Die Rolle von bakteriellen DNA-Sequenzen (CpG) bei der Immuntherapie von retroviralen Infektionen:
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| Format: | Buch |
| Sprache: | German |
| Veröffentlicht: |
2003
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| Beschreibung: | Zsfassung in engl. Sprache. - Würzburg, Univ., Diss., 2003 |
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INHALTSVERZEICHNIS
INHALTSVERZEICHNIS
1. EINLEITUNG
1
1.1 DIE ENTDECKUNG VON RETROVIREN 1
1.2 WELTWEITE VERBREITUNG VON HIV 2
1.3 TIERMODELLE FUER RETROVIREN 2
1.4 VIROLOGISCHE GRUNDLAGEN 3
1.4.1 STRUKTUR VON RETROVIREN 3
1.4.2 KLASSIFIZIERUNG MURINER LEUKAEMIE VIREN 6
1.4.3 AUFBAU UND BESONDERHEITEN DER MURINEN LEUKAEMIE VIREN 7
1.5 REPLIKATIONSZYKLUS VON F-MULV 8
1.6 PATHOGENESE DES FRIEND VIRUS KOMPLEX 9
1.7 DIE IMMUNANTWORT GEGEN EIN PATHOGEN 10
1.8 IMMUNITAET GEGEN EINE FV-LNFEKTION 11
1.9 KRANKHEITSVERLAEUFE VERSCHIEDENER MAUSSTAEMME NACH FV-LNFEKTION 14
1.10 IMMUNSTIMULATIVE DNA MIT CPG-MOTIV 18
1.10.1 ENTDECKUNG DER IMMUNSTIMULATIVEN AKTIVITAET VON DNA MIT 18
CPG-MOTIV
1.10.2 AUFBAU EINER IMMUNSTIMULATIVEN DNA MIT CPG-MOTIV 19
1.10.3 AKTIVIERUNG VON VERTEBRATEN ZELLEN DURCH CPG-ODN 19
1.10.4 WIRKUNG VON CPG-ODN IN DER MAUS 20
1.10.5 DIE DNA VON VERTEBRATEN IST NICHT IMMUNSTIMULATIV 22
1.10.6 INTERAKTION VON CPG-ODN MIT DEM TOLL-LIKE REZEPTOR-9 23
1.10.7 KLINISCHE ANWENDUNGSGEBIETE VON CPG-ODN 24
1.11 TRANSKUTANE IMMUNISIERUNG MIT CPG-ODN ALS ADJUVANTS 26
1.12 ZIELSETZUNG DER ARBEIT 27
2
MATERIAL
29
2.1 CHEMIKALIEN UND MEDIEN 29
2.2 ANTIBIOTIKA 29
2.3 HAEUFIG VERWENDETE PUFFER UND MEDIEN 29
2.4 ANTIKOERPER 32
2.5 TETRAMERE 34
2.6 ZYTOKINE 34
2.7 F-MULV SPEZIFISCHE PEPTIDE (T-ZELL-EPITOPE) 34
BIBLIOGRAFISCHE INFORMATIONEN
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INHALTSVERZEICHNIS
2.8 CPG-ODN SEQUENZEN 34
2.9 VIREN UND ZELL-LINIEN 35
2.10 KOMMERZIELLE STANDARDTESTS 35
2.11 MAEUSE 35
3
METHODEN
36
3.1 VERSUCHSTIERE 36
3.1.1 INFEKTION 36
3.1.2 INJEKTIONEN 36
3.1.2.1 INJEKTIONEN VON CPG-DNA 36
3.1.2.2 DEPLETION VON CD8
+BZW. NK1.1+-ZELLEN IN MAEUSEN 36
3.1.3 BETAEUBUNG DER MAEUSE MIT KETAMINE/XYLASINE 37
