Casein-Kinase-2-beta und neuronale Entwicklungsprozesse: Untersuchungen am neurogenetischen Modellorganismus Drosophila melanogaster
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2002
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INHALTSVERZEICHNIS
INHALTSVERZEICHNIS
AL
A2
A3
A4
A 5
A6
EINLEITUNG
DIE PILZKOERPERENTWICKLUNG IM LICHT EINER VERGLEICHENDEN
GEHIMENTWICKLUNGSBIOLOGIE
ALLGEMEINE BETRACHTUNG DER PILZKOERPER: VORKOMMEN, DEFINITION UND
FUNKTIONEN_
ENTWICKLUNG UND AUFBAU DER PILZKOERPER BEI
DROSOPHILA MELANOGASTER_
GENETISCHE GRUNDLAGEN DER PILZKOERPERENTWICKLUNG BEI
DROSOPHILA MELANOGASTER_
MUSHROOM BODIES UNDERSIZED P1 (MBT/1) - EINE NEUE HYPOPLASTISCHE
PILZKOERPER-
STRUKTURMUTANTE_
ZIEL DER ARBEIT_
B
B 1
B2
B3
B4
B 5
B 6
B 7
B 8
B 9
BIO
BLL
B 12
B 13
B 13
B 14
BIS
B 16
B 17
MATERIAL
ANTI-CK2SS-ANTISERUM/ANTIKOERPER
BAKTERIEN_
CDNAS_
CHEMIKAL IEN/ANTIBIOTIKA_
COMPUTERPROGRAMME_
EINBETTMEDIUM_
ENZYME_
FILME_
FLIEGENSTAEMME,
KITS
LOESUNGEN, MEDIEN UND PUFFER
MEMBRANEN_
MIKROSKOPIE_
MOLEKULARGEWICHTS-STANDARDS_
PLASMIDE_
PRIMER_
P1 -BAKTERIOPHAGEN-KLON_
RADIONUKLEOTIDE_
AL
.12
-12
-12
-12
JL2
_12
AL
AL
AL
C METHODEN
C 1 AUFZUCHTBEDINGUNGEN FUER FLIEGEN,
C 2 KEIMBAHNTRANSFORMATION VON FLIEGEN_
C 3 DNA-PRAEPARATIONEN_
C 3.1 MINIPRAEPARATION VON PLASMID-DNA_
C 3.2 MIDI* UND MAXIPRAEPARATION VON PLASMID-DNA_
C 3.3 P1 -BAKTERIOPHAGEN-DNA-GEWINNUNG_
AL
AL
AL
AL
AL
AL
I
BIBLIOGRAFISCHE INFORMATIONEN
HTTP://D-NB.INFO/967104505
INHALTSVERZEICHNIS
C 3.4
C 3.5
C 3.6
GEWINNUNG GENOMISCHER DNA_
DNA-ELUTION AUS AGAROSEGELEN
PLASMID-RETTUNGSEXPERIMENTE_
C 3.7 KONZENTRATIONSBESTIMMUNG VON DNA-LOESUNGEN
C 4 KLONIENMG VON DNA_
C4.1 LIGATIONEN_
C 4.2
C 5
C 6
C7
C 8
C 9
C 10
CLL
C 12
C 13
C 14
C 15
BAKTERIEN-TRANSFORMATION
DNA- SEQUENZIERUNG_
AUSWERTUNG VON DNA-SEQ UENZEN
PCR_
MARKIERUNG VON DNA
SOUTHEM-BLOT-ANALYSEN_
ANFERTIGUNG HISTOLOGISCHER GEHIMSCHNITTE
SDS-POLYACRYLAM ID-GELELEKTROPHORES
E
WESTERN-BLOT-ANALYSEN_
PROTEIN-DETEKTION AUF WESTEM-BLOTS
PLANIMETRIE UND VOLUMENREKONSTRUKTION VON NEUROPILEN_
STATISTIK
JL2
AL
AL
AL
AL
AL
AS.
