Hochauflösende Strukturanalyse pflanzlicher Chromosomen in Mitose und Meiose:
Gespeichert in:
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| Format: | Buch |
| Sprache: | German |
| Veröffentlicht: |
2002
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| Online-Zugang: | Inhaltsverzeichnis |
| Beschreibung: | München, Univ., Fak. für Biologie, Diss., 2002 |
| Beschreibung: | 248 S. zahlr. Ill., graph. Darst. |
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I
NHALTSVERZEICHNIS
1
INHALTSVERZEICHNIS
.
1
ABKUERZUNGSVERZEICHNIS
.
4
1.
EINLEITUNG
.
7
2.
MATERIAL
UND
METHODEN
.
30
2.1.
MATERIAL
.
30
2.1.1.
CHEMIKALIEN
.
30
2.1.2.
ENZYME
.
30
2.1.3.
ANTIKOERPER
.
30
2.1.4.
SYNTHETISCHE
OLIGONUKLEOTIDE
.
30
2.1.5.
BAKTERIENSTAEMME
.
31
2.1.6.
DNA-SONDEN
.
31
2.1.7.
PFLANZENMATERIAL
.
32
2.1.8.
ALLGEMEINE
PUFFER
UND
LOESUNGEN
.
32
2.2.
ALLGEMEINE
MOLEKULARGENETISCHE
METHODEN
.
33
2.2.1.
ANZUCHT
VON
STAMMKULTUREN
.
33
2.2.2.
PRAEPARATION
VON
PLASMID-DNA
AUS
BAKTERIEN
E.COLI
(B
IRNBOIM
UND
D
OLBY
,
1979)
.
33
2.2.3.
ISOLIERUNG
PFLANZLICHER
GESAMTGENOMISCHER
DNA
NACH
FUELTON
ET
AL.
(1995)
34
2.2.4.
RNASE-VERDAUUNG
.
34
2.2.5.
PHENOLISIERUNG
.
35
2.2.6.
GELELEKTROPHORESE
.
35
2.2.7.
PHOTOMETRIE
.
35
2.3.
PRAEPARATION
MITOTISCHER
CHROMOSOMEN
.
35
2.3.1.
DESINFEKTION
DER
SAMENOBERFLAECHE
.
35
2.3.2.
VORBEHANDLUNG
NICHT-SYNCHRONISIERTER
CHROMOSOMEN
.
36
2.3.3.
ANREICHERUNG
UND
SYNCHRONISATION
.
36
2.3.4.
CHROMOSOMENPRAEPARATIONSTECHNIKEN
.
37
2.3.5.
REINIGUNG
DER
OBJEKTTRAEGER
.
37
2.3.6.
QUETSCHPRAEPARATION
(ZYTOGENETISCHE
STANDARDTECHNIK)
.
37
2.3.7.
CHROMOSOMENTROPFPRAEPARATION
NACH
ENZYMATISCHER
VORBEHANDLUNG
.
37
2.4.
PRAEPARATION
MEIOTISCHER
CHROMOSOMEN
.
38
2.4.1.
TROPFPRAEPARATION
MEIOTISCHER
CHROMOSOMEN
.
39
2.4.2.
PRAEPARATION
MIT
ISOLIERUNGSPUFFER
(IDE)
(MODIFIZIERT
NACH
B
UE
RKHOLDER
UND
M
UKHERJEE
,
1970)
.
39
2.5.
KLASSISCHE
ZYTOGENETISCHE
METHODEN
.
40
2.5.1.
C-BANDEN-FAERBUNG
.
40
2.6.
MOLEKULARE
ZYTOGENETISCHE
METHODEN
.
41
2.6.1.
FLUORESZENZ-IN
SITM-HYBRIDISIERUNG
(FISH)
.
41
2.6.1.1.
AMPLIFIKATION
VON
DNA
UEBER
DIE
POLYMERASEKETTENREAKTION
(PCR)
41
2.6.1.2.
MARKIERUNG
VON
DNA-SONDEN
UEBER
PCR
.
42
2.6.I.3.
MARKIERUNG
VON
DNA-SONDEN
MITTELS
YYNICK
"
-TRANSLATION
.
42
I
NHALTSVERZEICHNIS
2
2.6.1.4.
AUFREINIGUNG
DER
DNA-SONDEN
IM
YYSPIN
COLUMN
"
-VERFAHREN
.
43
2.6.1.5.
SEMIQUANTITATIVER
EINBAUTEST
MITTELS
NBT/BCIP
.
