Durchflusszytometrische Analyse thrombozytärer Membranantigene zum Vergleich unterschiedlicher Antikoagulans-Lösungen in der Thrombozytapherese:
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2001
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INHALTSVERZEICHNIS
1
EINLEITUNG
1.1
HISTORISCHER
HINTERGRUND
.
1
1.2
INDIKATIONEN
ZUR
THROMBOZYTENSUBSTITUTION
.
1
13
HERSTELLUNGSVERFAHREN
.
1
1.4
HINTERGRUND
DER
STUDIE
1.4.1
EINFLUSS
VERSCHIEDENER
ANTIKOAGULANTIEN
AUF
DIE
PRODUKTQUALITIT
.
2
1.4.2
AUSWIRKUNGEN
DER
APHERESE
AUF
DIE
ZIRKULIERENDEN
THROMBOZYTEN
DER
SPENDER
.
4
1.5
ZIEL
DER
STUDIE
.
5
1.6
KONZEPT
UND
AUFBAU
.
5
2
MATERIAL
UND
METHODIK
2.1
PROBANDEN
.
9
2.2
ZELLSEPARATOR
.
9
2.3
LZT-THROMBOZYTENSET
MIT
LRS-KAMMER
.
10
2.4
THROMBOZYTENSPENDE
.
11
2.5
PROBENGEWINNUNG
VOM
SPENDER
.
12
2.6
PROBENGEWINNUNG
AUS
DEM
THROMBOZYTENKONZENTRAT
.
14
2.7
ZELLMARKER
UND
MONOKLONALE
ANTIKOERPER
(MAB)
2.7.1
EINTEILUNG
UND
SPEZIFITAET
.
15
2.7.2
TITRATION
DER
ANTIKOERPER
.
18
2.7.3
IMMUNFLUORESZENZMARKIERUNG
.
19
2.8
DURCHFLUSSZYTOMETRIE
2.8.1
GRUNDLAGEN
UND
PRINZIPIEN
DER
DURCHFLUSSZYTOMETRIE.
20
2.8.2
AUFBAU
EINES
DURCHFLUSSZYTOMETERS
.
21
2.8.3
FLUORESZENZMESSUNG
.
22
2.8.4
SIGNALVERARBEITUNG
.
25
2.8.5
GERAETEEINSTELLUNG
UND
JUSTIERUNG
.
27
2.8.6 BESONDERHEITEN
DER
DURCHFLUSSZYTOMETRISCHEN
THROMBOZYTENANALYSE
.
29
2.9
QUANTIFIZIERUNG
DER
ANTIGENE
2.9.1
QUANTUM
SIMPLY
CELLULAR
MICROBEADS
.
29
2.9.2
PRSPARATIONSSCHEMA
DER
QSC
MICROBEADS
.
31
2.9.3
DAKO
FLUOROSPHERES
.
32
2.10
QUALITAETSKONTROLLE
DES
ZYTOMETERS
.
35
2.11
VERGLEICH
MICROBEADS
UND
FLUOROSPHERES
.
39
2.12
STATISTISCHE
AUSWERTUNG
.
44
3
ERGEBNISSE
3.1
THROMBOZYTAPHERESE
.
47
3.2
PROBANDEN
.
47
3.3
ANTIGENVERTEILUNG
.
47
3.4
ANALYSE
DER
THROMBOZYTENKONZENTRATE
3.4.1
GLYKOPROTEIN-KOMPLEX
HB-IIIA
(CD
41A)
.
48
3.4.2
MEMBRAN-GLYKOPROTEIN
IB-A
(CD
42B)
.
51
3.4.3
A-GRANULA-MEMBRAN-PROTEIN
GMP-140
(CD
62P)
.
53
3.4.4
GLYKOPROTEIN
53
(CD
63)
.
59
3.5
ANALYSE
DER
ZIRKULIERENDEN
PLAETTCHEN
IM
SPENDERBLUT
3.5.1
GLYKOPROTEIN-KOMPLEX
HB-LILA
(CD
41A)
.
65
3.5.2
MEMBRAN-GLYKOPROTEIN
IB-A
(CD
42B)
.
68
3.5.3
A-GRANULA-MEMBRAN-PROTEIN
GMP-140
(CD
62P)
.
71
3.5.4
GLYKOPROTEIN
53
(CD
63)
.
75
3.6
VERGLEICH
DER
QUANTITATIVEN
ANTIGEN-EXPRESSION
BEI
KONZENTRATEN
UND
SPENDERN
.
79
4
DISKUSSION
.
85
4.1
QUALITAETSKONTROLLE
DER
THROMBOZYTENKONZENTRATE
.
86
4.2
VERLAUFSBEOBACHTUNG
AN
DEN
KONZENTRATEN
.
88
43
UNTERSCHIEDE
ZWISCHEN
ACD
UND
CPD
-KONZENTRATEN
.
92
4.4
AUSWIRKUNG
DER
APHERESE
AUF
DIE
ZIRKULIERENDEN
THROMBOZYTEN
94
5
ZUSAMMENFASSUNG
.
101
6
LITERATURVERZEICHNIS
.
103
7
LISTE
DER
MATERIALIEN
UND
REAGENZIEN
.
113
8
VERWENDETE
ABKUERZUNGEN
.
115 |
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