Funktion und Aktivierungsmechanismus eines schnell aktivierbaren intravaskulären Tissue-Factor-Systems:
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2003
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INHALTSVERZEICHNIS
.
1
VERWENDETE
ABKUERZUNGEN
UND
EINHEITEN
4
1.
EINLEITUNG
5
1.1
TISSUE
FACTOR
DAS
ZENTRALE
STARTERPROTEIN
DER
GERINNUNG
5
1.2
STRUKTUR
UND
LOKALISIERUNG
VON
TISSUE
FACTOR
8
1.3
DAS
TISSUE
FACTOR
GEN
.
9
1.4
REGULATION
DER
BLUTGERINNUNG
11
1.5
TISSUE
FACTOR
PATHWAY
INHIBITOR
(TFPI)
11
1.6
STRUKTUR
UND
LOKALISIERUNG
VON
TFPI
12
1.7
PROTEOLYTISCHE
SPALTUNG
VON
TFPI
.
13
1.8
ZIELSETZUNG
15
2.
MATERIAL
UND
METHODEN
16
2.1
MATERIAL
.
16
2.1.1
CHEMIKALIEN
UND
LOESUNGSMITTEL
.
16
2.1.2
FERTIGLOESUNGEN
16
2.1.3
GERAETE
UND
MATERIALIEN
.
16
2.1.4
ANTIKOERPER,
INHIBITOREN,
PROTEASEN
UND
GERINNUNGSFAKTOREN
17
2.1.5
MARKER,
STANDARDS,
STIMULANTIEN
UND
SUBSTRATE
.
18
2.1.6
ANTIKOAGULANTIEN
UND
PUFFER
.
18
2.2
METHODEN
22
2.2.1
ZELLISOLIERUNGEN
.
22
2.2.1.1
BLUTABNAHME
22
2.2.1.2
MONOZYTENISOLIERUNG
.
23
2.2.1.3
PRAEPARATION
DER
NEUTROPHILEN
GRANULOZYTEN
.
24
2.2.1.4
ISOLIERUNG
DER
PLAETTCHEN
.
24
2.2.1.5
MIKROVESIKELISOLATION
.
25
2.2.1.6
HERSTELLUNG
UND
ISOLIERUNG
VON
MIKROVESIKELN
IN
VITRO.
.
.25
2.2.1.7
BESTIMMUNG
DER
ZELLZAHL
UND
ZELLVIABILITAET
.
.26
2.2.2
FLOWCYTOMETRIE
.
26
2.2.2.1
VOLLBLUT
.
27
2.2.2.2
ISOLIERTE
PLAETTCHEN
.
27
INHALTSVERZEICHNIS
2
2.2.2.3
ISOLIERTE
MIKROVESIKEL
.
28
2.2.2.4
MIKROVESIKEL
IM
VOLLBLUT
28
2.2.3
CELLSORTER
.
A
.
28
2.2.4
PROTEINCHEMISCHE
METHODEN
29
2.2.4.1
ZELLAUFARBEITUNG
FUER
DIE
SDS
PAGE
29
2.2.4.2
PROTEINBESTIMMUNGEN
29
2.2.4.3
SDS-POLYACRYLAMID
ELEKTROPHORESE
(SDS-PAGE)
30
2.2.4.4
WESTERN
BLOT
.
30
2.2.4.5.
NATIVES
GEL
.
31
2.2.5
LASERSCAN
MIKROSKOPIE
32
2.2.6
FAKTOR
XA
BILDUNG
32
2.2.7
THROMBELASTOGRAPHIE
33
2.2.8
ELEKTRONENMIKROSKOPIE
35
2.2.9
CHEMILUMINESZENZ
MESSUNG
36
2.2.10
DOUBLE
SANDWICH
ELISA
.
36
2.2.11
STATISTIK
37
3.
ERGEBNISSE
38
3.1
SCHNELLE
PRAESENTATION
VON
TISSUE
FACTOR
IN
PLAETTCHEN-LEUKOZYTEN
KONJUGATEN
.
38
3.2
PLAETTCHENABHAENGIGKEIT
DER
PRAESENTATION
VON
TISSUE
FACTOR
AUF
LEUKOZYTEN
.
.39
3.3
LOKALISIERUNG
DES
INTRAVASKULAEREN
TISSUE
FACTORS
40
3.4
TISSUE
FACTOR
ISOLIERTER
PLAETTCHEN
IST
FUNKTIONELL
INAKTIV
43
3.5
LEUKOZYTEN-ASSOZIIERTER
TISSUE
FACTOR
LOEST
IM
VOLLBLUT
FIBRINBILDUNG
AUS
44
3.6
LEUKOZYTEN-PLAETTCHEN-KONJUGATE
AKTIVIEREN
DEN
THROMBOZYTAEREN
TISSUE
FACTOR
47
3.7
INHIBITOREN
LEUKOZYTAERER
PROTEASEN
VERMINDERN
DIE
FAKTOR
XA
BILDUNG
50
3.8
TFPI
WIRD
VON
LEUKOZYTAEREN
PROTEASEN
GESPALTEN
.
51
3.9
REAKTIVE
SAUERSTOFFSPEZIES
FOERDERN
DIE
TISSUE
FACTOR
PRAESENTATION
VON
PLAETTCHEN
.
53
3.10
MIKROVESIKEL
SIND
KONSTITUTIV
IM
BLUT
VORHANDEN
.
54
3.11
MIKROVESIKEL
ADHAERIEREN
NACH
STIMULATION
AN
LEUKOZYTEN
UND
PLAETTCHEN
.
56
INHALTSVERZEICHNIS
3
3.12
ZIRKULIERENDE
MIKROVESIKEL
ENTHALTEN
TISSUE
FACTOR,
.
57
3.13
MIKROVESIKEL
FOERDERN
DIE
FIBRINBILDUNG
.
59
4.
DISKUSSION
.
60
4.1
INTRAVASKULAERER
TISSUE
FACTOR,
.
60
4.2
PLAETTCHEN-LEUKOZYTEN-INTERAKTIONEN
.
61
4.3
LOKALISIERUNG
DES
INTRAVASKULAEREN
TISSUE
FACTORS
IN
THROMBOZYTEN
.
63
4.4
LOKALISIERUNG
VON
TISSUE
FACTOR
AUF
MIKROVESIKELN
.
64
4.5
AKTIVIERUNG
DES
INTRAVASKULAEREN
TISSUE
FACTORS
.
66
4.6
LEUKOZYTAERE
PROTEASEN
INAKTIVIEREN
TFPI
.
67
4.7
MECHANISMUS
DER
AKTIVIERUNG
DES
INTRAVASKULAEREN
TISSUE
FACTORS
.
69
4.8
IN
VIVO
RELEVANZ
DES
INTRAVASKULAEREN
TISSUE
FACTORS
.
70
4.9
AUSBLICK
72
5.
ZUSAMMENFASSUNG
.
74
6.
LITERATURVERZEICHNIS
.
76 |
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