AS
_IA
AS
AS
AS
AS
AS
AS
AS
AS
AS
D
DL
D2
ERGEBNISSE
ALLGEMEINE BESCHREIBUNG VON
MUSHROOM BODIES UNDERSIZED PL
_
DIE
MBU1'1-MUTATION
FUHRT IN BEIDEN GESCHLECHTERN ZU EINER REDUKTION DES PILZKOERPER-
CALYXVOLUMENS UM ETWA DIE HAELFTE _
D 2.1
D2.2
D 2.3
DER PI LZKOERPERCALYXPHAENOTYP DER MLW^-MUTATION IN MAENNCHEN_
DER PILZKOERPERCALYXPHAENOTYP DER
MBIF1-MUTATION
IN WEIBCHEN_
DER QUOTIENT V(FF K)/V(CTE) ALS MASS FUER DIE PILZKOERPERCALYXGROESSE
D 3
D 3.1
D 3.2 DIE BEIDEN P[LACW]-INSERTIONEN DES
MBI/ L ^P3843/2 -CHROMOSOMS
SINDYDIE URSACHE
DES MIT DER MII/'-MUTATION ASSOZIIERTEN PILZKOERPERPHAENOTYPS_
D 4 DIE LETALITAET EINES DER DREI ISOLIERTEN LETALCHROMOSOMEN IST
AUSSCHLIESSLICH AUF EINE
LETALE MUTATION DES CASEIN-KINASE-2SS-GENS ZURUECKZUFUEHREN_
D 4.1 DAS CASEIN-KINASE-2SS~GEN IST IN
DROSOPHILA MELANOGASTER
EIN ESSENTIELLES GEN
DIE LETALITAET DES
MBIFA6~,L,W
-CHROMOSOMS WIRD DURCH MINDESTENS EINE MUTATION
VERURSACHT, DIE KEINE LETALMUTATION DES CK2SS-GENS IST_
D4.2
D 4.3 DAS
MBI/20'IL,W~
-CHROMOSOM TRAEGT SOWOHL EINE LETALMUTATION DES CK2SS-GENS
ALS AUCH EINE ZWEITE, VON CK2SS UNABHAENGIGE LETALMUTATION_
D 5
MBIF1
VERHAELT SICH GENETISCH WIE EIN HYPOMORPHES CK2&-ALLEL_
AL
AA
AL
AS
AS
MBIF
1
IST EINE DURCH P[LACW]-ELEMENTE VERURSACHTE MUTATION DES
CASEIN-KINASE-2SS-GENS_29
DAS
MBI/ ,{P3843/2}-C\CAIOSCM
TRAEGT EINE GESCHACHTELTE INSERTION ZWEIER P[LACW]-
ELEMENTE IM CASEIN-KINASE-2SS-GEN_
2S
AL
AS
AS
JA
JS
AL
LL
INHALTSVERZEICHNIS
DS.L CHARAKTERISIERUNG DES PILZKOERPERPHAENOTYPS VERSCHIEDENER M&U-ALLELE
IM TRANS
HETEROZYGOTEN ZUSTAND ZUR DEFIZIENZ DF(L)KA6_
D 5.2 CHARAKTERISIERUNG DES PILZKOERPERPHAENOTYPS VERSCHIEDENER MBU-ALLELE
IM TRANS-
HETEROZYGOTEN ZUSTAND ZU DER DEFIZIENZ
MBI/U26~2L
_
D 6 NAHEZU ALLE MOEU-EXZISIONSALLELE INTERAGIEREN IM TRANSHETEROZYGOTEN
ZUSTAND MIT DEM
M&I/^^-CHROTNOSOM_
D 7 DIE MEISTEN VITALEN M6U
W/ J**,/Y-P[LACW]-EXZISIOIISALLELE ZEICHNEN SICH MOLEKULAR DURCH
P[LACW]-RESTINSERTIONEN IM 5'-BEREICH DES CK2SS-GENS AUS_
D 7.1 SOUTHEM-BLOT-ANALYSEN DER
MBT/BUEKSUAM
UND
MBI/ ZAM/ZM+
EXZISION SEH MM RE/VN?_
D 7.2 PCR-ANALYSE DER MFRU-EXZISIONSCHROMOSOMEN_
D 8 VOM CK2B-GEN WERDEN MINDESTENS SIEBEN TRANSKRIPTE GEBILDET_
D 8.1 VERFUEGBARE GENOMISDIE DNA- SEQUENZEN_
D 8.2 KARTIERUNG DER EXONISCHEN BEREICHE DES CK2B-GENLOKUS_
D 8.3 DIE CK2SS-TRANSKRIPTIONSEINHEIT CODIERT VERMUTLICH FUER MINDESTENS
VIER PROTEINISOFORMEN_
D 8.4 DIE VERWENDUNG ZWEIER PROMOTOREN KOENNTE TEIL DER REGULATION DES
CK2SS-GENS SEIN
D 9 DIE MBI/1
^WSYJ ^-P[LACW]-ELEMENTE SIND IN DAS VOFHERGESAGTE OFFENE LESERASTER DES
EXONS
IC INSERIERT_
D 10 MINDESTENS DREI VERSCHIEDENE CK2SS-ISOFORMEN LASSEN SICH DURCH
WESTEM-BLOTS NACHWEISEN
DIL ZUSAETZLICHE GENOMISCHE CK2B-TRANSGENE FUEHREN ZU KEINER VERAENDERUNG
DER PILZKOERPER-
ENTWICKLUNG_
