Perioperative Suche nach disseminierten Tumorzellen in peripherem Blut und Knochenmark mittels humaner Papillomviren als Tumormarker bei Patientinnen mit Zervixkarzinom:
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2001
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| Beschreibung: | Jena, Univ., Diss., 2002 |
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INHALTSVERZEICHNIS
ABKUERZUNGEN
4
1 EINLEITUNG
5
1.1. DIE ROLLE VON HUMANEN PAPILLOMVIREN BEI DER ENTSTEHUNG DES
ZERVIXKARZINOMS 5
1.2. STADIENEINTEILUNG UND METASTASIERUNGSWEGE DES ZERVIX
KARZINOMS ' 9
1.3. THERAPIE UND PROGNOSE DES ZERVIXKARZINOMS 10
1.4. LIMITIERUNG DER WERTIGKEIT KONVENTIONELLER PROGNOSEFAKTOREN
BEIM ZERVIXKARZINOM 11
1.5. DISSEMINIERTE TUMORZELLEN ALS PROGNOSEFAKTOREN 11
1.6. ZIELE DER UNTERSUCHUNG 17
2 MATERIAL UND METHODEN
18
2.1. PATIENTINNEN 18
2.1.1. ART, ZEITRAUM UND UMFANG DER STUDIE 18
2.1.2. UNTERSUCHUNGSMATERIAL 18
2.2. MATERIAL 21
2.2.1. TECHNISCHE AUSSTATTUNG UND VERBRAUCHSMATERIALIEN 21
2.2.1.1. GERAETE FUER DIE ZELLAUFARBEITUNG 21
2.2.1.2. GERAETE FUER DIE HPV TYPISIERUNG UND AUSWERTUNG DER
PROBEN 21
2.2.1.3. VERBRAUCHSMATERIALIEN 22
2.2.2. MATERIAL FUER DIE ZELLAUFARBEITUNG 22
2.2.3. MATERIAL FUER DIE HPV TYPISIERUNG UND DIE AUSWERTUNG DER
PROBEN 23
2.2.4. HERSTELLUNG VON LOESUNGEN UND PUFFERN 24
2.2.4.1. HERSTELLUNG DER 3%IGEN ESSIGSAEURE 24
2.2.4.2. HERSTELLUNG DES TRIS-PUFFERS 24
2.2.4.3. HERSTELLUNG DES WASCHPUFFERS 24
2.2.4.4. VERDUENNUNG DER ANTI-DIGOXIGENIN-AP LOESUNG 25
1
BIBLIOGRAFISCHE INFORMATIONEN
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INHALTSVERZEICHNIS
2.2.5. PLASMID-DNA 25
2.2.6. ZELLINIEN 26
2.2.7. CONSENSUS-PRIMER (GP) 27
2.2.8. TYPENSPEZIFISCHE PRIMER (TS) 27
2.2.9. OLIGONUKLEOTIDPROBEN 28
2.3. METHODEN 29
2.3.1. VORVERSUCHE ZUR SENSITIVITAET DES VERFAHRENS 29
2.3.2. EXTRAKTION VON MONONUKLEAEREN ZELLEN AUS PERIPHEREM BLUT
UND KNOCHENMARK 30
2.3.3. HPV-TYPISIERUNG DES PRIMAERTUMORS 33
2.3.4. ANSATZ FUER DIE POLYMERASE-KETTENREAKTION (PCR) 34
2.3.4.1. QUALITAETSSTANDARD UND KONTAMINATIONSVERMEIDUNG 34
2.3.4.2. PCR MIT DEN ALLGEMEINEN PRIMERN GP5+ UND GP6+BIO 35
2.3.4.3. PCR MIT TYPENSPEZIFISCHEN PRIMERN (TS) - 37
2.3.5. AUSWERTUNG MITTELS PCR-EIA (ENZYM-IMMUNASSAY) 40
2.4. KONTROLLGRUPPE 44
2.4.1. UMFANG DER KONTROLLSTUDIE 44
2.4.2. AUFARBEITUNG UND AUSWERTUNG DER KONTROLLPROBEN 45
2.5. STATISTIK 45
3 ERGEBNISSE
46
3.1. SENSITIVITAET DES VERFAHRENS 46
3.2. ERGEBNISSE DER HPV-TYPISIERUNG 50
3.3. ERGEBNISSE DER HPV-DETEKTION IM PROBENMATERIAL 52
3.4. KORRELATION ZWISCHEN DER DETEKTION ZIRKULIERENDER TUMORZELLEN
UND TNM-STADIUM ' 53
3.5. KORRELATION ZWISCHEN DER DETEKTION ZIRKULIERENDER TUMORZELLEN
UND HISTOLOGISCHEM DIFFERENZIERUNGSGRAD DES ZERVIXKARZINOMS 56
3.6. ZUSAMMENFASSUNG DER ERGEBNISSE UND STATISTISCHE AUSWERTUNG 57
3.7. ERGEBNISSE DER HPV-DETEKTION IM CHRONOLOGISCHEN ZUSAMMEN
HANG MIT DEM OPERATIONSABLAUF 58
2
INHALTSVERZEICHNIS
3.8. STATISTISCHE AUSWERTUNG DER ERGEBNISSE DER HPV-DETEKTION
PERIOPERATIV 60
3.9. REZIDIVRATE UND UEBERLEBENSZEIT DER ZERVIXKARZINOM-PATIENTINNEN 62
3.10. ERGEBNISSE DER HPV-DETEKTION IN DER KONTROLLGRUPPE 63
4 DISKUSSION
64
4.1. DISKUSSION DER SENSITIVITAET DES VERFAHRENS 64
4.2. ANALYSE DER ERGEBNISSE DER HPV TYPISIERUNG IM PRIMAERTUMOR
UND DEREN KONSEQUENZ FUER DEN WEITEREN VERSUCHSABLAUF 65
4.3. DISKUSSION DER BISHERIGEN ANSAETZE, AUSSAGEKRAEFTIGERE
PROGNOSTISCHE FAKTOREN FUER DIE REZIDIVRATE DES ZERVIXKARZINOMS
ZU FINDEN 68
4.4. DISKUSSION DER ERGEBNISSE DER VORLIEGENDEN STUDIE ~ 71
4.4.1. SPEZIFITAET DER HPV DETEKTION IM PERIPHEREN BLUT UND
KNOCHENMARK BEI PATIENTINNEN MIT ZERVIXKARZINOM 71
4.4.2. NACHWEISBARKEIT VON ZIRKULIERENDEN TUMORZELLEN MITTELS HPV
DNA ALS TUMORMARKER 72
4.4.3. KORRELATION ZWISCHEN TUMORSTADIUM UND HPV DETEKTION 73
4.4.4. ASSOZIATION DES OPERATIONSVERLAUFS MIT DER AUSSCHWEMMUNG
VON TUMORZELLEN 75
4.4.5. ANALYSE DER DISSEMINIERTEN TUMORZELLEN ALS PROGNOSEFAKTOREN 76
4.6. SCHLUSSFOLGERUNG
5 LITERATUR
78
3 |
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