Charakterisierung von ZmAUX2 als Auxin-induzierter, potentieller Transkriptionsfaktor aus Zea mays und seine Beteiligung beim Streckungswachstum:
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Regensburg
2002
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INHALTSVERZEICHNIS
I
INHALTSVERZEICHNIS
1. ZUSAMMENFASSUNG. 1
2. EINLEITUNG. 3
2.1 DIE SAEUREWACHSTUMSHYPOTHESE.3
2.2 EXP ANSINE. 4
2.3 AUXIN-BINDENDE PROTEINE. 5
2.4 AUXINTRANSPORT. 7
2.5 AUXIN-SIGNALWEGE. 9
2.6 SCHNELL AUXIN-INDUZIERTE GENE.10
2.6.1 DIE Y4C5-GENFAMILIE.10
2.6.2 DIE GST-GENFAMILIE.10
2.6.3 DIE G//3-GENFAMILIE.11
2.6.4 DIE ^IO/Z/L4-GENFAMILIE.12
2.6.5 DIE AE4C//?-GENFAMILIE.~.15
3. ERGEBNISSE.19
3.1 SPEZIFISCHE INDUKTION VON ZMAUX2 DURCH AUXIN.19
3.1.1 EINFLUSS VON BRASSINOLID. 19
3.1.2 ETHYLEN UND METHYLJASMONSAEURE INDUZIEREN
ZMAUXL
NICHT. 20
3.2 KORRELATION DER
ZMA
GA2-TRANSKRIPTMENGE MIT DER KOLEOPTIL- BZW.
MESOKOTYLELONGATION IM LICHT BZW. IM DUNKELN.21
3.2.1 ABHAENGIGKEIT DER ELONGATION VON DEN LICHTVERHAELTNISSEN. 21
3.2.2
ZMAUXL
WIRD IM MESOKOTYL TRANSKRIBIERT. 22
3.3 HALBWERTSZEIT DES ZMAUX2-GENPRODUKTES.23
3.4 GUS-REPORTERGENSTUDIEN IN TABAK UND
ARABIDOPSIS
.24
3.4.1 ORGANSPEZIFITAET. 26
3.4.2 GEWEBSSPEZIFITAET. 27
3.4.3 EINFLUSS VON AUXIN AUF DIE REPORTERGENEXPRESSION. 27
3.4.4 OEFFNUG DES HYPOKOTYLHAKENS. 27
3.4.5 GEOTROPE UND PHOTOTROPE KRUEMMUNGSREAKTIONEN. 28
3.5 TRANSPOSON-MUTAGENESE VON
ZMAUX1
IN MAIS.29
3.5.1 KEIMUNGS-UND UEBERLEBENSRATE. 31
3.5.2 REDUZIERTES KOLEOPTILENWACHSTUM DER MUTANTEN. 32
3.5.3 REDUZIERTES SPROSSWACHSTUM DER MUTANTEN. 33
3.5.4 VERMINDERTE ENDGROESSE DER MUTANTEN. 34
3.5.5 VERLAENGERTE VEGETATIVE PHASE DER MUTANTEN. 35
3.5.6 VERERBBARKEIT DES MUTANTENPHAENOTYPS. 36
3.5.7 EPIDERMISZELLEN DER MUTANTEN. 37
3.5.8 GEOTROPISCHE REAKTION DER TUSC-PFLANZEN. 38
3.5.9 WACHSTUM WAEHREND DES KRUEMMUNGSTESTS ZUR GEOTROPIE. 41
3.6 UEBEREXPRESSION DES
ZMA
/A2-GENS IN MAIS. 42
3.6.1 KEIM-UND UEBERLEBENSRATEN. 44
3.6.2 KOLEOPTIL- UND MESOKOTYLWACHSTUM. 44
BIBLIOGRAFISCHE INFORMATIONEN
HTTP://D-NB.INFO/967681316
INHALTSVERZEICHNIS
II
3.6.3 SPROSSWACHSTUM. 47
3.6.4 GRAVITROPE REAKTION. 49
3.7 PROMOTORSTUDIEN DES ZMAUX2 IN MAIS MITTELS REPORTERGENFUSION.49
3.7.1 KOLEOPTILWACHSTUM. 50
3.7.2 MESOKOTYLWACHSTUM. 51
3.7.3 SPROSSWACHSTUM. 52
3.8 ZMA UEA2-EXPRESSION DURCH EINEN TETRACYCLIN-INDUZIERBARER PROMOTOR.52
3.9 KERNLOKALISTATION DES ZMAOO-GENPRODUKTES.56
3.9.1 TRANSIENTE TRANSFORMATION VON TABAK-PROTOPLASTEN. 57
3.9.2 MIKROBESCHUSS VON ZWIEBELEPIDERMISZELLEN. 58
3.10 YYMOBILITY SHIFT ASSAY" MIT EINER PUTATIVEN ZIELSEQUENZ.60
3.11 CALMODULINBINDUNG VON ZMAUX2-PROTEIN.60
4. DISKUSSION.63
5.1 SPEZIFITAET DER PHYTOHORMON-INDUKTION DES
ZMA UX2.63
5.2
IN VIVO
NACHWEIS DES GENPRODUKTES.65
5.3 HALBWERTSZEIT.65
5.4 EXPRESSIONSMUSTER DES ZMAUX2.65
5.5 PROMOTOR-GUS-KONSTRUKTE IM HOMOLOGEN SYSTEM UND YYTRANSGENE
SILENCING".70
5.6 UEBEREXPRESSION DES ZMAUX2-GENS.71
5.7 CALMODULINBINDUNG.74
5.8 KEMLOKALISATION.75
5.9 EIN PUTATIVES ZIELGEN.76
5. MATERIAL UND METHODEN.77
5.1 MATERIAL.77
5.1.1 VERWENDETE ORGANISMEN, VEKTOREN UND OLIGONUKLEOTIDE. 77