D 12 DER PILZKOERPERDEFEKT IN JWIW^-MAENNCHEN LAESST SICH DURCH EIN
GENOMISCHES CK2SS-TRANSGEN
RETTEN _
D 13 GEWEBESPEZIFISCHE EXPRESSION DER CK2SS-VILA-ISOFORM IM WILDTYPISCHEN
HINTERGRUND
VERAENDERT DIE NORMALE PILZKOERPERENTWICKLUNG NICH
T _
D 14 GEWEBESPEZIFISEHE EXPRESSION DER CK2SS-VIIA-ISOFORM IN
MBI/1-MAENNCHEN
KANN DEREN
PILZKOERPERPHAENOTYP TEILWEISE RETTEN_
%
D 15 UBIQUITAERE EXPRESSION DER CK2SS-VIIA-ISOFORM ERMOEGLICHT EINE NORMALE
PILZKOERPERENTWICKLUNG
IN M/U/^-MAENNCHEN_
D 16 UBIQUITAERE EXPRESSION DER CK2SS-VLIA-ISOFORM RETTET DIE LETALITAET
DES M*M^
2^2I-CHROMOSOMS_
D 17 N-TERMINALE PHOSPHORYLIERUNG DER CK2SS-UNTEREINHEIT DURDI DIE
CK2A-UNTEREINHEIT IST KEIN
LEBENSNOTWENDIGER PROZESS_/_
D 18 DIE CK2SS-MUTATION DES
MBT
/L(PX43/2}-CHROMOSOMS VERHINDERT DIE ENTWICKLUNG VON FLIEGEN,
DIE EINE AKTIVIERTE FORM DER MAP-KINASE ROLLED (RI*") EXPRIMIEREN_
D 19 DIE CASEIN-KINASE-2SS-UNTEREINHEIT WIRD VERMUTLICH FUER EINE NORMALE
AUGEN- UND FLUEGEL
ENTWICKLUNG BENOETIGT_
AL
A3
_51
A3
54
A3
_FIL
AL
AL
64
66
A3
70
JA
23
JJ
23.
33
85
33
33
E DISKUSSION
E 1 CASEIN-KINASE-2 - EIN UEBERBLICK_
E2
MBI/1 -
EIN CK2SS-ALLEL MIT WENIGEN DETEKTIERBAREN PHAENOTYPEN
E 3 MUTAGENE WIRKUNG DER MW '-P[LACW]-ELEMENTE_
INHALTSVERZEICHNIS
E 4 MOEGLICHE FUNKTION VON CK2SS IN DEN REPRODUKTIONSORGANEN VON
DROSOPHILA^
E 5 OBEREXPRESSION VON CK2SS FUEHRT ZU KEINEN ENTWICKLUNGSSTOERUNGEN_
E 6 ZELLBIOLOGISCHE URSACHEN DES PILZKOERPERENTWICKLUNGSDEFEKTS VON
MBIF1
_
E 7 LETALE MUTIERBARKEIT VON CK2SS IN
DROSOPHILA MELCMOGASTER
_
E 8
IN
VIVO-ANALYSE POTENTIELL WICHTIGER AMINOSAEURERESTE DER CK2SS-UNTEREINHEIT_
E 8.1 N-TERMINALE PHOSPHORYLIERUNG
DER
CK2SS-UNTEREINHEIT_
E 8.2 ZINKFINGERVERMITTELTE SS-SS-DIMERISIERUNG UND NACHFOLGENDE
HOLOENZYMBILDUNG^
E 8.3 BEDEUTUNG DER DESTRUCTION-BOX_
E 9 INTERAKTION VON FREIEN CK2-UNTEREINHEITEN MIT KOMPONENTEN DEK
MAP-KINASE-
SIGNALTRANSDUKTIONSWEGS_
E 9.1 INTERAKTIONEN DER FREIEN CK2SS-UNTEREINHEIT
E 9.1.1 CK2SS INHIBIERT MOS
E 9.1.2 CK2SS AKTIVIERT A-RAF
E 9.1.3 CK2SS INTERAGIERT MIT P90"
K_
E 9.2 CK2A INTERAGIERT MIT PP2A_
E 10
MBIF1
UND DER MAPK-SIGNALTRANSDUKTIONSWEG^
_AS.
M
-32
M
M
M
AM
AM
AM
_LQAE
_1M
AM
AM
F
FL
F 2
F 3
F 4
ANHANG
SOUTH EM-BLOT-ANALYSEN
CK2SS-CDNA-KLON-INFORMATIONEN
AMINOSAEUREUEBERSETZUNGEN VON CK2SS-CDNA-SPLICEVARIANTEN_
VERGLEICH DES CALYXPHAENOTYPS IN
MBTF,(P3843/2
UND WTB-WEIBCHEN
JJIA
.UFR
ALL
AM
G LITERATURVERZEICHNIS
ADAMS - CALLAERTS_
CANTON - DUJARDIN
FAUST - HINKE
HINRICHS - KREHAN
KREHAN - LEE
LIN - MELZIG_
MELZIG - PROKOP_
PUTZ - TECHNAU_
TETTAMANTI - ZARS
ZARS - ZHAO
J-
A2A
125
126
A21
AM
AM
AM
AAL
AM
AM
ZUSAMMENFASSUNG
SUMMARY_
DANKSAGUNG^
WIDMUNG
LEBENSLAUF
PUBLIKATIONSLISTE.
ERKLAERUNG_
AM
AM
AM
137
AM
AM.
AAL
IV |
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