3.1.4 BETAEUBUNG DER MAEUSE MIT ETHER 37
3.1.5 TRANSKUTANE IMMUNISIERUNG VON MAEUSEN 38
3.1.6 PALPIEREN VON MILZGROESSEN 38
3.1.7 BLUTENTNAHME 38
3.1.8 ORGANENTNAHME 39
3.1.9 ADOPTIVER TRANSFER VON MILZZELLEN 39
3.2 HERSTELLUNG EINES FRIEND VIRUS-STOCKS 39
3.3 ZELLZAHLBESTIMMUNG 40
3.4 ZELLKULTUR 40
3.4.1 KULTIVIERUNG VON ZELLEN 40
3.4.2 HERSTELLUNG DES MONOKLONALEN ACD8 ANTIKOERPERS 40
3.4.3 EINFRIEREN UND AUFTAUEN VON ZELLEN 41
3.5 HERSTELLUNG EINER MILZZELLSUSPENSION UND LYSE VON KERNLOSEN ZELLEN41
3.6 NACHWEIS VON INFEKTIOESEN ZELLEN IN DER MILZ ("INFECTIOUS CENTER 41
ASSAY")
3.7 BESTIMMUNG FV-NEUTRALISIERENDER ANTIKOERPER 43
3.8 BESTIMMUNG VON FV-BINDENDEN ANTIKOERPERN (ELISA) 44
3.9 DURCHFLUSSZYTOMETRIE 44
3.9.1 BESTIMMUNG DER PROZENTZAHL VON FV-INFIZIERTEN ZELLEN IM BLUT 45
3.9.2 BESTIMMUNG VON FV-INFIZIERTEN ZELLPOPULATIONEN IN DER MILZ 46
3.10 ARBEITEN MIT RNA 46
3.10.1 ISOLATION VON GESAMT-RNA 46
3.10.2 ELEKTROPHORESE VON RNA IM AGAROSEGEL 46
INHALTSVERZEICHNIS
3.10.3 "RNA-PROTECTION-ASSAY" 47
3.10.4 AUFTRENNUNG VON RNA-RNA-HYBRIDEN IN POLYACRYLAMIDGELEN 47
3.11 IFNY-ELISA 48
3.12 PERCOLL-GRADIENT ZUR ISOLATION VON LYMPHOZYTEN 48
3.13 ELISPOT-ASSAY 48
3.14 TETRAMERFAERBUNG 4G
4 ERGEBNISSE
51
4.1 IMMUNSTIMULATIVER EFFEKT VON CPG-ODN AUF DAS IMMUNSYSTEM VON 51
UNIFIZIERTEN MAEUSEN
4.2 PROPHYLAKTISCHE GABE VON CPG-ODN VOR EINER FV-LNFEKTION 54
4.3 THERAPIE DER AKUTEN FV-LNFEKTION MIT IMMUNSTIMULATIVEN CPG-ODN 61
4.4 CPG-ODN ALS THERAPIE EINER FV-INDUZIERTEN LEUKAEMIE 75
4.5 VERWENDUNG VON IMMUNSTIMULATIVEN CPG-ODN ALS ADJUVANTS 78
BEI EINER TRANSKUTANEN IMMUNISIERUNG
5
DISKUSSION
84
5.1 ANWENDUNG VON IMMUNSTIMULATIVEN CPG-ODN ZUR PARAIMMUN- 85
ISIERUNG BZW. IMMUNTHERAPIE EINER RETROVIRUSINFEKTION
5.2 VERWENDUNG VON CPG-ODN ALS ADJUVANTS BEI DER TRANSKUTANEN 90
IMMUNISIERUNG
6
LITERATURVERZEICHNIS
92
7 ANHANG 101
7.1 ZUSAMMENFASSUNG 101
7.2 SUMMARY 102
7.3 ABKUERZUNGSVERZEICHNIS 104
7.4 ABBILDUNGSVERZEICHNIS 106
7.5 TABELLENVERZEICHNIS 107
7.6 ERKLAERUNGEN 109
7.7 LEBENSLAUF 110
7.8 PUBIIKATIONSLISTE 111 |
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