Erprobung eines neu entwickelten oralen, nicht viralen Gentherapiekonzepts zur Behandlung der Hämophilie B unter Einsatz von transgenen Knock-out-Mäusen:
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2002
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INHALTSVERZEICHNIS
1
EINLEITUNG
.
1
2
SCHRIFTTUM
.
3
2.1
HAEMOSTASE
.
3
2.1.1
PHYSIOLOGIE
DER
HAEMOSTASE
.
3
2.1.1.1
GERINNUNGSVORGANG
.
4
2.1.1.2
FIBRINOLYSE
.
5
2.1.1.3
ENDOGENES
GERINNUNGSSYSTEM
.
5
2.1.2
PATHOPHYSIOLOGIE
DER
HAEMOSTASE
.
7
2.1.2.1
EINTEILUNG
DER
HAEMORRHAGISCHEN
DIATHESEN
.
7
2.1.2.2
PLASMATISCHE
HAEMORRHAGISCHE
DIATHESE
.
7
2.1.3
DER
GERINNUNGSFAKTOR-IX
YYCHRISTMAS
FAKTOR
"
.
9
2.1.3.1
SYNONYME
BEZEICHNUNGEN
.
9
2.1.3.2
BIOCHEMISCHER
ASPEKT
.
9
2.1.4
GERINNUNGSANALYTISCHE
DATEN
.
9
2.1.4.1
MESSUNG
MIT
DEM
KOAGULOMETER
.
10
2.1.4.2
DIAGNOSTIK
VON
PLASMATISCHEN
GERINNUNGSSTOERUNGEN
.
11
2.1.4.3
AKTIVIERTE
PARTIELLE
THROMBOPLASTINZEIT
(APTT)
.
11
2.1.5
HAEMATOKRIT
.
13
2.1.6
HAEMOSTASE
DER
MAUS
.
14
2.2
HAEMOPHILIE
B
-
DER
FAKTOR-IX-MANGEL/DEFEKT
.
16
2.2.1
DEFINITION
DER
HAEMOPHILIE
B
.
16
2.2.2
GESCHICHTLICHER
UEBERBLICK
ZUR
HAEMOPHILIE
.
16
2.2.3
PATHOPHYSIOLOGIE
DER
HAEMOPHILIE
B
.
17
2.2.3.1
KLINISCHE
BILD
DER
HAEMOPHILIE
B
.
17
2.2.3.2 PATHOGENESE
DER
HAEMOPHILIE
B
.
18
2.2.3.3
LABORBEFUND
DER
HAEMOPHILIE
B-ERKRANKUNG
.
19
2.2.4 HUMANMEDIZINISCHER
ASPEKT
.
19
2.2.4.1
THERAPIE
DER
HAEMOPHILIE
B-ERKRANKUNG
.
19
2.2.4.2
PROBLEMATIK
DER
HAEMOPHILIE
B-ERKRANKUNG
UND
THERAPIE
.
20
2.2.4.2.1
SEKUNDAERE
ERKRANKUNGEN
.
20
2.2.4.2.2
HEMMKOERPERHAEMOPHILIE
B
.
20
INHALTSVERZEICHNIS
2.2.5
VETERINAERMEDIZINISCHE
ASPEKTE
DER
KLINIK
UND
THERAPIE
DER
HAEMOPHILIE
B
.
22
2.3.
GENTHERAPIE
.
23
2.3.1
GRUNDLAGEN
.
23
2.3.2
WELCHE
ERWARTUNGEN
WERDEN
AN
DIE
GENTHERAPIE
GESTELLT?
.
24
2.3.2
VEKTOREN
.
25
2.3.2.1
VIRALE
VEKTOREN
.
25
2.3.3.2
NICHT-VIRALE
VEKTOREN
.
27
2.3.3.3
APPLIKATIONSFORMEN
DER
VEKTORSYSTEME
.
28
2.4
TIERMODELLE
FUER
DIE
GENTHERAPIE
DER
HAEMOPHILIE
B
.
30
2.4.1
EINFUEHRUNG
.
30
2.4.2
MAUSMODELL
FUER
HAEMOPHILIE
B
.
31
2.5
PROGESTERON
.
