Untersuchungen zur pathophysiologischen Relevanz von Polymorphismen im Kir6.2-Gen und der Gewebsselektivität von Katp-Kanal-Modulatoren:
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| adam_text | UNTERSUCHUNGEN ZUR PATHOPHYSIOLOGISCHEN RELEVANZ VON POLYMORPHISMEN IM
KIROE.2-GEN UND DER GEWEBSSELEKTIVITAET VON K A TP-KANAL-MODULATOREN VON
DER GEMEINSAMEN NATURWISSENSCHAFTLICHEN FAKULTAET DER TECHNISCHEN
UNIVERSITAET CAROLO-WILHELMINA ZU BRAUNSCHWEIG ZUR ERLANGUNG DES GRADES
EINER DOKTORIN DER NATURWISSENSCHAFTEN (DR. RER. NAT.) GENEHMIGTE
DISSERTATION VON ULRIKE MEYER AUS STENDAL INHALTSVERZEICHNIS
INHALTSVERZEICHNIS VERZEICHNIS DER ABKUERZUNGEN VI 1 EINLEITUNG 1 1.1
KALIUM*KANAELE 1 1.2 MOLEKULARE STRUKTUR ATP-SENSITIVER KALIUM-KANAELE 1
1.3 K| R 6.Y - DIE PORENBILDENDE UNTEREINHEIT DES K AT P-KANALS 2 1.4
SURX - DIE REGULATORISCHE UNTEREINHEIT DES K A TP-KANALS 4 1.4.1
NACHWEIS IN GEWEBEN 4 1.4.2 SULFONYLHARNSTOFFREZEPTOREN SIND
ABC-PROTEINE 4 1.4.3 ISOFORMEN DES SULFONYLHAMSTOFFREZEPTORS UND IHRE
GEWEBEVERTEILUNG 5 1.4.4 LOKALISATION DER BINDUNGSSTELLE FUER
SULFONYLHARNSTOFFE 6 1.4.5 LOKALISATION DER BINDUNGSSTELLE FUER
KALIUM-KANAL-OEFFNER 6 1.5 BEDEUTUNG VON K AT P-KANAELEN 7 S 1.5.1 K AT
I^KANAELE IN DEN SS-ZELLEN DES PANKREAS 7 1.5.1.1 PHYSIOLOGISCHE BEDEUTUNG
7 1.5.1.2 MUTATIONEN IN SUR1 UND K, R 6.2 SIND URSACHE FUER PHHI 8
1.5.1.3 POTENTIELLE BEDEUTUNG VON K|R6.2-POLYMORPHISMEN FUER DIE
AUSBILDUNG VON TYP 2 DIABETES MELLITUS 9 1.5.2 K ATP -KANAELE IN NEURONEN
10 1.5.3 K A -RR-KANAELE IN HERZ UND SKELETTMUSKEL 11 1.5.4 K A TP-KANAELE
IN GLATTER MUSKULATUR 11 1.6 MODULATOREN DER K ATR -KANALAKTIVITAET 12
1.6.1 CYTOSOLISCHE NUKLEOTIDE 12 1.6.2 SULFONYLHARNSTOFFE 13 1.6.3
KALIUM-KANAL-OEFFNER 14 1.6.3.1 KCOS BILDEN EINE STRUKTURELL SEHR
HETEROGENE KLASSE VON SUBSTANZEN 14 1.6.3.2 DIAZOXID 15 1.6.3.3
PINACIDIL UND ANDERE CYANOGUANIDINE 16 1.6.3.4 WEITERE
KALIUM-KANAL-OEFFNER 16 I INHALTSVERZEICHNIS 1.6.3.5 THERAPEUTISCHES
POTENTIAL 17 1.6.3.6 GEWEBSSELEKTIVITAET DER KCOS 17 1.6.4 WEITERE
SUBSTANZEN MIT WIRKUNG AUF K A JP-KANAELE 18 2 ZIELE DER ARBEIT 19 3
MATERIAL UND METHODEN 20 3.1 KULTIVIERUNG, PASSAGIERUNG UND
KRYOKONSERVIENING VON COS 1-ZELLEN 20 3.1.1 LOESUNGEN UND MEDIEN FUER DIE
ZELLKULTUR 20 3.1.2 KULTIVIERUNG VON COS 1-ZELLEN 21 3.1.3 UMSETZEN DER
ZELLEN (PASSAGIEREN) 21 3.1.4 KRYOKONSERVIERUNG VON COSL-ZELLEN 22 3.2
HERSTELLUNG DER PUNKTMUTATIONEN 22 3.2.1 LOESUNGEN 22 3.2.2
PUNKTMUTATIONEN 23 3.2.2.1 VERWENDETE PLASMIDE 23 3.2.2.2 DESIGN DER
OLIGONUKLEOTID-PRIMER 23 3.2.3 AUSFUEHRUNG DER PCR 24 3.2.4 KONTROLLE DES
PCR-PRODUKTS 24 3.3 TRANSFORMATION UND PLASMIDPRAEPARATION 25 3.3.1
