Interaktionen mitochondrialer Hitzeschockproteine der Hsp70-Familie mit ihren Cochaperonen:
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| Format: | Buch |
| Sprache: | German |
| Veröffentlicht: |
2001
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1
INHALTSVERZEICHNIS
1
ABKUERZUNGSVERZEICHNIS
3
2
ZUSAMMENFASSUNG
5
3
EINLEITUNG
6
3.1
DAS
DNAK/DNAJ/GRPE
SYSTEM
IN
ESCHERICHIA
COLI
7
3.1.1
DNAK
8
3.1.2
DNAJ
9
3.1.3
GRPE
10
3.1.4
ZYKLUS
DES
DNAK/DNAJ/GRPE-SYSTEMS
10
3.2
HOMOLOGE
PROTEINE
DES
DNAK/DNAJ/GRPE-SYSTEMS
IN
SACCHAROMYCES
CEREVISIAE
12
3.2.1
AUFBAU
DER
EUKARYONTISCHEN
ZELLE
AM
BEISPIEL
DER
HEFE
S.
CEREVISIAE
13
3.2.2
HSP70-CHAPERONE
UND
COCHAPERONE
DER
VERSCHIEDENEN
KOMPARTIMENTE
15
3.2.3
DIE
SPEZIELLE
ROLLE
DES
SSC1
BEIM
MITOCHONDRIALEN
PROTEINIMPORT
19
3.2.4
SSQ1
UND
DER
EISENSTOFFWECHSEL
DES
MITOCHONDRIUMS
23
4
ZIELSETZUNG
DER
ARBEIT
25
5
MATERIAL
UND
METHODEN
26
5.1
CHEMIKALIEN
UND
MATERIALIEN
26
5.2
GERAETE
28
5.3
PROTEINCHEMISCHE
UND
MOLEKULARBIOLOGISCHE
METHODEN
28
5.3.1
ELEKTROPHORETISCHE
AUFTRENNUNG
VON
PROTEINEN
28
5.3.2
WESTERN
BLOT
30
5.3.3
EXPRESSION
VON
HEXAHISTIDIN-MARKIERTEN
PROTEINEN
IN
E.
COLI
31
5.3.4
REINIGUNG
VON
HEXAHISTIDIN-MARKIERTEN,
EXPRIMIERTEN
PROTEINEN
UEBER
NICKEL-
NTA
AFFINITAETSCHROMATOGRAPHIE
31
5.3.5
KOPPLUNG
VON
PROTEIN
AN
CNBR-AKTIVIERTE
SEPHAROSE
32
5.3.6
BESTIMMUNG
VON
PROTEINKONZENTRATIONEN
32
5.4
IMMUNOLOGISCHE
METHODEN
33
5.4.1
AFFINITAETSREINIGUNG
VON
ANTIKOERPERN
33
5.4.2 KOVALENTE
KOPPLUNG
VON
ANTIKOERPERN
AN
PROTEIN
A-SEPHAROSE
33
5.4.3
COIMMUNFAELLUNG
34
2
5.5
ZELLBIOLOGISCHE
METHODEN
35
5.5.1
ISOLIERUNG
VON
MITOCHONDRIEN
AUS
S.
CEREVISIAE
35
6
ERGEBNISSE
37
6.1
AFFINITAETSREINIGUNG
DER
ANTIKOERPER
AUS
SEREN
GEGEN
SSQ1
,
SSC1
,
TIM44
UND
MGE1
37
6.2
ETABLIERUNG
DER
SEMIQUANTITATIVEN
COIMMUNPRAEZIPITATIONEN
42
6.3
VERGLEICHENDE
ANALYSE
DER
PROTEINKOMPLEXE
VON
SSQ1
MIT
SSC1
43
6.3.1
INTERAKTIONEN
DER
HSP70
MIT
TIM44
UND
MDJ
1
44
6.3.2
INTERAKTIONEN
DER
HSP70
MIT
DEM
NUKLEOTIDAUSTAUSCHFAKTOR
MGE1
46
6.3.3
KOMPLEX
MIT
MGE1
UNTER
NATIVEN
BEDINGUNGEN
49
6.3.4
EIGENSCHAFTEN
DER
WECHSELWIRKUNGEN
MIT
MGE1
51
7
DISKUSSION
54
7.1
OPTIMIERUNG
DER
COIMMUNFAELLUNGEN
54
7.2
INTERAKTION
ZWISCHEN
HSP70-CHAPERONEN
UND
J-COCHAPERONEN
55
7.3
INTERAKTIONEN
MIT
DEM
NUKLEOTIDAUSTAUSCHFAKTOR
MGE1
58
7.4
MENGENVERHAELTNISSE
59
7.5
STRUKTURMODELLE
DER
INTERAKTION
ZWISCHEN
HSP70-CHAPERONEN
UND
DEM
NUKLEOTIDAUSTAUSCHFAKTOR
61
7.6
MODELL
DER
AUFGABENBEREICHE
DER
MITOCHONDRIALEN
HSP70
65
7.7
ENTWICKLUNGSGESCHICHTLICHE
EINORDNUNG
67
8
LITERATUR
69
9
DANK
80 |
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