Untersuchungen zur Wirkung des Pasteurella multocida Toxins auf die endotheliale Barrierefunktion in vitro:
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2002
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I
NHALTSVERZEICHNIS
:
1.
E
INLEITUNG
13
1.1
DIE
ERFORSCHUNG
DER
AUSWIRKUNGEN
BAKTERIELLER
TOXINE
AUF
MENSCHLICHE
ZELLEN
13
2.
S
TAND
DER
F
ORSCHUNG
17
2.1
AKTUELLER
WISSENSSTAND
UEBER
DEN
ERREGER
PASTEUREUA
MULTOCIDA
UND SEIN
TOXIN
(PMT)
17
2
2
REGULATION
DER
VASKULAEREN
PERMEABILITAET
19
2.2.1
MECHANISMUS
DER
KONTRAKTILITAET
IN
GLATTEN
MUSKELZELLEN
UND
IM
ENDOTHEL
21
23
DIE
RAS
SUPERFAMILIE
UND IHRE
FUENF
SUBFAMILIEN
24
2.4
DIE
KLEINE
GTPASE
RHO
MIT
IHRER
FAMILIE
UND
DEREN
FUNKTION
26
23
DIE
WIRKUNG
VON
RHO
AUF
DAS
ZYTOSKELETT
26
2.6
REGULATION
DER
RHO
GTPASEN
28
2.6.1
AKTIVIERENDE
UND HEMMENDE
REGULATIONSPROTEINE
VON
RHO
29
2.6.2
KASKADENARTIGE
AKTIVIERUNG
VON
RHO
DURCH
CDC42
UND
RAC
30
2.7
HEMMUNG
UND
AKTIVIERUNG
VON
RHO
DURCH
BAKTERIELLE
TOXINE
32
2.7.1
DIE
HEMMUNG
VON
RHO
DURCH
DIE
C3-TRANSFERASE
AUS
C.
BOTULINUM
UND
DURCH
DIE
TOXINE
A
UND
B
AUS
C.
DIFFICILE
32
2.7.2
DIE
AKTIVIERUNG
VON
RHO
DURCH
DNT,
CNF
UND
PMT
34
3.
Z
IELSETZUNGUND
F
RAGESTELLUNG
4.
M
ATERIAL
41
4.1
CHEMIKALIEN
UND
TECHNISCHE
GERAETE
41
4.2
PUFFERGEMISCHE
DER
EINZELNEN
VERSUCHSREIHEN
43
4.2.1
MESSUNG
DER
ENDOTHELIALEN
PERMEABILITAET
43
4.2.2
HERSTELLUNG
REKOMBINANTER
PROTEINE
44
4.2.3
MIKROINJEKTION
44
4.2.4
MYOSIN-LEICHTKETTEN-PHOSPHORYLIERUNG
44
4.2.5
MYOSINANGEREICHERTE
FRAKTION
45
4.2.6
MESSUNG
DER
MYOSINASSOZIIERTEN
PHOSPHATASEAKTIVITAET
45
5.
M
ETHODEN
47
5.1
ZELLKULTUR
VON
HUVEC
47
5.2
DIE
MESSUNG
DER
EC-PERMEABILITAET
MIT
HILFE
DES
MEERRETTICHPEROXIDASE-ASSAYS
48
5.3
IMMUNFLUORESZENZFAERBUNG
49
5.4
HERSTELLUNG
REKOMBINANTER
PROTEINE
50
5.5
DIE
MIKROINJEKTION
51
5.6
DIE
PHOSPHORYLIERUNG
DER
MYOSIN-LEICHTKETTE
52
5.6.1
DURCHFUEHRUNG
DES
HAMSTOFFGELS
53
5.7
PRAEPARATION
DER
MYOSINANGEREICHERTEN
FRAKTIONEN
54
5.8
MESSUNG
DER
PHOSPHATASEAKTIVITAET
55
37
6.
ERGEBNISSEDERFORSCHUNGSARBEIT
57
6.1
ETABLIERUNG
DES
PERMEABILITAETSASSAYS
57
6.1.1
PMT
ERHOEHT
DIE
ENDOTHELIALE
MONOLAYERPERMEABILITAET
UEBER
EINEN
RHO-ABHAENGIGEN
MECHANISMUS
57
6
2
PASTEURELLA
MULTOCIDA
TOXIN
FUEHRT
ZU
DER
RHO-ABHAENGIGEN
STRESSFASERBILDUNG
60
63
DIE
AKTIN-STRESSFASERBILDUNG
62
6.4
PMT
INAKTIVIERT
DIE
MYOSIN-LEICHTKETTEN-PHOSPHATASE
UND
ERHOEHT
DIE
MYOSIN-LEICHTKETTEN-PHOSPHORYLIERUNG
65
7.
Z
USAMMENFASSUNG
DER
F
ORSCHUNGSERGEBNISSE
69
8.
D
ISKUSSION
71
9.
L
ITERATURVERZEICHNIS
77 |
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