LCAT-Knock-out bei der Maus und Charakterisierung des murinen LCAT-Locus:
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| Format: | Buch |
| Sprache: | German |
| Veröffentlicht: |
2002
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INHALTSVERZEICHNIS
VERZEICHNIS
DER
ABKUERZUNGEN
6
VERZEICHNIS
DER
TABELLEN,
ABBILDUNGEN
UND
DNA-SEQUENZEN
8
1.
EINLEITUNG
10
1.1.
GRUNDZUEGE
DES
LIPOPROTEINSTOFFWECHSELS
10
1.2.
LECITHIN-CHOLESTERIN-ACYLTRANSFERASE
(LCAT)
UND
HDL-METABOLISMUS
14
1.3.
LCAT-LOCUS
UND
STRUKTUR
DES
LCAT-GENS
15
1.4.
FAMILIAERER
LCAT-MANGEL
17
1.4.1.
KLASSISCHER
LCAT-MANGEL
(CLASSIC
LCAT
DEFICIENCY,
CLD)
18
1.4.2.
,
TISCH-AUGEN-ERKRANKUNG
"
(FISH
EYE
DISEASE,
FED)
19
1.5.
TIERMODELLE
IM
BEREICH
LIPIDSTOFIWECHSEL
19
1.6.
ZIELSETZUNG
DER
ARBEIT
21
2.
METHODEN
22
2.1.
CHEMIKALIENLISTE
22
2.2.
PUFFER
UND
NAEHRMEDIEN
24
2.2.1.
AGAROSEGEL-ELEKTROPHORESE
UND
MANUELLE
SEQUENZIERUNG
24
2.2.2.
BAKTERIENKULTUR
25
2.2.3.
SOUTHERN
BIOTS
UND
KOLONIEHYBRIDISIERUNG
27
2.2.4.
ES-ZELLKULTUR
UND
ELEKTROPORATION
28
4
2.3.
MOLEKULARBIOLOGISCHE
BASISTECHNIKEN
30
2.3.1.
AGAROSEGEL-ELEKTROPHORESE
.
30
2.3.2.
ETHANOLPRAEZIPITATION
31
2.3.3.
POLYMERASE
CHAIN
REACTION
(PCR)
31
2.3.4.
DNA-AUFREINIGUNG
32
2.4.
PRAEPARATION
VON
PLASMID-DNA
33
2.4.1.
ISOLIERUNG
VON
PLASMID-DNA
IN
KLEINEM
MASSSTAB
(MINIPREP)
33
2.4.2.
ISOLIERUNG
VON
PLASMID-DNA
IN
GROSSEM
MASSSTAB
(MAXIPREP)
34
2.4.3.
PLASMID-GLYCEROL-UND-ETHANOLSTAMMLOESUNGEN
34
2.5.
KLONIERUNG
DES
MURINEN
LCAT-GENS
35
2.5.1.
TRANSFORMATION
35
2.5.2.
KOLONIEHYBRIDISIERUNG
36
2.5.3.
RESTRIKTIONSVERDAU
39
2.5.4.
SOUTHERN
BLOT-TECHNIK
40
2.5.5.
SUBKLONIERUNG
VON
DNA-FRAGMENTEN
DURCH
LIGATION
44
2.5.6.
DNA-SEQUENZANALYSE
47
2.6.
KONSTRUKTION
DES
YYZIELVEKTORS
"
49
2.7.
ELEKTROPORATION
VON
ES-STAMMZELLEN
52
3.
ERGEBNISSE
59
3.1.
VEKTORENKARTEN
59
3.1.1.
PLASMID
PBC-SK+
2/4A
59
3.1.2.
PLASMID
PBC-SK+
20/15
60
3.1.3.
PLASMID
PBC-SK+
25/5
61
3.1.4.
PLASMID
PGEM-7ZF(KJ
1)-ZIELVEKTOR
62
3.2.
LCAT(+/-)
UND
LCAT(-/-)-TRANSGENE
MAEUSE
63
5
3.3.
MURINES
GENCLUSTER
AUF
CHROMOSOM
8
63
4.
DISKUSSION
71
4.1.
ANALYSE
DES
GENCLUSTERS
AUF
DEM
MURINEN
CHROMOSOM
8
71
4.2.
BISHERIGE
ERGEBNISSE
ANDERER
ARBEITSGRUPPEN,
WELCHE
UEBER
LCAT-KNOCK-OUT-MAEUSE
VERFUEGEN
74
5.
ZUSAMMENFASSUNG
77
LITERATURVERZEICHNIS
79
ANHANG.
SEQUENZINFORMATIONEN
DES
COSMID
9/3
88
DANKSAGUNG
100
LEBENSLAUF
101 |
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