Identifikation, Zell- und Gewebsverteilung von ADAM-9 im normalen, hyperproliferativen und karzinomatösen oralen Plattenepithel:
Gespeichert in:
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2002
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INHALTSVERZEICHNIS
1
INHALTSVERZEICHNIS
1 EINLEITUNG.
.
5
1.1 DAS ORALE PLATTENEPITHELKARZINOM
.
5
1.2 ORALE PLATTENEPITHELKARZINOME - EINE TUMORGRUPPE MIT DIFFERENTEM
MALIGNITAETSGRAD
.5
1.3 DAS GRADING DER IN VASIONSZON E
.6
1.4 INVASION UND METASTASIERUNG
.6
1.4.1 ABLAUF VON INVASION UND METASTASIERUNG
.
7
1.4.1.1 AUFLOESUNG VON ZELL-ZELL-VERBINDUNGEN UND MODULATION VON ZELL-
MATRIX-REZEPTOREN ALS EIN INVASIONSASSOZIIERTER VORGANG
.
8
1.4.1.2 MATRIXDEGRADATION
.
10
1.4.1.3 MATRIXNEUAUFBAU ALS LEITSCHIENE FUER DIE INVASION
.
11
1.4.2 PROTEOLYSE IN DER INVASIONSFRONT
.
12
1.4.2.1 MATRIXMETALLOPROTEINASEN
.
12
1.4.2.2 CATHEPSINE
.
16
1.4.2.3 UROKINASE-PLASMINOGENAKTIVATOR-SYSTEM
.
16
1.4.3 INVASIONSASSOZIIERTE MATRIXDEGRADATION
.
17
1.4.4 DIE ADAM-MOLEKUELFAMILIE
-
EINE PROTEINFAMILIE MIT POTENTIELLER
TUMORBIOLOGISCHER BEDEUTUNG
.
19
1.4.5 ADAM-MOLEKUELE UND KARZINOME
.
24
1.4.6 ADAM-9
.
24
1.5 ZIELSTELLUNG
. 26
2 MA TERIAL UND METHODEN
.28
2.1 GEWEBEMATERIAL
.28
2.1.1 PARAFFLNEINBETTUNG/KONVENTIONELLE HISTOLOGIE
.
28
BIBLIOGRAFISCHE INFORMATIONEN
HTTP://D-NB.INFO/964600552
INHALTSVERZEICHNIS
2
2.1.2 GRADINGSYSTEM
.
29
2.1.2.1 EINTEILUNG DER ORALEN PLATTENEPITHELKARZINOME NACH DEM
GRADINGSYSTEM VON BRYNE
.
30
2.1.2.2 BEWERTUNG DER IMMUNHISTOCHEMISCHEN ADAM-9-EXPRESSION
.
30
2.1.3 KRYOKONSERVIERUNG FUER IMMUNHISTOCHEMISCHE VERFAHREN
.
30
2.1.4 ZELLKULTUREN HUMANER ORALER PLATTENEPITHELKARZINOME UND HUMANER
FIBROBLASTEN
.
31
2.1.4.1 GEWEBSMATERIALFUER DIE ZELLKULTUR
.
31
2.1.4.2 PRIMAERKULTUR HUMANER ORALER PLATTENEPITHELKARZINOME
.
31
2.1.4.3 PRIMAERKULTUR HUMANER FIBROBLASTEN DER PALMAR FIBROMATOSE UND VON
TUMORSTROMAFIBROBLASTEN
.
32
2.1.4.4 IMMUNHISTOCHEMISCHE CHARAKTERISIERUNG DER ZELLKULTUREN
.
32
2.2 RT-PCRFUER ADAM-9
.33
2.2.1 RNA-EXTRAKTION AUS GEWEBE UND KULTIVIERTEN ZELLEN
.
33
2.2.2 DNASE- VERDAU NACH RNA-EXTRAKTION
.
33
2.2.3 RT-PCR
.
34
2.2.4 DNA -ELEKTROPHORESE
.
35
2.3 WESTERNBLOT ZUM NACHWEIS VON ADAM-9
.35
2.3.1 PROTEINEXTRAKTION
.
35
2.3.1.1 PROTEINEXTRAKTION AUS GEWEBE
.
35
2.3.1.2 PROTEINEXTRAKTION AUS KULTURZELLEN
.
36
2.3.2 MESSUNG DES PROTEINGEHALTES
.
36
2.3.3 CON-A-SEPHAROSE-ANREICHERUNG
.
36
2.3.4 SDS-PAGE UND GELFAERBUNG
.
37
2.3.5 WESTERNBLOT, MEMBRANFAERBUNG UND IMMUNDETEKTION
.
37
2.4 IMMUNHISTOCHEMIE
.38
2.4.1 APAAP-METHODE
.
38
2.4.2 IMMUNFLUORESZENZMARKIERUNGEN
.
