Untersuchung des Verunreinigungsprofils von Aminosäuren aus fermentativer Herstellung mittels Kapillarelektrophorese:
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2002
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INHALTSVERZEICHNIS
1. AMINOSAEUREN 1
1.1. STRUKTUR UND PHYSIKALISCH-CHEMISCHE EIGENSCHAFTEN 1
1.2. HERSTELLUNG UND GEWINNUNG VON AMINOSAEUREN 9
1.2.1. SYNTHETISCHE VERFAHREN 9
1.2.1.1. MALONESTER-SYNTHESE 9
1.2.1.2. STRECKER-SYNTHESE 10
1.2.1.3. ERLENMEYER-SYNTHESE 11
1.2.1.4. RACEMATSPALTUNG 11
1.2.2. ENZYMATISCHE METHODEN 12
1.2.3. HYDROLYTISCHE VERFAHREN 12
1.2.4. FERMENTATION _ 13
1.2.4.1. GLUTAMINSAEURE 14
1.2.4.2. LYSIN 16
1.2.4.3. THREONIN 16
1.2.4.4. ISOLEUCIN 17
1.2.4.5. PHENYLALANIN, TYROSIN, TRYPTOPHAN 17
2. AMINOSAEUREANALYTIK-BESTANDSAUFNAHME UND PROBLEMSTELLUNG 18
2.1. DUENNSCHICHTCHROMATOGRAPHIE 20
2.1.1. STATIONAERE PHASE 20
2.1.2. FLIESSMITTEL 21
2.1.3. DETEKTION 21
2.2. HOCHLEISTUNGSFLUESSIGCHROMATOGRAPHIE 23
2.2.1. ISOKRATISCHE TRENNUNG UND GRADIENTENELUTION 24
2.2.2. IONEN-, REVERSED PHASE- UND CHIRALE
HOCHDRUCKFLUESSIGCHROMATOGRAPHIE 25
2.2.3. DERIVATISIERUNG 27
2.3. KAPILLARELEKTROPHORESE 28
2.3.1. DETEKTION 23
2.3.1.1. UV-DETEKTION 33
2.3.1.2. ELEKTROCHEMISCHE DETEKTION 35
2.3.1.3. LASERINDUZIERTE FLUORESZENZDETEKTION (LIF-DETEKTION) 3 5
2.3.1.4. REAGENZIEN ZUR DERIVATISIERUNG DER KOHLENHYDRATE 44
BIBLIOGRAFISCHE INFORMATIONEN
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3. AMINOSAEURE-DERIVATE MIT FLUORESCEINISOTHIOCYANAT UND
4-FLUORO-7-NITRO-2,1,3-
BENZOXADIAZOL 47
4. AMINOSAEURE-DERIVATE MIT 9-FLUORENYLMETHYLCHLOROFORMAT 48
4.1. OPTIMIERUNG DER DERIVATISIERUNGSREAKTION 48
4.2. OPTIMIERUNG DES TRENNPUFFERS 51
4.3. OPTIMIERUNG DER INJEKTIONSBEDINGUNGEN 55
4.4. VALIDIERUNG DER METHODE 58
5. DERIVATISIERUNGMIT3-(4-CARBOXYBENZOYL)CHINOLIN-2-CARBOXALDEHYD 65
5.1. OPTIMIERUNG DER DERIVATISIERUNGSREAKTION 65
5.2. KAPILLARELEKTROPHORESE 72
5.3. VALIDIERUNG DER METHODE 80
6. NUCLEINSAEUREN 86
6.1. UV-SPEKTROSKOPIE 86
6.2. KAPILLARELEKTROPHORESE 97
7. GLUTATHION 110
8. ZUSAMMENFASSUNG 118
8. SUMMARY 127
9. EXPERIMENTELLER TEIL 135
9.1. ALLGEMEINE ANGABEN 135
9.2. MICELLARE ELEKTROKINETISCHE CHROMATOGRAPHIE VON AMINOSAEUREN ALS
9-FLUORENYLMETHYLCHLOROFORMAT-DERIVATE 13 5
9.3. MICELLARE ELEKTROKINETISCHE CHROMATOGRAPHIE VON AMINOSAEUREN ALS
3-(4-CARBOXYBENZOYL)CHINOLIN-2-CARBOXALDEHYD -DERIVATE 136
9.4. UV-SPEKTROSKOPIE 137
9.5. KAPILLARGELELEKTROPHORETISCHE UNTERSUCHUNGEN 138
9.6. GLUTATHION 139
10. ABKUERZUNGEN UND SYMBOLE
141
11. LITERATURVERZEICHNIS
144 |
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