43
2.6.1.6.
VORBEHANDLUNG
DER
CHROMOSOMENPRAEPARATE
.
44
2.6.1.7.
VORBEREITUNG
DER
DNA-SONDE
.
45
2.6.I.8.
HYBRIDISIERUNG
.
45
2.6.I.9.
STRINGENZBEDINGUNG
.
45
2.6.1.10
SIGNALNACHWEIS
.
46
2.6.1.11.
KONTRASTIERUNG
.
47
2.6.2.
CHROMOSOMEN-IN
SITN-SUPRESSIONSHYBRIDISIERUNG
(CISS)
.
47
2.6.2.I.
COTL-DNA
FRAKTION
.
47
2.6.3.
SIGNALAUSWERTUNG
UND
BILDDOKUMENTATION
.
49
2.6.4.
KARYOTYPANALYSE
.
49
2.7.
ULTRASTRUKTURANALYSEN
IM
RASTERELEKTRONENMIKROSKOP
(REM)
.
50
2.7.1.
TROPF-KRYO-TECHNIK
(S
ABATINI
ET
AL.,
1962)
.
51
2.7.2.
TANAKA-BRUCHVERFAHREN
(T
ANAKA
,
1980)
.
52
2.7.3.
PROTEINASE-BEHANDLUNG
.
52
2.7.4.
DNA-FAERBUNG
MIT
PLATINBLAU
(W
ANNER
UND
F
ORMANEK
,
1995)
.
52
2.7.4.1.
HERSTELLUNG
VON
PLATINBLAU
(H
OFMANN
UND
B
UGGE
,
1908)
.
53
2.7.5.
TROCKNUNG
DER
PRAEPARATE
.
53
2.7.5.I.
KRITISCHPUNKT-TROCKNUNGSVERFAHREN
.
54
2.7.5.2.
HMDS-TROCKNUNGSVERFAHREN
.
54
2.7.6.
MARKIEREN
VON
PRAEPARATESTELLEN
.
54
2.7.7.
MONTAGE
AUF
PROBENTELLER
.
54
2.7.8.
PLATINBESPUTTERUNG
.
55
2.7.9.
KOHLEBEDAMPFUNG
.
55
2.7.10.
BILDDARSTELLUNG
.
55
2.7.11.
BILDDOKUMENTATION
.
55
2.8.
ELEKTRONENMIKROSKOPISCHER
NACHWEIS
VON
IN
SIRU-HYBRISIERUNGEN
(EMISH)
.
56
2.8.1.
EMISH
MIT
6-FACHER
ANTIKOERPERKASKADE
(M
ARTIN
ET
AL.,
1985)
.
57
2.8.2.
KURZPROTOKOLL
MIT
AVIDIN-MONOLAYER
.
58
2.8.3.
ABSCHAETZUNG
DER
MARKIERUNGSDICHTE
DES
AVIDIN-GOLD-DETEKTIONSSYSTEM
.
59
2.9.
GERAETE
.
60
3.
ERGEBNISSE
.
61
3.1.
KARYOTYPANALYSEN
PFLANZLICHER
CHROMOSOMEN
MIT
HILFE
DER
FLUORESZENZ-IN
SITU-HYBRIDISIERUNG
(FISH)
.
61
3.1.1.
VERTEILUNGSMUSTER
REPETITIVER
SEQUENZEN
AUS
BAC
'
S
DER
GERSTE
.
61
3.1.2.
TRANSLOKATIONSNACHWEIS
IN
HEXAPLOIDEN
TRITICALEN
.
61
3.2.
VERGLEICHENDE
GENOMISCHE-IN
RFM-HYBRIDISIERUNG
(CGISHARA)
MIT
ARABIDOPSIS
THALIANA
IN
MONO
UND
DICOTYLEN
PFLANZEN
.
64
3.2.1.
HYBRIDISIERUNGSKINETIK
UND
KOMPETITIONSEXPERIMENTE
MIT
COTL-DNA
UND
RDNA-SEQUENZEN
.
64
3.2.2.
CGISHARA
IN
ROGGEN
UND
GERSTE
.
67
3.2.3.
VERGLEICHENDE
ANALYSE
VON
CGISHARA
MIT
C-BANDEN
.
72
I
NHALTSVERZEICHNIS
3
3.2.4.
FISH-ANALYSE
MIT
DER
REPETITIVEN
SEQUENZ
PAR
21
AUS
ARABIDOPSIS
.
