Elektrophysiologisch-pharmakologische Charakterisierung von spannungsabhängigen Calciumkanälen in einer humanen C-Zelllinie:
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| Format: | Buch |
| Sprache: | German |
| Veröffentlicht: |
2002
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INHALTSVERZEICHNIS
1
EINLEITUNG
1
1.1
REGULATION
DER
CALCIUMHOMOEOSTASE
AUF
ZELLULAERER
EBENE
1
1.2
UNTERSCHEIDUNG
VERSCHIEDENER
CALCIUMKANAELE
1
1.3
AUFBAU
UND
FUNKTION
SPANNUNGSABHAENGIGER
CALCIUMKANAELE
3
1.4
CHARAKTERISTIKA
DER
HUMANEN
C-ZELLLINIE
5
1.5
FRAGESTELLUNG
6
2
MATERIALIEN
UND
METHODEN
8
2.1
ZELLKULTUR
8
2.1.1
GEWINNUNG
VON
H-MTC
ZELLEN
8
2.1.2
SUBKULTIVIERUNG
DER
ZELLEN
8
2.2
VERWENDETE
LOESUNGEN
UND
CHEMIKALIEN
11
2.2.1
ZELLKULTUR-REAGENZIEN
11
2.2.2
PATCH
CLAMP-REAGENZIEN
12
2.3
ELEKTROPHYSIOLOGIE;
PRINZIP
DER
PATCH
C/AMP-TECHNIK
15
2.3.1
ENTWICKLUNG
UND
WEITERENTWICKLUNG
DER
PATCH
C/AMP-TECHNIK
15
2.3.2
MOEGLICHKEITEN
VERSCHIEDENER
MESSKONFIGURATIONEN
16
2.3.3
AUFBAU
DES
MESSPLATZES
UND
FUNKTIONSPRINZIPIEN
DER
EINZELNEN
KOMPONENTEN
17
2.4
PHARMAKOLOGIE:
EXPERIMENTELLER
EINSATZ
VON
CALCIUMKANALMODULATOREN
22
2.4.1
MIBEFRADIL
ALS
T-TYP-CALCIUMKANAL-ANTAGONIST
22
2.4.2
S(-)-BAY
K
8644
ALS
L-TYP-CALCIUMKANAL-AGONIST
23
2.5
VERSUCHSDURCHFILHRUNG
VON
PATCH
C/AMP-EXPERIMENTEN
IN
DER
EINZELKANAL
KONFIGURATION
25
2.5.1
HERSTELLUNG
DER
GLASMIKROELEKTRODEN
25
2.5.2
PRAKTISCHE
DURCHFUEHRUNG
VON
EINZELKANALMESSUNGEN
25
2.6
AUSWERTUNG
VON
EINZELKANALMESSUNGEN
28
2.6.1
ERSTELLUNG
VON
EREIGNISLISTEN
28
2.6.2
ANALYSE
DER
EREIGNISLISTEN
30
2.6.2.1
PARAMETER
DES
SEHR
SCHNELLEN
SCHALTVERHALTENS
30
2.OE.2.2
PARAMETER
DES
SCHNELLEN
SCHALTVERHALTENS
31
2.6.2.3
PARAMETER
DES
LANGSAMEN
SCHALTVERHALTENS
34
2.6.2.4
PARAMETER
ZUR
BESCHREIBUNG
DER
AKTIVIERUNGS-UND
34
INAKTIVIERUNGSKINETIK
2.7
MATHEMATISCHE
AUSWERTUNG
UND
STATISTISCHE
VERFAHREN
36
3
ERGEBNISSE
37
3.1
SPANNUNGSPROTOKOLLE
37
3.2
ELEKTROPHYSIOLOGISCHE
CHARAKTERISIERUNG
38
3.2.1
ELEKTROPHYSIOLOGISCHE
EIGENSCHAFTEN
DER
EINZELKANALSTROEME
VON
KANALTYP
I
38
3.2.1.1
ANALYSE
DER
ORIGINALSTROMSPUREN
_
38
3.2.1.1.1
EINZELKANALAMPLITUDE
40
3.2.1.1.2
DAUER
DER
KANALOEFFNUNGEN
40
3.2.1.1.3
AKTIVIERUNGSSCHWELLE
UND
SPANNUNGSABHAENGIGE
WECKBARKEIT
43
3.2.1.1.4
INAKTIVIERUNGSVERHALTEN
43
3.2.1.2
SPANNUNGSABHAENGIGKEIT
DER
AKTIVIERUNG
UND
DER
INAKTIVIERUNG
45
3.2.1.3
BESTIMMUNG
DER
EINZELKANALLEITFAEHIGKEIT
