Untersuchung subzellulärer Metabolitverteilungen in der Hefe Saccharomyces cerevisiae:
Gespeichert in:
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| Format: | Buch |
| Sprache: | German |
| Veröffentlicht: |
2002
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| Online-Zugang: | Inhaltsverzeichnis |
| Beschreibung: | Köln, Univ., Diss., 2002 (Nicht für den Austausch) |
| Beschreibung: | 135 S. Ill., graph. Darst. : 30 cm |
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Datensatz im Suchindex
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-INHALTSVERZEICHNIS
INHALTSVERZEICHNIS
1 EINLEITUNG_1
1.1
BEDEUTUNG VON SACCHAROMYCES CEREVISIAE_1
1.2 ZELLKOMPARTIMENTIERUNG_1
1.3 DIE VAKUOLE IN SACCHAROMYCES CEREVISIAE_2
1.4 ZENTRALER STICKSTOFF- UND AMINOSAEUREMETABOLISMUS IN SACCHAROMYCES
CEREVISIAE (CNM)_4
1.5 STICKSTOFF-KATABOLITREPRESSION (NCR)_7
1.6 METABOLITSENSOREN_9
1.7 STRESSMETABOLISMUS_10
1.7.1 STICKSTOFFHUNGER_11
1.7.2 HITZESCHOCK
_11
1.7.3 OSMOTISCHER STRESS_12
1.8 ZIELSETZUNG DER ARBEIT_ 13
2 MATERIAL UND METHODEN _14
2.
1 HEFESTAEMME, NAEHRMEDIEN UND CHEMIKALIEN_14
2.1.1 NAEHRMEDIEH UND KULTIVIERUNGSBEDINGUNGEN_17
2.1.2 CHEMIKALIEN_18
2.2
BESTIMMUNG DER BIOTROCKENMASSE
(BTM)
_18
2.3 BESTIMMUNG DER VITALITAET_19
2.3.1 BESTIMMUNG DER COLONIE FORMING UNITS (CFU)_19
2.3.2 VITALFAERBUNG NACH SIVADON ET AL. (1997)_19
2.4 SELEKTIVE EXTRAKTION CYTOSOLISCHER METABOLITE_19
2.4.1 CUCLMETHODE NACH OHSUMI
ET AL. (1988)_19
2.4.2 SELEKTIVE PERMEABILISIERUNG MIT NY STATIN_20
2.4.3 CYTOCHROM C-METHODE NACH DUBOIS UND WIAME (1978)_20
2.5
SCHNELLE PROBENNAHME_
2
1
2.6 ISOLIERUNG INTAKTER VAKUOLEN NACH WIEMKEN UND DUERR (1974)_21
2.7 METABOLITANALYSE_23
2.7.1 HPLC-ANALYSE VON AMINOSAEUREN_23
2.7.
