Identifizierung und Lokalisation BK-Kanal-spezifischer mRNA in der Cochlea von Nagetieren:
Gespeichert in:
1. Verfasser: | |
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Format: | Buch |
Sprache: | German |
Veröffentlicht: |
Tübingen
[Selbstverl.]
2002
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Beschreibung: | Zugl.: Tübingen, Univ., Diss., 2001 |
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INHALTSVERZEICHNIS
ABKUERZUNGEN
V
ZUSAMMENFASSUNG
VII
KAPITEL
1
EINLEITUNG
1
1.1
DIE
COCHLEA
DER
SAEUGETIERE
.
2
1.1.1
ANATOMIE
DER
COCHLEA
.
2
1.1.2
BAU
UND
FUNKTION
DER
HAARZELLE
.
5
11.3
MECHANISMUS
DER
FREQUENZANALYSE
.
7
1.1.4
VERSTAERKERFUNKTION
DER
AEUSSEREN
HAARZELLEN
.
7
1.1.5
DIE
INNERE
HAARZELLE
.
8
1.1.6
BK-STROEME
IN
INNEREN
HAARZELLEN
.
9
1.1.7
EXPRESSION
VON
BK-STROEMEN
IN
ANDEREN
ZELLEN
DER
COCHLEA
.
10
1.2
DIE
FAMILIE
DER
CA
2+
-GESTEUERTEN
K
+
-KANAELE
.
12
1.3
BK-KANAELE
.
13
1.3.1
AUFBAU,
FUNKTION
UND
PHARMAKOLOGIE
.
13
1
3.2
DAS
S/O
GEN
.
14
1.3.3
VIELFALT
DER
KCNMA-PROTEINE
DURCH
ALTERNATIVES
SPLEISSEN
.
15
1.3.4
FREQUENZAUFLOESUNG
BEI
NIEDEREN
WIRBELTIEREN
DURCH
ELEKTRISCHES
TUNING
.
16
1.3.5
VARIABILITAET
DURCH
MODULATORISCHE
SS-UNTEREINHEITEN.
17
INHALTSVERZEICHNIS
1.4
KOPPELUNG
VON
BK-KANAELEN
MIT
SPANNUNGSGESTEUERTEN
CA
-KANAELEN
.
20
1.5
REGULATION
DER
LOKALISATION
VON
PROTEINEN
UEBER
C-TERMINALE
SIGNALE.
.21
1.6
AUFGABENSTELLUNG
DER
VORLIEGENDEN
ARBEIT
.
22
KAPITEL
2
MATERIAL
UND
METHODEN
25
2.1
MATERIAL
.
25
2.2
POLYMERASE
KETTENREAKTION
(PCR)
.
25
2.2.1
RT-PCR
MIT
MRNA
AUS
VERSCHIEDENEN
GEWEBEN
.
25
2.2.2
RAPID
AMPLIFICATION
OF
CDNA
ENDS
(RACE)
.
30
2.2.3
YYEINZELZELL"-RT-PCR
.
31
2.3
YYSOUTHERN
BLOT
"
.
33
2.4
PLASMIDE
.
34
2.4.1
PLASMIDE
FUER
DIE
HETEROLOGE
EXPRESSION
VON
KCNM-UNTEREINHEITEN.34
2.4.2
PLASMIDE
FUER
ANDERE
ANWENDUNGEN
.
38
2.5
SEQUENZIERUNG
.
41
2.6
IN
SITU
HYBRIDISIERUNG
(ISH)
.
42
2.6.1
IN
SITU
HYBRIDISIERUNG
AUF
GEFRIERSCHNITTEN
.
42
2.6.2
IN
SITU
HYBRIDISIERUNG
AM
GESAMTORGAN
.
46
KAPITEL
3
ERGEBNISSE
47
3.1
IDENTIFIZIERUNG
DER
IN
DER
COCHLEA
DER
RATTE
VORKOMMENDEN
BK-KANAL-UNTEREINHEITEN
MITTELS
RT-PCR
.
48
3.1.1
KCNMA-UNTEREINHEIT
.
48
31.2
KCNMB-UNTEREINHEITEN
.
52
3.1.2.1
EXPRESSION
VON
KCNMB1
.
53
3.
T.2.2
EXPRESSION
DER
KCNMB2,
KCNMB3
UND
KCNMB4
M-RNA
.
53
3.2
YYEINZELZELL
"
-RT-PCR
.
55
3.2.1
GESCHACHTELTE
PCR
.
56
3.2.2
PCR
MIT
ANSCHLIESSENDEM
NACHWEIS
DURCH
DAS
YYSOUTHERN
BLOT
"
-VERFAHREN
.
58
3.3
HETEROLOGE
EXPRESSION
VON
BK-KANAL-UNTEREINHEITEN
.
60
3.4
IN
SITU
HYBRIDISIERUNG
IN
DER
COCHLEA
VON
RATTEN
.
64
3.4.1
IN
SITU
HYBRIDISIERUNG
AM
GESAMTORGAN
(YYWHOLE
MOUNT
"
)
.
64
3.4
2
IN
SITU
HYBRIDISIERUNG
AN
GEFRIERSCHNITTEN
.
66
3.4.2.1
EXPRESSION
VON
KCNMA
UND
KCNMB1-MRNA
.
66
3.4.2.2
EXPRESSION
DER
ANDEREN
KCNMB-MRNAS
.
71
3.5
EXPRESSION
DER
KCNMA-UNTEREINHEIT
IM
CORTISCHEN
ORGAN
VON
A
1D
-CA
2+
-KANAL
YYKNOCK
OUT
"
MAEUSEN
.
74
II
KAPITEL
4
DISKUSSION
77
41
MOLEKULARE
ZUSAMMENSETZUNG
DER
BK-KANAELE
IN
DER
COCHLEA
DER
RATTE
.
78
4.1.1
AUS
DER
COCHLEA
ISOLIERTE
KCNMA-UNTEREINHEITEN
.
78
4.1.2
ZELLULAERES
EXPRESSIONSMUSTER
DER
KCNMA-UNTEREINHEIT
IN
DER
ADULTEN
COCHLEA
.
79
4.1.3
LEISTUNGSFAEHIGKEIT
DER
EINGESETZTEN
METHODEN
.
83
4.1.4
KOMBINATION
DER
KCNMA-UNTEREINHEIT
MIT
MODULATORISCHEN
SS-UNTEREINHEITEN.
87
4.2
ABHAENGIGKEIT
DER
EXPRESSION
DER
BK-KANAL-UNTEREINHEITEN
VOM
ENTWICKLUNGSSTADIUM
DER
RATTEN
.
89
4.2.1
ZEITLICHER
VERLAUF
DER
EXPRESSION
VON
BK-KANAL-UNTEREINHEITEN
IN
INNEREN
HAARZELLEN
.
89
4.2.2
ZEITLICHER
VERLAUF
DER
EXPRESSION
VON
BK-KANAL-UNTEREINHEITEN
IN
ANDEREN
ZELLEN
DES
CORTISCHEN
ORGANS
.
91
4.3
FUNKTION
DER
C-TERMINALEN
SPLEISSVARIANTEN
DER
KCNMA-SEQUENZ
.
93
4.4
EXPRESSION
VON
KCNMA-MRNA
IN
A
1D
-CA
2+
-KANAL
YYKNOCK
OUT
"
MAEUSEN
.
95
LITERATUR
97
III |
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