LOESUNGEN 25 3.3.2 HERSTELLUNG TRANSFORMATIONSKOMPETENTER BAKTERIEN 28
3.3.3 DURCHFUEHRUNG DER TRANSFORMATION 28 3.3.4 PLASMIDPRAEPARATION 28
3.3.5 SEQUENZIERUNG 29 3.4 TRANSFEKTION 29 3.4.1 LOESUNGEN 29 3.4.2
TRANSFEKTION MITTELS DEAE-DEXTRAN-METHODE 31 3.4.3 COTRANSFEKTION VON
SURL MIT KIR6.2 W1 UND K| R 6.2 E2 3K IM VERHAELTNIS 1:1 32 3.4.4
HISTOLOGISCHE LAC Z-FAERBUNG 3.4.4.1 LOESUNGEN 32 32 II INHALTSVERZEICHNIS
3.4.4.2 FAERBUNG 3.4.4.3 AUSWERTUNG DER FAERBUNG 3.5 MEMBRANPRAEPARATION
3.5.1 LOESUNGEN 3.5.2 PRAEPARATION VON MEMBRANEN AUS COSL-ZELLEN 3.6
PROTEINBESTIMMUNG 3.6.1 LOESUNGEN 3.6.2 DURCHFUEHRUNG DER
PROTEINBESTIMMUNG 3.7 BINDUNGSEXPERIMENTE AN COS-MEMBRANEN 3.7.1
LOESUNGEN 3.7.1.1 LOESUNGEN DER RADIOLIGANDEN 3.7.1.2 STAMMLOESUNGEN DER
EINGESETZTEN TESTSUBSTANZEN 3.7.2 VORBEREITUNG DER MEMBRANEN 3.7.3
GLEICHGEWICHTSBINDUNGSEXPERIMENTE 3.7.3.1 PRINZIP DES FILTRATIONSASSAYS
3.7.3.2 INKUBATIONEN 3.7.3.3 FILTRATION UND SZINTILLATIONSZAEHLUNG 3.8
SYNTHESE DES BPDZ 44 3.9 ELEKTROPHYSIOLOGISCHE REGISTRIERUNGEN 3.9.1
LOESUNGEN 3.9.1.1 BASISLOESUNGEN 3.9.1.2 LOESUNGEN DER EINGESETZTEN
NUKLEOTIDE 3.9.1.3 STAMMLOESUNGEN DER EINGESETZTEN TESTSUBSTANZEN 3.9.2
VORBEREITUNG DER ZELLEN 3.9.3 DURCHFUEHRUNG DER ELEKTROPHYSIOLOGISCHEN
EXPERIMENTE 3.9.3.1 ALLGEMEINES 3.9.3.2 AUFBAU DES PATCH-CLAMP-SETUPS
3.9.3.3 HERSTELLUNG DER PIPETTEN 3.9.3.4 SEALBILDUNG UND
PATCH-CLAMP-KONFIGURATIONEN 3.9.3.5 APPLIKATION DER TESTLOESUNGEN III 33
33 34 34 35 35 35 36 36 36 37 37 39 39 39 39 40 41 42 42 42 43 44 45 45
45 45 46 46 48 INHALTSVERZEICHNIS 3.10 DATENAUSWERTUNG 49 3.10.1
STATISTIK 49 3.10.2 BINDUNGSEXPERIMENTE 49 3.10.2.1
DISSOZIATIONSKINETIKEN 49 3.10.2.2 GLEICHGEWICHTSBINDUNGEN 50 3.10.2.3
DISSOZIATIONSKONSTANTEN 50 3.10.3 PATCH-CLAMP-EXPERIMENTE 50 3.10.3.1
AUSWERTUNG DER PATCH-CLAMP-EXPERIMENTE 50 3.10.3.2 KURVENPARAMETER 51
3.10.3.3 ERMITTLUNG VON OFFEN- UND GESCHLOSSENZEITEN 51 3.10.3.4
ERMITTLUNG DER OFFENWAHRSCHEINLICHKEIT (P O ) 52 3.10.3.5 ERMITTLUNG DER
ATP-SENSITIVITAET 52 3.10.3.6 ERMITTLUNG DES IC R2 -WERTES 53 3.10.3.7
DAS *ODDS-RATIO 53 3.10.3.8 GEWICHTETER ZUZUORDNENDER ANTEIL (WEIGHTED
ATTRIBUTABLE PROPORTION, WAP) 54 3.10.3.9 BESTIMMUNG DER ALLELEN
FREQUENZ F K 54 4 ERGEBNISSE 55 4.1 FUNKTIONELLE RELEVANZ DER
POLYMORPHISMEN E23K, L270V UND I337V IN K, R 6.2 55 4.1.1 E23K INDUZIERT
UEBERAKTIVITAET VON SUR1/K| R 6.2-KANAELEN DURCH REDUKTION DER LANGEN
GESCHLOSSENZEITEN 55 4.1.2 E23K FUEHRT ZU EINER ABNAHME DER
ATP-EMPFINDLICHKEIT 59 4.1.3 E23K ERHOEHT DIE ZUR REDUKTION VON P O AUF
0,02 BENOETIGTE ATP-KONZENTRATION 60 4.2 REGULATION REKOMBINANTER K AT
P-KANAELE DURCH BPDZ 44 62 4.2.1 BINDUNG VON BPDZ 44 AN REKOMBINANTEN