5.1.2 CHEMIKALIEN UND ENZYME. 78
5.1.3 HAEUFIG VERWENDETE LOESUNGEN UND PUFFER. $0
5.1.4 MEDIEN. 80
5.1.5 COMPUTERPROGRAMME. 83
5.2 METHODEN.83
5.2.1 PHYSIOLOGISCHE METHODEN. 83
5.2.1.1 ANZUCHT UND PRAEPARATION VON MAISKOLEOPTILEN. 83
5.2.1.2 INKUBATION DER KOLEOPTILSEGMENTE MIT HORMONEN. 83
5.2.1.3 BIOTEST FUER DIE AUXINWIRKUNG. 84
5.2.1.4
VERSUCHE ZU TROPISCHEN KRUEMMUNGSREAKTIONEN. 84
5.2.1.5 MESSUNG DER SPROSSHOEHE. 84
5.2.1.6 GUS-AKTIVITAETSTEST.84
5.2.1.7 TETRACYCLININDUKTION. 84
5.2.2 MOLEKULARBIOLOGISCHE METHODEN. 85
5.2.2.1
RNA-ISOLIERUNG. 85
5.2.2.2 PLASMIDISOLIERUNG AUS BAKTERIEN.85
5.2.2.3 KONZENTRATIONSBESTIMMUNG VON NUKLEINSAEUREN.85
5.2.2.4 NORTHERNBLOT-ANALYSE.86
5.2.2.5 AMPLIFIKATION VON DNA MIT HILFE DER POLYMERASE-KETTENREAKTION
(PCR) . 86
INHALTSVERZEICHNIS
_ III
5.22.6
ENZYMATISCHE BEHANDLUNG VON DNA.
86
5.22.1
DNA-ANALYSE.
87
5.2.3 BIOCHEMISCHE METHODEN. 87
5.2.3.1
YYPULSE-CHASE "-EXPERIMENTE.
87
5.2.3.2
YYMOBILITY SHIFT ASSAY" MIT DEM ZMK\-PROMOTOR.
88
5.2.3.3
CALMODULINBINDUNGSSTUDIEN.
88
5.2.4 HERSTELLUNG REKOMBINANTER ORGANISMEN. 89
5.2.4.1
TRANSFORMATION VON ESCHERICHIA COLI.
89
5.2.4.2
TRANSFORMATION VON AGROBACTERIUM TUMEFACIENS.
89
5.2.4.3
TRANSFORMATION VON ARABIDOPSIS THALIANA.
89
5.2.4.4
TRANSFORMATION VON NICOTIANA TABACUM.
90
5.2.4.5
TRANSFORMATION VON ZEA MAYS.
91
5.2.4.6
TUSC-PROGRAMM DER FIRMA PIONEER-HI-BRED.
91
5.2.4.7
TRANSIENTE TRANSFORMATION VON TABAK-PROTOPLASTEN.
92
5.2.4.8
MIKROBOMBARDIERUNG VON ZWIEBELEPIDERMISZELLEN.
93
6. LITERATURVERZEICHNIS.94
7. ANHANG.105
7.1
ABKUERZUNGEN.105
7.2
SEQUENZ DES GENOMISCHEN KLONS VON ZMA UX2.106 |
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spelling | Knauss, Stefan Verfasser aut Charakterisierung von ZmAUX2 als Auxin-induzierter, potentieller Transkriptionsfaktor aus Zea mays und seine Beteiligung beim Streckungswachstum vorgelegt von Stefan Knauss Regensburg 2002 III, 106 S. Ill., graph. Darst. txt rdacontent n rdamedia nc rdacarrier Dissertation Universität Regensburg 2002 Streckungswachstum (DE-588)4201467-0 gnd rswk-swf Mais (DE-588)4037135-9 gnd rswk-swf Geotropismus (DE-588)4203438-3 gnd rswk-swf Pflanzenwachstum (DE-588)4045595-6 gnd rswk-swf Auxine (DE-588)4143728-7 gnd rswk-swf Transkriptionsfaktor (DE-588)4303350-7 gnd rswk-swf Genexpression (DE-588)4020136-3 gnd rswk-swf (DE-588)4113937-9 Hochschulschrift gnd-content Mais (DE-588)4037135-9 s Pflanzenwachstum (DE-588)4045595-6 s Geotropismus (DE-588)4203438-3 s Auxine (DE-588)4143728-7 s Transkriptionsfaktor (DE-588)4303350-7 s Genexpression (DE-588)4020136-3 s DE-604 Streckungswachstum (DE-588)4201467-0 s Erscheint auch als Online-Ausgabe urn:nbn:de:bvb:355-opus-2024 https://nbn-resolving.org/urn:nbn:de:bvb:355-opus-2024 Resolving-System kostenfrei Volltext https://epub.uni-regensburg.de/10086/ Verlag kostenfrei Volltext DNB Datenaustausch application/pdf http://bvbr.bib-bvb.de:8991/F?func=service&doc_library=BVB01&local_base=BVB01&doc_number=010315795&sequence=000001&line_number=0001&func_code=DB_RECORDS&service_type=MEDIA Inhaltsverzeichnis |
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