Mehrparametrische Untersuchungen phototoxischer Prozesse von Aminolävulinsäure-induziertem Protoporphyrin IX in vitro:
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2002
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INHALTSVERZEICHNIS
1
EINLEITUNG
1
2
GRUNDLAGEN
5
2.1
DIE
HARNBLASE
.
5
'
2.2
ZELLBIOLOGIE
.
7
2.2.1
DIE
ZELLMEMBRAN
.
8
2.2.2
DAS
MEMBRANPOTENTIAL
.
9
2.2.3
DIE
MEMBRANASYMMETRIE
.
11
2.2.4
MITOCHONDRIEN
.
12
2.2.5
DER
ZELLZYKLUS
.
16
2.2.6
DER
ZELLTOD
.
18
2.3
PHOTODYNAMISCHE
PROZESSE
.
19
2.3.1
PHYSIKALISCHE
GRUNDLAGEN
.
20
2.3.2
-
PHOTODYNAMISCHE
DIAGNOSTIK
UND
THERAPIE
.
26
2.3.3
ALA-INDUZIERTES
PPIX
ALS
SENSIBILISATOR
.
28
2.3.4
PHOTOCHEMISCHE
PROZESSE
.
29
3
MATERIAL
IC.
METHODEN
31
3.1
ZELLKULTUR
&
ALA-INKUBATION
.
31
3.1.1
ZELLINIEN
.
31
3.1.2
KULTIVIERUNG
.
31
II
INHALTSVERZEICHNIS
3.1.3
ALA-INKUBATION
UND
BESTRAHLUNG
.
32
3.2
ZELLULAERE
SENSIBILISATOR-AKKUMULATION
.
33
3.3
SENSIBILISATOR-LOKALISATION
.
34
3.4
ANALYSE
PDT-INDUZIERTER
ZELLSCHAEDEN
.
34
3.4.1
ZELLVOLUMENANALYSE
.
35
3.4.2
MEMBRANPOTENTIAL
.
35
3.4.3
MEMBRANINTEGRITAET
.
37
3.4.4
MITOCHONDRIALE
AKTIVITAET
.
37
3.4.5
MEMBRANASYMMETRIE
.
39
3.4.6
ZELLMORPHOLOGIE
.
40
3.4.7
ZELLZYKLUSANALYSE
.
41
3.4.8
CASPASE-3
AKTIVITAET
.
41
3.4.9
VALINOMYCIN
.
42
3.4.10
STAUROSPORIN
.
42
3.5
PPIX-POSITIVE
ZELLEN
IN
BLASENSPUELUNGEN
.
43
3.5.1
AUFBEREITUNG
DER
SPUELUNGEN
.
43
3.5.2
DURCHFLUSSZYTOMETRISCHE
ANALYSE
.
43
3.5.3
ZELLSORTIERUNG
UND
OBJEKTTRAEGERPRAEPARATION
.
44
3.5.4
HAEMATOXYLIN-EOSIN-FAERBUNG
.
44
4
ERGEBNISSE
47
4.1
PPIX-AKKUMULATION
.
48
4.2
PPIX-LOKALISATION
.
49
4.3
CHARAKTERISIERUNG
PHOTOTOXISCHER
PROZESSE
.
50
4.3.1
ZELLVOLUMENANALYSE
.
52
4.3.2
MEMBRANPOTENTIALBESTIMMUNG
.
54
4.3.3
MEMBRANINTEGRITAET
.
56
4.3.4
MEMBRANASYMMETRIE
.
58
INHALTSVERZEICHNIS
III
4.3.5
MITOCHONDRIALE
AKTIVITAET
.
59
4.3.6
ZELLMORPHOLOGIE
.
63
4.3.7
CASPASE
3
.
67
4.4
PHOTOTOXISCHE
PROZESSE
BEI
LD50
.
69
4.4.1
MEMBRANINTEGRITAET
.
69
4.4.2
MITOCHONDRIALE
AKTIVITAET
.
70
4.4.3
ZELLZYKLUS
.
70
4.4.4
PHOTODYNAMISCHE
DIAGNOSTIK
.
72
5
DISKUSSION
81
5.1
METHODEN
UND
ERGEBNISSE
.
81
5.1.1
PPIX-AKKUMULATION
.
81
5.1.2
PPIX-LOKALISATION
.
83
5.1.3
PDT
MIT
UNTERSCHIEDLICHEN
WELLENLAENGENBEREICHEN
.
84
5.1.4
ZELLMEMBRAN
.
86
5.1.5
MITOCHONDRIEN
UND
PDT-INDUZIERTE
APOPTOSE
.
88
5.1.6
SUBLETALE
PHOTOTOXISCHE
PROZESSE
.
91
5.1.7
DETEKTION
PPIX-HALTIGER
ZELLEN
IN
BLASENSPUELUNGEN
.
95
5.2
WEITERE
OPTIMIERUNGSMOEGLICHKEITEN
.
96
5.2.1
FRAKTIONIERTE
BESTRAHLUNG
.
99
6
ZUSAMMENFASSUNG
103 |
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