48
3.2.1.4
KINETIK
DES
SCHALTVERHALTENS
50
3.2.2
ELEKTROPHYSIOLOGISCHE
EIGENSCHAFTEN
DER
EINZELKANALSTROEME
VON
KANALTYP
II
51
3.2.2.1
ANALYSE
DER
ORIGINALSTROMSPUREN
51
3.2.2.1.1
EINZELKANALAMPLITUDE
51
3.2.2.1.2
DAUER
DER
KANALOEFFNUNGEN
53
3.2.2.1.3
AKTIVIERUNGSSCHWELLE
UND
SPANNUNGSABHAENGIGE
WECKBARKEIT
53
3.2.2.1.4
INAKTIVIERUNGSVERHALTEN
53
3.2.2.2
SPANNUNGSABHAENGIGKEIT
DER
AKTIVIERUNG
UND
DER
INAKTIVIERUNG
55
3.2.2.3
BESTIMMUNG
DER
EINZELKANALLEITFAEHIGKEIT
56
3.2.2.4
KINETIK
DES
SCHALTVERHALTENS
57
3.3
PHARMAKOLOGISCHE
CHARAKTERISIERUNG
58
3.3.1
PHARMAKOLOGISCHE
EIGENSCHAFTEN
VON
KANALTYP
I
58
3.3.1.1
MODULATION
DURCH
DEN
T-TYP-CALCIUMKANAL-ANTAGONISTEN
MIBEFRADIL
58
3.3.1.2
MODULATION
DURCH
DEN
L-TYP-CALCIUMKANAL-AGONISTEN
S(-)-BAY
K
8644
62
3.3.2
PHARMAKOLOGISCHE
EIGENSCHAFTEN
VON
KANALTYP
II
65
3.3.2.1
MODULATION
DURCH
DEN
T-TYP-CALCIUMKANAL-ANTAGONISTEN
MIBEFRADIL
65
3.3.2.2
MODULATION
DURCH
DEN
L-TYP-CALCIUMKANAL-AGONISTEN
S(-)-BAY
K
8644
68
3.4
KONTROLLEXPERIMENTE
71
3.5
PHARMAKOLOGISCH-ELEKTROPHYSIOLOGISCHE
GEGENUEBERSTELLUNG
DER
BEIDEN
CALCIUMKANAL-TYPEN
75
3.5.1
ELEKTROPHYSIOLOGISCHE
ABGRENZUNG
75
3.5.2
PHARMAKOLOGISCHE
ABGRENZUNG
82
4
DISKUSSION
84
4.1
ELEKTROPHYSIOLOGISCHE
ZUORDNUNG
DER
ZWEI
CALCIUMKANALTYPEN
84
4.1.1
BIOPHYSIKALISCHE
CHARAKTERISTIKA
84
4.1.2
SPANNUNGSABHAENGIGKEIT
DER
AKTIVIERUNG
UND
DER
INAKTIVIERUNG
85
4.1.3
UNTERSCHIEDE
IN
DER
LEITFAEHIGKEIT
89
4.1.4
CHARAKTERISIERUNG
DES
SCHALTVERHALTENS
91
4.2
PHARMAKOLOGISCHE
ZUORDNUNG
DER
ZWEI
CALCIUMKANALTYPEN
93
4.2.1
WIRKUNG
VON
S(-)-BAY
K
8644
AM
KANALTYP
II
93
4.2.2
WIRKUNG
VON
S(-)-BAY
K
8644
AM
KANALTYP
I
97
4.2.3
WIRKUNG
VON
MIBEFRADIL
AM
L-TYP-CALCIUMKANAL
99
4.2.4
WIRKUNG
VON
MIBEFRADIL
AM
T-TYP-CALCIUMKANAL
101
4.2.4.1
ANALYSE
DER
BLOCKADEMECHANISMUS
101
4.2.4.2
INTERAKTION
VON
MIBEFRADIL
AM
T-TYP-CALCIUMKANAL
107
4.2.4.3
EINZELKANALMECHANISMUS
DER
MIBEFRADIL
T-TYP-CALCIUMKANAL
BLOCKADE
UNTER
BERUECKSICHTIGUNG
MODULIERENDER
UNTEREINHEITEN
107
4.2.4.4
ZUGANGSWEG
VON
MIBEFRADIL
AM
T-TYP-CALCIUMKANAL
109
4.3
KANALEXPRESSIONSVERHALTEN
DER
HUMANEN
C-ZELLLINIE
HO
4.4
PHYSIOLOGISCHE
BEDEUTUNG
VON
L
UND
T-TYP
CALCIUMKANAELEN
IN
HUMANEN
C-ZELLEN
113
4.5
BEDEUTUNG
DER
FUNKTIONELLEN
UNTERSUCHUNG
VON
T-TYP-CALCIUMKANAELEN
115
5
ZUSAMMENFASSUNG
117
6
LITERATURVERZEICHNIS
119
7
LEBENSLAUF
143 |
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