39
2.4.3 IMMUNFLUORESZENZ-DOPPELMARKIERUNGEN
.
39
2.4.4 LICHTMIKROSKOPISCHE AUSWERTUNG
.
40
2.5 VERZEICHNIS DER PUFFER-, FAERB- UND FIXIERUNGSLOESUNGEN
.41
INHALTSVERZEICHNIS
3
3 ERGEBNISSE
.48
3.1 NACHWEIS VON ADAM-9 AUF RNA-EBENE
.48
3.2 NACHWEIS VON ADAM-9 AUF PROTEINEBENE
.49
3.2.1 NACHWEIS VON ADAM-9 MITTELS WESTERN-BLOT-TECHNIK
.
49
3.2.2 IMMUNHISTOCHEMISCHE ANALYSE VON ADAM-9 IN KORRELATION ZUM
HISTOLOGISCHEN
KONTEXT
.
52
3.2.2.1 ADAM-9 IN DER NORMALEN ORALEN MUKOSA
.
52
3.2.2.2 ADAM-9-EXPRESSION IM STROMA DER MUNDSCHLEIMHAUT
.
53
3.2.2.3 ADAM-9 IN DER HYPERPLASTISCHEN ORALEN MUKOSA
.
55
3.2.2.4 ADAM-9 IM ORALEN PLATTENEPITHELKARZINOM
.
57
3.2.2.5 ADAM-9 IN ZELLLINIEN ORALER PLATTENEPITHELKARZINOME
.
61
3.2.2.6 NACHWEIS VON ADAM-9 UND DER AE-INTEGRINKETTE IM NICHT
NEOPLASTISCHEN UND MALIGNE TRANSFORMIERTEN ORALEN PLATTENEPITHEL
MITTELS KONFOKALER LASERSCANNINGMIKROSKOPIE
.
62
3.2.2
.7
SEMIQUANTITATIVE BEWERTUNG DES ADAM-9-NACHWEISES IN KORRELATION
ZUM INVASIONSMUSTER
.
65
3.3 STATISTISCHE EVALUATION DER IMMUNHISTOCHEMISCHEN ADAM-9-EXPRESSION
IN
KORRELATION ZUM GRADING UND ZUR NODALEN METASTASIERUNG
.65
3.3.1 KLASSIFIZIERUNG DER ZUR BESTIMMUNG DER ADAM-9-EXPRESSION
AUSGEWAEHLTEN
ORALEN PLATTENEPITHELKARZINOME
.
65
3.3.2 ADAM-9-EXPRESSION IN KORRELATION ZUM GRADING
.
66
3.3.3 ADAM-9-EXPRESSION IN KORRELATION ZUR NODALEN METASTASIERUNG
.
69
4 DISKUSSION.70
4.1 EXPRESSIONSANALYSE VON ADAM-9
.70
4.1.1 DIE ADAM-9-SPEZIFISCHE MRNA IM HUMANEN ORALEN PLATTENEPITHEL UND
IN
WEITEREN GEWEBSTYPEN DIFFERENTER SPEZIES
.
70
4.1.2 DAS ADAM-9-MOLEKUEL IM HUMANEN PLATTENEPITHEL UND IN WEITEREN
GEWEBSTYPEN DIFFERENTER SPEZIES
.
72
INHALTSVERZEICHNIS
4
4.2 ADAM-9 - EIN BAUSTEIN DES NORMALEN, HYPERPROLIFERATIVEN UND
KARZINOMATOESEN ORALEN PLATTENEPITHELS
.73
4.2.1 ZELLULAERE UND GEWEBLICHE VERTEILUNG VON ADAM-9 IM NORMALEN,
HYPERPLASTISCHEN UND KARZINOMATOESEN ORALEN PLATTENEPITHEL - DIE
VERKNUEPFUNG
DER ADAM-9-EXPRESSION MIT DER BASALZEILIGEN UND PARABASALZEILIGEN
DIFFERENZIERUNG DES PLATTENEPITHELS
.
74
4.2.2 IMMUNHISTOCHEMISCHE MODULATION DER ADAM-9-EXPRESSION IN RELATION
ZUR
HISTOLOGISCHEN AUSPRAEGUNG DES INVASIVEN PHAENOTYPS IM ORALEN
PLATTENEPITHELKARZINOM
-
EIN KARZINOMTYPISCHES EXPRESSIONSMUSTER
.
76
4.3 SCHLUSSFOLGERUNGEN AUS DER GEWEBLICHEN VERTEILUNG VON ADAM-9 IM
NORMALEN UND KARZINOMATOESEN ORALEN PLATTENEPITHEL ZU MOEGLICHEN
FUNKTIONEN DES MOLEKUELS
.78
4.4 AUSBLICK
.SO
5 ZUSAMMENFASSUNG
.82
6 LITERA TUR VERZEICHNIS,
84 |
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