SURL 62 4.2.2 AKTIVIERUNG REKOMBINANTER SURL/KIR6.2-KANAELE DURCH BPDZ 44
63 4.2.3 BINDUNG VON BPDZ 44 AN DIE SUR2-ISOFORMEN 65 4.2.4 BPDZ 44 KANN
REKOMBINANTE SUR2/K|R6.2-KANAELE NICHT OEFFNEN 67 IV INHALTSVERZEICHNIS
4.3 WIRKUNG AUSGEWAEHLTER NEUROLEPTIKA UND ANTIDEPRESSIVA AUF
REKOMBINANTE SUR2A/- UND SUR2B/K IR 6.2-KANAELE 69 4.3.1 AFFINITAETEN DER
SUBSTANZEN ZU SUR2B 70 4.3.2 AFFINITAETEN DER SUBSTANZEN ZU SUR2A 71
4.3.3 * SUR2B/K, R 6.2-KANAELE 72 4.3.4 SUR2A/K, R 6.2-KANAELE 74 5
DISKUSSION 75 5.1 E23K PRAEDISPONIERT FUER DIE ENTWICKLUNG EINES TYP 2
DIABETES MELLITUS 75 5.2 GEWEBSSELEKTIVITAET VON BPDZ 44 81 5.2.1 BPDZ 44
WIRKT ANTAGONISTISCH AN DER KCO-BINDUNGSSTELLE VON SUR2-ISOFORMEN 81
5.2.2 DIE POSITION DES STICKSTOFFATOMS IM PYRIDINRING VON BPDZ44 IST
KRITISCH FUER DIE SELEKTIVITAET FUER SUR1/K, R 6.2-KANAELE 82 5.2.3
POTENTIELLE THERAPEUTISCHE BEDEUTUNG VON BPDZ 44 83 5.3 NEUROLEPTIKA UND
ANTIDEPRESSIVA 84 5.3.1 NEUROLEPTIKA UND ANTIDEPRESSIVA ENTFALTEN IHRE
INHIBITORISCHE WIRKUNG AUF K AT P-KANAELE DURCH INTERAKTION MIT DER
SUR-UNTEREINHEIT 84 5.3.2 SUR2A/K W 6.2-KANAELE KOENNTEN AN DER
VERMITTLUNG TOXISCHER EFFEKTE VON NEUROLEPTIKA UND ANTIDEPRESSIVA AM
HERZEN BETEILIGT SEIN 84 6 ZUSAMMENFASSUNG 7 LITERATURVERZEICHNIS 86 89
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| spelling | Meyer, Ulrike 1973- Verfasser (DE-588)124025730 aut Untersuchungen zur pathophysiologischen Relevanz von Polymorphismen im Kir6.2-Gen und der Gewebsselektivität von Katp-Kanal-Modulatoren von Ulrike Meyer 2002 VII, 103 S. graph. Darst. txt rdacontent n rdamedia nc rdacarrier Braunschweig, Techn. Univ., Diss., 2002 Kaliumkanal (DE-588)4258505-3 gnd rswk-swf Kalium-Kanalöffner (DE-588)4356718-6 gnd rswk-swf Polymorphismus (DE-588)4130554-1 gnd rswk-swf Bauchspeicheldrüse (DE-588)4004722-2 gnd rswk-swf Pathophysiologie (DE-588)4044898-8 gnd rswk-swf Nucleotide (DE-588)4135085-6 gnd rswk-swf Selektivität (DE-588)4251340-6 gnd rswk-swf Arzneimittelnebenwirkung (DE-588)4003134-2 gnd rswk-swf (DE-588)4113937-9 Hochschulschrift gnd-content Kaliumkanal (DE-588)4258505-3 s Arzneimittelnebenwirkung (DE-588)4003134-2 s DE-604 Bauchspeicheldrüse (DE-588)4004722-2 s Kalium-Kanalöffner (DE-588)4356718-6 s Selektivität (DE-588)4251340-6 s Nucleotide (DE-588)4135085-6 s Polymorphismus (DE-588)4130554-1 s Pathophysiologie (DE-588)4044898-8 s GBV Datenaustausch application/pdf http://bvbr.bib-bvb.de:8991/F?func=service&doc_library=BVB01&local_base=BVB01&doc_number=009933526&sequence=000001&line_number=0001&func_code=DB_RECORDS&service_type=MEDIA Inhaltsverzeichnis |
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