Untersuchung der Signaltransduktion von Kollagen VI in mesenchymalen Zellen mit Hilfe von spezifischen Inhibitoren der Signaltransduktion:
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| Veröffentlicht: |
2002
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INHALTSVERZEICHNIS
1
EINLEITUNG
1
1.1
BAUSTEINE
DER
EXTRAZELLULAERMATRIX
.
1
1.1.1
KOLLAGENE
.
2
1.1.2
ELASTIN
.
3
1.1.3
GLYKOSAMINOGLYKANE
UND
PROTEOGLYKANE
.
4
1.1.4
NICHTKOLLAGENE
GLYKOPROTEINE
.
4
1.2
PROLIFERATIVE
SIGNALE
AUSGEHEND
VON
DER
EXTRAZELLULAERMATRIX
.
.
.
.
.
6
1.2.1
ZELLMEMBRANREZEPTOREN
DER
MITOGENEN
SIGNALTRANSDUKTION
.
.
6
1.2.2
ZYTOKINE
UND
IHRE
INTERAKTION
MIT
DER
EZM
.
13
1.2.3
MOLEKULARE
MECHANISMEN
VON
DER
MITOGENEN
SIGNALTRANSDUK
TION
BIS
ZUM
BEGINN
DER
DNS-SYNTHESE
.
14
1.3
KOLLAGEN
VI
UND
ZELLREGULATION
.
16
1.4
INHIBITOREN
DER
SIGNALTRANSDUKTION
.
18
1.4.1
HERBIMYCIN
A
.
19
1.4.2
GENISTEIN
.
19
1.4.3
OKADAIC
ACID
.
19
1.4.4
TYRPHOSTINE
.
20
1.4.5
CALPHOSTIN
C
.
20
1.4.6
WORTMANNIN
.
20
1.4.7
OLOMOUCINE
.
21
1.4.8
PERTUSSIS-TOXIN
.
21
1.5
FRAGESTELLUNG
.
22
2
MATERIAL
UND
METHODEN
23
2.1
MATERIAL
.
23
2.1.1
ZELLKULTUR
.
23
2.1.2
DNS-SYNTHESEMESSUNG
MIT
EINEM
BRDU-INKORPORATIONS-ELISA
24
2.1.3
DNS-SYNTHESEMESSUNG
MIT
3
H-THYMIDIN
.
24
2.1.4
INHIBITOREN
.
24
2.2
METHODEN
.
25
2.2.1
ZELLKULTUR
.
25
2.2.2
MESSUNG
DER
ZELLPROLIFERATION
DURCH
KOLLAGEN
UND
WACHSTUMS-
FAKTOREN
.
25
2-2.3
MESSUNG
DER
ZEITZAHL
MIT
HILFE
DER
HEXOSAMINIDASE-AKTIVITAET
.
27
2.2.4
DNS-SYNTHESEMESSUNG
MIT
5-BROMO-2-DESOXYURIDIN
.
28
2.2.5
DNS-SYNTHESEMESSUNG
MIT
3
H-THYMIDIN
.
29
2.2.6
KINETIK
DER
DNS-SYNTHESESTEIGERUNG
.
29
3
ERGEBNISSE
31
3.1
KINETIK
DER
DNS-SYNTHESESTEIGERUNG
NACH
STIMULATION
DURCH
KOLLA
GEN
VI
.
31
3.2
INHIBITION
DER
KOLLAGEN
VL-INDUZIERTEN
PROLIFERATION
MIT
DEN
TYROSIN
KINASENINHIBITOREN
HERBIMYCIN
A,
TYRPHOSTIN
A25,
TYRPHOSTIN
B42
UND
GENISTEIN
.
34
3.3
INHIBITION
DER
KOLLAGEN
VL-INDUZIERTEN
PROLIFERATION
MIT
DEM
PROTEIN
C-KINASEN-INHIBITOR
CALPHOSTIN
C
.
40
3.4
INHIBITION
DER
KOLLAGEN
VL-INDUZIERTEN
PROLIFERATION
MIT
DEM
MAP
UND
CDK-KINASEN-INHIBITOR
OLOMOUCINE
.
41
3.5
INHIBITION
DER
KOLLAGEN
VL-INDUZIERTEN
PROLIFERATION
MIT
DEM
SERIN
UND
THREONIN-PHOSPHATASEN-INHIBITOR
OKADAIC
ACID
.
42
3.6
INHIBITION
DER
KOLLAGEN
VL-INDUZIERTEN
PROLIFERATION
MIT
DEM
G
PROTEIN-INHIBITOR
PERTUSSISTOXIN
.
43
3.7
INHIBITION
DER
KOLLAGEN
VL-INDUZIERTEN
PROLIFERATION
MIT
DEM
PI
3
-
KINASE-INHIBITOR
WORTMANNIN
.
44
3.8
BEEINFLUSSUNG
DER
ENZYMATISCHEN
ZELLZAEHLUNG
MIT
HILFE
DER
HEXOSA-
MINIDASEAKTIVITAET
DURCH
PTK-INHIBITOREN
.
46
3.9
EINFLUSS
DER
VERWENDETEN
VARIABLEN
AUF
DEN
HINTERGRUND
DES
BRDU
INKORPORATIONS-ELISA
.
48
4
DISKUSSION
50
4.1
EINFLUFI
DER
METHODIK
AUF
DIE
MESSUNG
DER
DNS-SYNTHESE
.
50
4.1.1
ZEITPUNKT
DER
MESSUNG
.
50
4.1.2
BRDUE
VERSUS
3
H-THYMIDIN-INKORPORATION
.
51
4.1.3
ZELLART
.
52
4.1.4
ZELLDICHTE
.
52
4.1.5
SYNCHRONISIERUNG
DER
ZELLEN
MIT
FKS-MANGELMEDIUM
.
53
4.1.6
EINFLUB
DER
INHIBITOREN
AUF
DIE
DNS-SYNTHESE
UND
DEN
ZELLZYKLUS
53
4.2
EINSATZ
VON
INHIBITOREN
DER
INTRAZELLULAEREN
SIGNALTRANSDUKTION
NACH
STIMULATION
DURCH
KOLLAGEN
VI
.
54
4.2.1
TYROSINKINASENINHIBITOREN
.
54
4.2.2
INHIBITION
DER
PROTEINKINASE
C
.
57
4.2.3
INHIBITION
DER
ZELLZYKLUS-REGULIERENDEN
KINASEN
(MAPK
UND
CDK-KINASEN)
.
59
4.2.4
INHIBITION
DER
PHOSPHATIDYLINOSITOL-3-KINASE
.
60
4.2.5
INHIBITION
DER
SERIN/THREONINPHOSPHATASEN
1
UND
2A
.
61
4.2.6
INHIBITION
VON
G-PROTEINEN
.
63
4.3
MOEGLICHE
REZEPTOREN
FUER
DIE
AKTIVIERUNG
DER
DNS-SYNTHESE
DURCH
KOLLAGEN
VI
.
63
4.4
PATHOPHYSIOLOGISCHE
UND
THERAPEUTISCHE
BEDEUTUNG
DER
PROLIFERATION
DURCH
KOLLAGEN
VI
.
65
5
ZUSAMMENFASSUNG
67
6
LITERATURVERZEICHNIS
69
7
DANKSAGUNG
89
8
LEBENSLAUF
90 |
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