
9
1.3.2.1
SELEN-EINBAU
IN
PROTEINE
.
10
1.3.2.2
GLUTATHION-PEROXIDASEN
.
11
1.3.2.3
THIOREDOXIN-REDUKTASEN
.
12
1.3.2.4
DEJODASEN
.
13
1.4
SELENOPROTEIN
P
.
14
1.4.1
PROTEIN
.
14
1.4.2
GENETISCHE
STRUKTUR
DES
SEPP
.
15
1.4.3
REGULATION
DES
SEPP
.
16
1.4.4
FUNKTION
DES
SEPP
.
17
1.5
SELEN
UND
KOLONKARZINOGENESE
.
19
1.6
SELENOPROTEINE
UND
KOLONKARZINOGENESE
.
20
1.7
FRAGESTELLUNG
.
22
2
MATERIAL
UND
METHODEN
.
_
.
_
.
_
.
23
2.1
UNTERSUCHTE
MATERIALIEN
.
23
2.1.1
KOLONKARZINOMGEWEBE
UND
KORRESPOND.
GESUNDE
KOLONSCHLEIMHAUT
.
23
II
2.1.1.1
PROBEN
ZUR
DNA-ANALYTIK
.
23
2.1.1.2
PROBEN
ZUR
RNA-ANALYTIK
.
24
2.1.2
BLUTPROBEN
.
24
2.1.3
TUMORZELLLINIEN:
HUMANE
KOLON-KARZINOMZELLLINIEN
.
25
2.1.3.1
COLO
205
(ATCCCCL
222)
.
25
2.1.3.2
CACO
2
(ATCC:
HTB
37)
.
25
2.1.3.3
HCT
15
(ATCCCCL
225)
.
26
2.1.3.4
HCT
116
(ATCCCCL
247)
.
26
2.1.3.5
LOVO
(ATCC:
CCL
229)
.
26
2.2
ZELLKULTUR
.
27
2.3
VERWENDETE
MATERIALIEN,
CHEMIKALIEN
UND
GERAETE
.
28
2.3.1
ALLGEMEINES
.
28
2.3.2
LOESUNGEN
UND
PUFFER
.
29
2.3.3
GERAETE
.
30
2.4
DNA-EXTRAKTION
.
31
2.4.1
DNA-EXTRAKTION
AUS
GEWEBEPROBEN
.
31
2.4.1.1
MIKRODISSEKTION
UND
DNA-EXTRAKTION
AUS
PARAFFINGEWEBE
.
31
2.4.1.2
DNA-EXTRAKTION
AUS
KRYOGEWEBE
.
32
2.4.1.3
PROTOKOLLE
ZUR
AUFREINIGUNG
DER
DNA
.
33
2.4.1.3.1
ENTPARAFFINISIERUNG
UND
DNA-EXTRAKTION
DER
GEWEBEPROBEN
.
33
2.4.1.3.2
PHENOL-CHLOROFORM-AUFREINIGUNG
DER
DNA
NACH
EXTRAKTION
AUS
DEN
GEWEBEN
.
33
2.4.1.3.3
NATRIUM-ACETAT-ETHANOL-FAELLUNG
.
34
2.4.2
DNA-EXTRAKTION
AUS
BLUTZELLEN
.
34
2.4.3
DNA-EXTRAKTION
AUS
ZELLKULTUREN
.
34
INHALTSVERZEICHNIS
III
2.5
RNA-EXTRAKTION
.
35
2.6
KONZENTRATIONSBESTIMMUNG
VON
DNA
UND
RNA
.
36
2.7
POLYMERASE-KETTEN-REAKTION
(POLYMERASE
CHAIN
REACTION
/
PCR)
.
36
2.7.1
ALLGEMEINES
ZUR
PCR
.
36
2.7.2
KONTROLLE
DER
PCR
MITTELS
AGAROSE-GELELEKTROPHORESE
.
37
2.7.3
PCR-PRODUKT-AUFREINIGUNG
.
38
2.7.4
ETABLIERUNG
DER
PRIMER
UND
PCR-BEDINGUNGEN
ZUR
AMPLIFIKATION
DER
EXONS
.
38
2.7.5
SEQUENZIERUNG
.
41
2.7.5.1
SEQUENZ-PCR
.
41
2.7.5.2
AUFREINIGUNG
DES
SEQUENZ-PCR-PRODUKTES
.
42
2.7.5.3
AUTOMATISCHE
SEQUENZIERUNG
.
42
2.7.5.4
AUSWERTUNG
DER
SEQUENZIERUNG
.
42
2.8
PCR-RESTRIKTIONSFRAGMENT-LAENGEN-POLYMOIPHISMUS-ANALYSE
.
43
2.9
MIKROSATELLITEN-ANALYSE
.
45
2.10
NORTHEM-BLOT
.
47
2.11
BLOT-HYBRIDISIERUNG
.
48
3
ERGEBNISSE.
49
3.1
CHARAKTERISIERUNG
DER
GEWEBEPROBEN
.
49
3.1.1
DATEN
DER
ZUR
RNA-ANALYSE
VERWENDETEN
PROBAT
.
49
3.1.2
DATEN
DER
ZUR
DN
A-ANALYSE
VERWENDETEN
PROBEN
.
50
3.2
RNA-ANALYTIK
MITTELS
NORTHEM-BLOT
.
53
3.2.1
SEPP-MRNA-EXPRESSION
IN
DEN
UNTERSUCHTEN
FUENF
KOLONKARZINOM
ZELLLINIEN
.
53
3.2.2
SEPP-MRNA-EXPRESSION
IN
DEN
UNTERSUCHTEN
TUMORGEWEBEPROBEN
.
53
3.3
ERGEBNISSE
DER
SEQUENZIERUNG
DER
SEPP-EXONS
.
55
IV
3.3.1
SEQUENZANALYSEN
AN
KOLONKARZINOMGEWEBEN
.
55
3.3.2
SEQUENZANALYSEN
AN
KOLONKARZINOM-ZELLLINIEN
.
55
3.3.3
IN
KOLONKARZINOMEN
TRETEN
KEINE
MUTATIONEN
DES
SEPP-GENES
AUF
.
55
3.3.4
SEQUENZABWEICHUNG
IN
EXON
2
DES
SEPP
.
56
3.3.5
IDENTIFIKATION
DES
POLYMORPHISMUS
ALA215THR
IN
EXON
5
DES
SEPP
.
57
3.3.5.1
CHARAKTERISIERUNG
DES
POLYMORPHISMUS
ALA215THR
.
57
3.3.5.2
HAEUFIGKEIT
DES
ALA215THR
POLYMORPHISMUS
DER
UNTERSUCHTEN
GEWEBEPROBEN
.
58
3.3.5.3
AUFTRETEN
DES
POLYMORPHISMUS
ALA215THR
IN
DEN
UNTERSUCHTEN
ZELLLINIEN
.
59
3.3.5.4
HAEUFIGKEIT
DES
POLYMORPHISMUS
ALA215THR
IN
BLUTPROBEN
VON
GESUNDEN
PROBANDEN
UND
KOLONKARZINOMPATIENTEN
.
59
3.4
LOH-ANALYSEN
DES
SEPP-LOCUS
MITTELS
MIKROSATELLITENMARKER
D5S634
UND
D5S660
.
60
4
DISKUSSION.
-
.
_
.
61
5
ZUSAMMENFASSUNG
**YY*YYYY*YYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYY*YYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYY*YY****YY*****YY****
YYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYY
YY
YYYYYYYYYYYY
69
6
LITERATUR
.
_
.
----------
.
71 |
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