32
2.5.1
BIOCHEMISCHE
EINORDNUNG
DES
PROGESTERONS
.
32
2.5.2
ALLGEMEINE
ASPEKT
DER
HORMONWIRKUNG
.
32
2.5.3
WIRKUNGSMECHANISMUS
VON
STEROIDHORMONEN
.
32
2.5.4
BIOSYNTHESE
UND
CHEMIE
DES
PROGESTERONS
.
33
2.5.5
PHYSIOLOGISCHE
WIRKUNG
DES
PROGESTERONS
.
33
2.5.6
ORAL
VERABREICHTES
PROGESTERON
UND
DESSEN
INTESTINALE
RESORPTION
.
33
2.5.7
SEDATIVE
UND
HYPNOTISCHE
EFFEKTE
VON
ORAL
VERABREICHTEM
PROGESTERON
.
34
2.5.8
PROGESTERON
UND
DESSEN
WIRKUNG
AUF
DIE
HAEMOSTASE.
37
2.6
PROGESTERONREZEPTOR
.
38
2.7
BLUTENTNAHME
BEI
DER MAUS
.
39
2.7.1
SCHWANZVENE
.
40
2.7.2
HERZ
.
40
2.7.3
JUGULARER
VENENWINKEL
.
40
2.7.4
PATHOPHYSIOLOGISCHE
AUSWIRKUNGEN
DER
BLUTENTNAHME
.
41
2.7.4.1
AKUTE
BLUTUNGSANAEMIE.
41
2
7.4.2
CHRONISCHE
BLUTUNGSANAEMIE
.
41
2.7.5
ENTBLUTEN
UND
EUTHANASIE
DER
MAUS
.
41
2.8
ANAESTHESIE
DER
MAUS
.
42
2.8.1
ISOFLURAN
ALS
INHALATIONSANAESTHETIKUM
.
42
INHALTSVERZEICHNIS
2.8.1.1
PHYSIKALISCHE
UND
CHEMISCHE
EIGENSCHAFTEN
VON
ISOFLURAN
.
42
2.8.1.2
BIOTRANSFORMATION
UND
AUSSCHEIDUNG
VON
ISOFLURAN
.
42
2.8.1.3
PHARMAKOLOGISCHE
ASPEKTE
VON
ISOFLURAN
.
42
2.8.2
AUSWIRKUNG
VON
ISOFLURAN
AUF
DIE
HAEMOSTASE.
43
3
EIGENE
UNTERSUCHUNGEN
.
44
3.1
FRAGESTELLUNG
UND
ZIELSETZUNG
.
44
3.2
VERSUCHSTIERE
UND
MATERIAL
.
46
3.2.1
VERSUCHSTIERE
.
46
3.2.2
MATERIAL:
MEDIKAMENTE
UND
INSTRUMENTE
.
49
3.3
VERSUCHSPLAN
.
53
3.3.1
VORVERSUCHE
.
53
3.3.1.1
BESTIMMUNG
DES
GBZ-REFERENZBEREICHES
GESUNDER
C57BL/6
J-MAEUSE
.
54
3.3.1.2
BESTIMMUNG
DER
OPTIMAL
VERTRAEGLICHEN
ORALEN
DOSIS
VON
PROGESTERON
.
54
3.3.2.1
WIRKUNG
VON
ORAL
APPLIZIERTEM
GENMATERIAL
AUF
DIE
BLUTGERINNUNG
GESUNDER
C57BL/6J-MAEUSE
.
56
3.3.2.2
WIRKUNG
VON
ORAL
APPLIZIERTEN
GENMATERIAL
AUF
DIE
BLUTGERINNUNG
HAEMOPHILER
MAEUSE
.
61
3.4
VERSUCHSDURCHFUEHRUNG
.
66
3.4.1
VORBEREITUNG
DER
TIERE
.
66
3.4.2
ANAESTHESIE
DER
VERSUCHSTIERE
.
66
3.4.3
ORALE
APPLIKATION
.
66
3.4.4
INTRAMUSKULAERE
APPLIKATION
.
67
3.4.5
BLUTENTNAHME
.
68
3.4.5.1
SCHWANZARTERIEZ-VENE
.