1.1
OPA-MERCAPTOETHANOL-DERIVATISIERUNG_23
2.7.1.2
OPA-MERCAPTOPROPIONSAEURE/ FMOCCL-DERIVATISIERUNG_
25
2.7.2 HPLC-ANALYSE VON POLYAMINEN_26
2.7.3 HPLC-ANALYSE VON NUKLEOTIDEN_2 7
2.7.3.1 ISOKRATISCHE TRENNUNG_27
2.13.2 TRENNUNG MODIFIZIERT NACH PAETTHY ET AL. (1990)_27
2.7.4 HPLC-ANALYSE VON BERNSTEINSAEURE_28
2.7.5 GC-ANALYSE VON POLYOLEN_28
2.8
ENZYMATISCHE BESTIMMUNG VON
ATP_29
2.9 ENZYMATISCHE GLUCOSEBESTIMMUNG_30
2.10 PHOSPHATBESTIMMUNG_30
2.11 BESTIMMUNG VON KALIUMIONEN_31
2.12 FLUORESZENZMIKROSKOPIE_31
2.13 BERECHNUNG UND STATISTISCHE AUSWERTUNG _ 31
BIBLIOGRAFISCHE INFORMATIONEN
HTTP://D-NB.INFO/965583538
INHALTSVERZEICHNIS-
3 ERGEBNISSE 34
3.1 SELEKTIVE PERMEABILISIERUNG MIT NYSTATIN_34
3.1.1 SELEKTIVE NYSTATINDOSIS_34
3.1.2 PERMEABILISIENMGSKINETIK_38
3.1.3 ABHAENGIGKEIT DER NYSTATINWIRKUNG VON DEN KULTURBEDINGUNGEN_40
3.1.3.1 STATIONAERE KULTUREN_40
3.1.3.2 STICKSTOFFINANGELKULTUREN_42
3.1.3.3 HITZE-, KAELTE-UND HYPEROSMOLARE KULTUREN_44
3.1.4 FLUORESZENZMIKROSKOPIE_44
3.1.5 STAMMABHAENGIGKEIT DER PERMEABILISIERUNG MIT NYSTATIN_46
3.2 UNTERSUCHUNG VON DELETIONSSTAEMMEN_46
3.2.1 AAAP-FAMILIE_46
3.2.2 DELETION IM ORF
YCR023C
_48
3.2.3 ORF
YGR138C
UND
YNL065W
_50
3.2.4 ORF
YMR126C
_50
3.3 DYNAMISCHE MESSUNGEN DER AMINOSAEUREVERTEILUNG_53
3.3.1 AMINOSAEUREVERTEILUNG UND WACHSTUM_ 53
3.3.2 SHIFT-EXPERIMENTE_58
3.3.3 DYNAMISCHE MESSUNGEN DER DELETIONSMUTANTE ME020 _63
3.4 ABSCHAETZUNG DER MITOCHONDRIALEN AMINOSAEUREKONZENTRATION_65
3.5 BESTIMMUNG KOMPATIBLER SOLUTE_67
3.5.1 WACHSTUM DER TREHALASEFREIEN MUTANTE _ 68
3.5.2 SALZSTRESS_68
3.5.3 HITZESCHOCK_71
3.5.4 ISOLIERUNG INTAKTER VAKUOLEN_75
4 DISKUSSION 78
4.1 ETABLIERUNG EINER METHODE ZUR SELEKTIVEN METABOLITEXTRAKTION_7 8
4.2 DYNAMISCHE MESSUNGEN DER AMINOSAEURE VERTEILUNG_81
4.2.1 ABHAENGIGKEIT DER AMINOSAEUREVERTEILUNG VOM WACHSTUMSSTADIUM_81
4.2.2 DOWNSHIFT AUF L-PROLIN_'_84
4.2.3 DOWNSHIFT AUF MEDIUM OHNE STICKSTOFFQUELLE_86
4.2.4 UEBERFUHREN STICKSTOFFGEHUNGERTER KULTUREN AUF AMMONIUM_89
4.3 CHARAKTERISIERUNG VON DELETIONSMUTANTEN_91
4.4 VAKUOLAERER TRANSPORT UND STREB_93
4.4.1 HYPEROSMOLARE BEDINGUNGEN
_94
4.4.2 HITZESCHOCK 95
5 ZUSAMMENFASSUNG _ 98
6 ANHANG_ 100
6.1
CBS-MEDIUM NACH VERDUYN ETAL. (1992):_100
6.1.1 STANDARDZUSAMMENSETZUNG_101
6.2 PERMEABILISIERUNGSKINETIK_102
6.3 DYNAMISCHE BESTIMMUNG VON AMINOSAEUREVERTEILUNGEN_105
6.3.1 SHIFT AUF 10 MM L-PROLIN
_105
6.3.2 SHIFT AUF MEDIUM OHNE STICKSTOFFQUELLE_110
6.3.3 DYNAMISCHE STUDIEN DER DELETIONSMUTANTE ME020_114
7 LITERATUR _ 122 |
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