Untersuchungen zur b-Galactosidase-katalysierten Verknüpfung von D-Galactose mit N-Acetyl-D-Glucosamin, N-Acetyl-D-Galactosamin und Hydroxy-L-Aminosäurederivaten:
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INHALTSVERZEICHNIS
1
EINLEITUNG
UND
PROBLEMSTELLUNG
7
2
ALLGEMEINER
TEIL
10
2.1
GLYCOSIDASEN:
VORKOMMEN,
WIRKUNGSSPEKTRUM
UND
REAKTIONSMECHANISMEN
10
2.2
ENZYMKATALYSIERTE
SYNTHESEN
VON
SS-GALACTOSIDEN
IN
WAESSRIGEN
MEDIEN
15
2.3
GLYCOSIDASE-KATALYSIERTE
REAKTIONEN
IN
WAESSRIG-ORGANISCHEN
UND
ORGANISCHEN
MEDIEN
18
3
ERGEBNISSE UND
DISKUSSION
20
3.1
KATALYTISCHE
EIGENSCHAFTEN
VON
SS-GALACTOSIDASEN
20
3.1.1
AKTIVITAET
IN
WAESSRIG-ORGANISCHEN
MEDIEN
20
3.1.2
STABILITAET
IN
WAESSRIG-ORGANISCHEN
MEDIEN
25
3.2
SYNTHESE
VON
N-ACETYLLACTOSAMIN
UND
D-GALSS(L- 4)-D-GALNAC
30
3.2.1
SYNTHESE
VON
N-ACETYLLACTOSAMIN
IM
WAESSRIGEN
MEDIUM
30
3.2.1.1
BIOLOGISCHE
HERKUNFT
DER
SS-GALACTOSIDASE
30
3.2.1.2
EINFLUSS
DER
REAKTANDENKONZENTRATION
32
3.2.1.3
EINFLUSS
DER
ART
DES
DONORS
UND
DES
AKZEPTOR/DONOR-VERHAELTNISSES
34
3.2.2
EINFLUESSE
WAESSRIG-ORGANISCHER
MEDIEN
AUF
DIE
SYNTHESE
VON
N-ACETYLLACTOSAMIN
40
3.2.2.1
ONPG
ALS
DONOR
40
3.2.2.2
LACTOSE
ALS
DONOR
43
3.2.2.3
SYNTHESE
BEI HOHEN
ANTEILEN
ORGANISCHER
LOESUNGSMITTEL
IM
MEDIUM
48
3.2.2.4
SELEKTIVITAET
UND
REGIOSELEKTIVITAET
49
3.2.2.5
EINFLUSS
DER
WASSERAKTIVITAET
IN
WAESSRIG-ORGANISCHEN
UND
HOCHKONZENTRIERTEN
WAESSRIGEN
MEDIEN
53
3.2.3
SYNTHESE
VON
D-GALSS(L
-
4)-D-GALNAC
58
3.2.3.1
GALACTOSYLIERUNG
VON
N-ACETYL-D-GALACTOSAMIN
IM
WAESSRIGEN
MEDIUM
58
3.2.3.2
SYNTHESE
IN
WAESSRIG-ORGANISCHEN
MEDIEN
60
3.2.4
STRUKTURUNTERSUCHUNG
MITTELS
HPLC-MS-KOPPLUNG
61
3.3
SYNTHESE
O-SS-GALACTOSYLIERTER
DERIVATE VON
L-SERIN
UND
L-THREONIN
63
3.3.1
SYNTHESE
IM
WAESSRIGEN
MEDIUM
63
3.3.1.1
OPTIMIERUNG
DER
GALACTOSYLIERUNG
VON
Z-SER-OME
UND
Z-THR-OME
63
3.3.1.2
CHEMISCHE
SYNTHESE
NEUARTIGER
AKZEPTORDERIVATE
68
3.3.1.3
EINFLUSS
DER
N-SCHUTZGRUPPE
70
3.3.1.4
EINFLUSS
DER
C-SCHUTZGRUPPE
71
3.3.2
EINFLUESSE
WAESSRIG-ORGANISCHER
MEDIEN
72
3.3.2.1
SYNTHESE
VON
Z-(GALSSL)SER-OME
72
3.3.2.2
SYNTHESE
VON
PHAC-(GALSSL)SER-OME
76
3.3.3
STRUKTURUNTERSUCHUNG
MITTELS
HPLC-MS-KOPPLUNG
76
4
ZUSAMMENFASSUNG
79
5
EXPERIMENTELLER
TEIL
83
5.1
GERAETE
UND
CHEMIKALIEN
83
5.2
ANALYTISCHE
METHODEN
85
5.3
AKTIVITAETS
UND
STABILITAETSUNTERSUCHUNGEN
AN
SS-GALACTOSIDASEN
88
5.4
ENZYMATISCHE
SYNTHESE
VON
LACNAC
UND
GALSS(L- 4)-GALNAC
91
5.5
DARSTELLUNG
N
UND
C-GESCHUETZTER
L-SERINDERIVATE
97
5.6
ENZYMATISCHE
SYNTHESE
O-SS-GALACTOSYLIERTER
DERIVATE
VON
HYDROXY
L-AMINOSAEUREN
101
6
LITERATURVERZEICHNIS
105
6 |
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