Zell- und Gewebekultur: Einführung in die Grundlagen sowie ausgewählte Methoden und Anwendungen
Gespeichert in:
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| Format: | Buch |
| Sprache: | German |
| Veröffentlicht: |
Heidelberg [u.a.]
Spektrum Akad. Verl.
2002
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| Ausgabe: | 5., überarb. und erw. Aufl. |
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| Beschreibung: | IX, 316 S. Ill., graph. Darst. 24 cm |
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Jjnhalt Vorwort V
1 Räumliche und apparative Voraussetzungen, Sicherheitsvorschriften 1
1.1 Der Reinigungsbereich 1
1.2 Der Vorbereitungs und Verarbeitungsbereich 2
1.3 Der Sterilbereich 3
1.4 Sicherheitsvorschriften und Entsorgung 17
1.5 Generelle Probleme 20
1.6 Literatur 21
2 Kulturgefäße und ihre Behandlung 23
2.1 Züchtung von Zellen auf Glas 23
2.2 Züchtung von Zellen auf Plastikmaterial 24
2.3 Züchtung von Zellen auf anderen Materialien 28
2.4 Spezielle Kulturgefäße 29
2.5 Reinigung und Vorbehandlung von Glaswaren 33
2.6 Vorbehandlung von Kulturgefäßen mit Substanzen zur Modifizierung der
Oberflächeneigenschaften 37
3 Steriltechnik Kontaminationen 41
3.1 Der Sterilbereich 42
3.2 Laborreinigung 43
3.3 Hygiene 43
3.4 Aseptische Arbeitstechnik 43
3.5 Sterilisationsverfahren 48
3.6 Antibiotika 58
3.7 Mycoplasmen 61
3.8 Kreuzkontaminationen 71
3.9 Literatur 72
4 Zellkulturmedien 73
4.1 Herstellung gebrauchsfertiger Medien 73
4.2 Anmerkungen zu einigen Rezepturen 77
4.3 Serumfreie Medien 81
4.4 Zusätze zu Medien 89
4.5 Reinstwasser für Zeil und Gewebekulturen 95
4.6 Literatur 99
5 Routinemethoden zur allgemeinen Handhabung und Subkultivierung von
Zellen 101
5.1 Mediumwechsel 101
5.2 Subkultivierung von Monolayerkulturen 104
5.3 Subkultivierung von Suspensionskulturen 109
5.4 Zellzahlbestimmung 110
5.5 Langzeitlagerung und Kryokonservierung von Zellen 115
5.6 Versand von Zellen 120
5.7 Probleme mit Zellen 120
5.8 Literatur 121
/6 Primärkulturen 122
6.1 Kultivierung von Herzmuskelzellen des Hühnchens 123
6.2 Kultivierung von Herzmuskelzellen aus neonatalen Rattenherzen 125
6.3 Primärkulturen aus frischen Hautproben (Biopsien) menschlichen Ursprungs 126
6.4 Isolierung von Lymphocyten aus Vollblut mittels Dichtegradienten
zentrifugation 127
6.5 Primärkulturen aus Mäusecerebellum (Kleinhirn) 129
6.6 Gewinnung einer Zellkultur aus soliden Humantumoren 131
6.7 Gewinnung von Keratinocyten 133
6.8 Humane adhärente Zelllinien 137
6.9 Literatur 137
¦*7 Organkulturen 140
7.1 Präparation eines Säugerdünndarms als Beispiel für eine Organpräparation in der
Pharmakologie 143
7.2 Präparation eines peripheren Nerven (oberes Halsganglion) zur Messung der
neuronalen Übertragung (Neurotransmission) 145
7.3 Leberschnitte in vitro 147
7.4 Literatur 150
¦ 8 Kultur spezieller Zelltypen 151
8.1 Hybridomzellen 151
8.2 Hepatocyten 161
8.3 Phäochromocytomzellen PC 12 165
8.4 Endothelzellen 166
8.5 Dreidimensionale Zellkultur 171
8.6 Literatur 174
i 9 Die Massenkultur 177
9.1 Monolayer Kulturen für große Zellmengen 178
9.2 Suspensionskultur für große Zellmengen 183
9.3 Literatur 185
10 Zellkulturen aus Geweben von Invertebraten und kaltblütigen
Vertebraten 186
10.1 Invertebraten 186
10.2 Kaltblütige Vertebraten 190
10.3 Literatur 191
11 Pflanzenzellkulturen 193
11.1 Herstellung von Kulturmedien 193
11.2 Kalluskultur aus teilungsfähigem Pflanzengewebe 197
11.3 Pflanzenzellkulturen als Suspensionskulturen 201
11.4 Isolierung von Einzelzellen und Protoplasten aus Pflanzenzellkulturen 202
11.5 Elektrofusion von Pflanzenprotoplasten 204
11.6 Fusion von Protoplasten mittels Polyethylenglycol 204
11.7 Antherenkultur 207
11.8 Embryonenkultur 210
11.9 Einfrieren von Pflanzenzellsuspensionen 211
11.10 Literatur 213
Inhalt J3
12 Spezielle Methoden der Zellbiologie 214
12.1 Versuche zur In vitro Toxizität 214
12.2 Methoden zur In vitro Toxizitätsprüfung 220
12.3 Transfektion 228
12.4 Klonierung 233
12.5 3H Thymidineinbau als Proliferationskontrolle 237
12.6 Inhibition des Zellwachstums (quantitative Neutralrotmethode) 238
12.7 Ermittlung der Anheftungseffizienz („plating efficiency") 239
12.8 Virusvermehrung und Transformation mit Epstein Barr Viren (EBV) 241
12.9 Populationsverdopplungszeit 243
12.10 Zellsynchronisation 244
12.11 Cytometrie 247
12.12 Chromosomenpräparation 254
12.13 Literatur 256
13 Stammzellen 258
13.1 Gewinnung und Kultur hämatopoetischer Stammzellen 258
13.2 Embryonaler Stammzell Test (EST) (Spezies: Maus) 264
13.3 Dezimale geometrische Konzentrationsreihen 276
13.4 Löslichkeit der Testchemikalien 277
13.5 Literatur 278
14 Kleines Zeil und Gewebekulturlexikon 279
14.1 Literatur 293
15 Anhang 294
15.1 Was kann die Ursache von schlechtem Zellwachstum sein? 294
15.2 Berechnungen in der Zellkultur 295
15.3 Nachschlagewerke und Handbücher der Zeil und Gewebekultur 298
15.4 Zeitschriften 300
15.5 Literaturdienst 300
15.6 Institutionen und Firmen, die Zellkulturkurse durchführen 300
15.7 Wissenschaftliche Gesellschaften für Zellkultur 301
15.8 Übersichtswerke zur Beschaffung von Geräten, Labormaterial und
Reagenzien 301
16 Lieferfirmen und Hersteller 302
Index 310 |
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