68
3.4.5.2 BLUTENTNAHME
DURCH
HERZPUNKTION
.
68
3.4.6
MESSUNG
DER
GERINNSELBILDUNGSZEIT
UND
AUSWERTUNG
.
70
3.4.7
PLASMAGEWINNUNG
.
70
3.4.8
ELISA-MESSUNG
UND
AUSWERTUNG
.
71
3.5
STATISTISCHE
AUSWERTUNG
.
74
3.6
ERGEBNISSE
.
75
3.6.1
VORVERSUCHE
.
75
3.6.1.1
ERSTELLUNG
EINES
GBZ-REFERENZBEREICHS
.
75
INHALTSVERZEICHNIS
3.6.1.2
BESTIMMUNG
DER
OPTIMAL
VERTRAEGLICHEN
ORALEN
DOSIS
VON
PROGESTERON
.
76
3
6.1.2.1
BEURTEILUNG
DES
ALLGEMEINBEFINDENS
NACH
ORALER
PROGESTERON
APPLIKATION
.
76
3.6.1.2.2
GBZ-BESTIMMUNG
.
77
3.6.1.2.3
HAEMATOKRIT-MESSUNG
.
79
3.6.2
HAUPTVERSUCHE
.
81
3.6
2.1
WIRKUNG
VON
ORAL
APPLIZIERTEM
GENMATERIAL
AUF
DIE
BLUTGERINNUNG
GESUNDER
C57BL/6J-MAEUSE
.
81
3.6.2.1.1
BEURTEILUNG
DES
ALLGEMEINBEFINDENS
.
81
3.6.2.1.2
GBZ-MESSUNG
DER
VERSUCHSTAGE
1
BIS
9
.
87
3.6.2.1.3
ELISA-MESSUNG
.
103
3.6.2.2
EFFEKT
VON
ORAL
APPLIZIERTEM
GENMATERIAL
AUF
DIE
BLUTGERINNUNG
HAEMOPHILER
MAEUSE
.
111
3.6.2.2.
1
KLINISCHE
BEURTEILUNG
DES
ALLGEMEINBEFINDENS
.
111
3
6.2.2.2
GBZ-MESSUNG
DER
VERSUCHSTAGE
1
BIS
9
.
114
3.6.2.2.3
ELISA-MESSUNG
.
118
4
DISKUSSION
.
125
4.1
VERSUCHSDURCHFUEHRUNG
UND
ERGEBNISSE
DER
VORVERSUCHE
.
125
4.2
VERSUCHSDURCHFUEHRUNG
DES
HAUPTVERSUCHS:
WIRKUNG
VON
ORAL
APPLIZIERTEM
GENMATERIAL
AUF
DIE
BLUTGERINNUNG
GESUNDER
C57BL/6
J-MAEUSE
.
127
4.2.1
BEURTEILUNG
DES
ALLGEMEINBEFINDENS
.
128
4.2.2
ERGEBNISSE
DER
GBZ-MESSUNG
UND
DEREN
STATISTISCHE
AUSWERTUNG
UND
DER
ELISA-MESSUNG.
129
4.3
VERSUCHSDURCHFUHRUNG
DES
HAUPTVERSUCHS:
WIRKUNG
VON
ORAL
APPLIZIERTEM
GENMATERIAL
AUF
DIE
BLUTGERINNUNG
HAEMOPHILER
MAEUSE
.
131
4.3.1
BEWERTUNG
DES
ALLGEMEINBEFINDENS
.
132
4.3.2
ERGEBNISSE
DER
GBZ-MESSUNG
UND
DEREN
STATISTISCHE
AUSWERTUNG
UND
DER
ELISA-MESSUNG.
132
5
ZUSAMMENFASSUNG
.
136
6
SUMMARY
.
137
7
LITERATURVERZEICHNIS
.
138
INHALTSVERZEICHNIS
8
ABKUERZUNGSVERZEICHNIS
.
148
9
ABBILDUNGSVERZEICHNIS
.
150
10
T
ABELLENVERZEICHNIS
.
152
11
DANKSAGUNG
.
155
12
LEBENSLAUF
.
156 |
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