Einfluss des kontinuierlichen und monochromatisch fraktionierten UV-B-Spektrums auf die Synthese von Matrix-Metalloproteinasen (MMP-1,MMP-3) und ihren Inhibitor TIMP-1:
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2001
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INHALTSVERZEICHNIS
1
ABKUERZUNGEN
4
1.
EINLEITUNG
5
1.1
ULTRAVIOLETTE
STRAHLEN
5
1.1.1
CHARAKTERISTIK
UND
EINTEILUNG
DER
UV-STRAHLEN
5
1.1.2
EINFLUSS
DER
UV-STRAHLEN
AUF
BIOLOGISCHE
SYSTEME
7
1.1.3
WIRKUNG
DER
UV-B-STRAHLUNG
AUF
DAS
IMMUNSYSTEM
9
1.1.4
WIRKUNG
DER
UV-STRAHLUNG
AUF
DAS
BINDEGEWEBE
DER
HAUT
12
1.1.5
DIE
OZONSCHICHT
DER
STRATOSPHAERE
UND
DEREN
EINFLUSS
AUF
16
BIOLOGISCHE
SYSTEME
1.2.
STRUKTUR
UND
FUNKTION
DER
HAUT
20
1.2.1
AUFBAU
DES
HAUTORGANS
20
1.2.2
FUNKTION
UND
REGULATION
DER
MATRIX-METALLOPROTEINASEN
31
1.2.3
REGULATION
DES
KOLLAGENSTOFFWECHSELS
36
1.3
FRAGESTELLUNGEN
41
2.
MATERIAL
UND
METHODEN
43
2.1.
CHEMIKALIEN
UND
RADIOCHEMIKALIEN
43
2.1.1
ZELLKULTUR
43
2.1.2
3
H-THYMIDIN-EINBAU
IN
DNA
43
2.1.3
35
S-METHIONIN-EINBAU
IN
PROTEINE
44
2.1.4
PLASMIDISOLIERUNG
44
2.1.5
RNA-ISOLIERUNG
UND
NORTHERN-BLOT-ANALYSE
45
2.1.6
IMMUNPRAEZIPITATION
UND
SDS-GELELEKTROPHORESE
47
2.2
GERAETE
48
2.3.
METHODEN
50
2.3.1.
ZELLKULTUR
50
2.3.1.1
PRAEPARATION
VON
HAUTBIOPSIEN
ZUR
GEWINNUNG
50
VON
HUMANEN,
DERMALEN
FIBROBLASTEN
2.3.1.2
KULTIVIERUNGSBEDINGUNGEN
50
2.3.2
UV-B-BESTRAHLUNG
VON
FIBROBLASTENKULTUREN
51
2.3.3.
BESTIMMUNG
DER
ZELLVITALITAET
52
2.3.3.1
3
H-THYMIDINEINBAU
"
52
2.3.3.2
BESTIMMUNG
DER
ZELLVITALITAET
52
2.3.3.3
EINBAU
VON
35
S-METHIONIN
BEI
DER
SYNTHESE
VON
PROTEINEN
52
2.3.4
PLASMIDISOLIERUNG
53
2.3.5
RNA-ANALYSE
54
2.3.5.1
PRAEPARATION
VON
RNA
AUS
ZELLKULTUREN
54
2.3.5.2
GELELEKTROPHORETISCHE
AUFTRENNUNG
VON
MRNA
UND
55
NORTHERN-BLOT-ANALYSE
2.3.5.3
HYBRIDISIERUNG
VON
NITROZELLULOSEFILTERN
MIT
32
P-TRIPHOSPHAT
56
MARKIERTEN
CDNA
PROBEN
UND
RESTITUTION
DER
FILTER
2.3.6.
METHODIK
ZUM
NACHWEIS
VON
MMP-1
,
MMP-3
UND
TIMP-1
57
IN
ZELLYSATEN
2.3.6.1
MARKIERUNG
VON
ZELLEN
MITTELS
35
S-METHIONIN
57
2.3.6.2
IMMUNPRAEZIPITATION
58
2.3.6.3
SDS-GELELEKTROPHORESE
UND
AUTORADIOGRAPHISCHE
58
DARSTELLUNG
AUFGETRENNTER
PRAEZIPITATE
2.3.7
DENSITOMETRISCHE
AUSWERTUNG
DER
AUTORADIOGRAPHIEN
59
3.
ERGEBNISSE
60
3.1.
VITALITAETSPARAMETER
60
3.1.1
3
H-THYMIDINEINBAU
IN
DIE
DNA
HUMANER,
DERMALER
60
FIBROBLASTEN
NACH
UV-B-BESTRAHLUNG
MIT
MONOCHROMATISCH
FRAKTIONIERTEN
WELLENLAENGEN
3.1.2
ZELLMORPHOLOGIE
UND
BESTIMMUNG
DER
ZELLZAHLEN
NACH
62
UV-B
BESTRAHLUNG
3.1.3
GESAMTPROTEINSYNTHESE
HUMANER,
DERMALER
FIBROBLASTEN
63
NACH
UV-B-BESTRAHLUNG
3.2
EINFLUSS
DES
UV-B-GESAMTSPEKTRUMS
AUF
DEN
64
KOLLAGENASE
(MMP-1),
STROMELYSIN
(MMP-3)
UND
TIMP-1-MRNA-GEHALT
HUMANER,
DERMALER
FIBROBLASTEN
2
3.3
EINFLUSS
VON
MONOCHROMATISCH
FRAKTIONIERTEN
UV-B
67
SPEKTREN
AUF
DEN
KOLLAGENASE
(MMP-1),
STROMELYSIN
(MMP-3)
UND
TIMP-1-MRNA-GEHALT
HUMANER,
DERMALER
FIBROBLASTEN
3.4
IMMUNPRAEZIPITATION
VON
KOLLAGENASE
(MMP-1),
79
STROMELYSIN
(MMP-3)
UND
TIMP-1
AUS
ZELLYSATEN
HUMANER,
DERMALER
FIBROBLASTEN
NACH
BESTRAHLUNG
MIT
MONOCHROMATISCH
FRAKTIONIERTEN
UV-B-SPEKTREN
4.
DISKUSSION
72
4.1
REGULATION
VON
MMP-1,
MMP-3
UND
TIMP-1
DURCH
UV-B
72
SPEKTREN
UND
DEREN
MOLEKULARE
MECHANISMEN
4.2
EINFLUSS
DER
UV-B-INDUZIERTEN
MMP-1
-
UND
MMP-3
78
SYNTHESE
AUF
DAS
DERMALE
BINDEGEWEBE
-
MOEGLICHE
KLINISCHE
BEDEUTUNG
5.
ZUSAMMENFASSUNG
82
6.
LITERATURVERZEICHNIS
84
7.
VORABVEROEFFENTLICHUNG
110
LEBENSLAUF
111
3 |
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