72
3.3.
IN
SITU-NACHWEIS
DER
EINZELKOPIESEQUENZ
CTPA
.
72
3.4.
MITOSE-ZYKLUS
DES
ROGGENS
IM
LICHT
(LM)
UND
RASTERELEKTRONENMIKROSKOP
(REM)
74
3.4.1.
MITOSE-ZYKLUS
DES
ROGGENS
IM
LM
.
74
3.4.2.
MITOSE-ZYKLUS
DES
ROGGENS
BEI
GERINGER
VERGROESSERUNG
IM
REM
.
77
3.4.3.
HOCHAUFLOESENDE
ULTRASTUKTURANALYSE
MITOTISCHER
CHROMOSOMEN
DES
ROGGENS
(REM)
.
81
3.5.
HOCHAUFLOESENDE
STUKTURANALYSE
MITOTISCHER
CHROMOSOMEN
DER
GERSTE
IM
REM
.
85
3.6.
MEIOSE-ZYKLUS
DES
ROGGENS
IM
LICHT
(LM)
UND
RASTERELEKTRONENMIKROSKOP
(REM)
87
3.6.1.
TANAKA-BRUCHVERFAHREN
.
87
3.6.2.
MEIOSE-ZYKLUS
DES
ROGGENS
IM
LICHTMIKROSKOP
.
89
3.6.3.
MEIOSE-ZYKLUS
DES
ROGGENS
BEI
GERINGER
VERGROESSERUNG
IM
REM
.
93
3.6.4.
CHROMOSOMENMESSUNGEN
.
97
3.6.5.
HOCHAUFLOESENDE
ULTRASTRUKTURANALYSE
MEIOTISCHER
CHROMOSOMEN
DES
ROGGENS
IM
REM
.
98
3.6.6.
DNA-NACHWEIS
MEIOTISCHER
CHROMOSOMEN
DES
ROGGENS
MIT
PLATINBLAU
IM
REM
.
108
3.6.7.
PROTEINASE
K-BEHANDLUNG
MEIOTISCHER
CHROMOSOMEN
DES
ROGGENS
(REM)
120
3.6.8.
FISH-ANALYSE
DES
CENTROMERBEREICHES
IN
MITOSE
UND
MEIOSE
(LM)
.
131
3.7.
ULTRASTRUKTURANALYSE
MEIOTISCHER
CHROMOSOMEN
DER
LILIE
IM
REM
.
134
3.7.1.
CHROMOSOMENTROPFPRAEPARATION
NACH
YY3'-L
"
-FIXIERUNG
.
134
3.7.2.
CHROMOSOMENQUETSCHPRAEPARATION
NACH
GLUTARALDEHYDFIXIERUNG
.
136
3.7.3.
ULTRASTRUKTURANALYSE
(REM)
MEIOTISCHER
CHROMOSOMEN
DER
LILIE
MIT
NEU-ETABLIERTER
PRAEPARATIONSMETHODE
IN
ISOLIERUNGSPUFFER
(IDE)
.
142
3.8.
ULTRASTRUKTURANALYSE
MEIOTISCHER
CHROMOSOMEN
DER
ZUCKERRUEBE
IM
LM
UND
REM
.
151
3.8.1.
LICHTMIKROSKOPISCHE
DARSTELLUNG
.
151
3.8.2.
RASTERELEKTRONENMIKROSKOPISCHE
DARSTELLUNG
.
153
3.9.
IMMUNOGOLD-IN
SIM-HYBRIDISIERUNG
(EMISH)
BIOTINYLIERTER
DNA-SONDEN
IM
REM
156
3.9.1.
MARKIERUNGSEFFIZIENZ
MARKIERTER
DNA-SONDEN
.
156
3.9.2.
CHROMOSOMENFIXIERUNG
UND
HYBRIDISIERUNGSEFFIZIENZ
.
158
3.9.3.
EMISH
VON
CGISH^LRA
IM
ANTIKOERPERKASKADEN-SYSTEM
.
158
3.9.4.
EMISH
MIT
PAWRC
IM
ROGGEN
IM
AVIDIN-(GOLD)-YYMONOLAYER
"
-SYSTEM
.
.
162
4.
DISKUSSION
.
164
5.
ZUSAMMENFASSUNG
.
210
6.
LITERATURVERZEICHNIS
.
212
7.
PUBLIKATIONEN
.
246
8.
DANKSAGUNG
.
247
9.
LEBENSLAUF
.
248 |
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