Einfluß von exogenem GnRH auf das Sexualverhalten und spermatologische Parameter bei Warmblutpferden ausserhalb der Zuchtsaison:
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| adam_text | Titel: Einfluss von exogenem GnRH auf das Sexualverhalten und spermatologische Parameter bei Warmblutpferde
Autor: Weinrich, Sabine
Jahr: 2001
Inhaltsverzeichnis
1. Einleitung.....................................................................................................9
2. Literaturübersicht.......................................................................................10
2.1. GnRH............................................................................................................10
2.1.1. Struktur des GnRH........................................................................................10
2.1.2. Synthese und Einflussfaktoren......................................................................10
2.1.3. Hypothalamus - Hypophysen - System.........................................................11
2.1.4. Neuroendokriner Regelkreis..........................................................................12
2.1.5. GnRH - Rezeptoren und down regulation.....................................................14
2.1.6. Funktion und Saisonalität der Gonadotropine LH und FSH.........................15
2.1.7. Einsatz von GnRH -Analoga bei Hengsten..................................................17
2.1.8. Einsatz von GnRH -Analoga bei anderen Tierarten.....................................21
2.1.9. GnRH - Analoga zur Therapie in der Humanmedizin..................................21
2.2. Kryokonservierung von Hengstspermien......................................................22
2.2.1. Methodik.......................................................................................................22
2.2.2. Untersuchungsmethoden zur Beurteilung von Hengstsperma......................24
2.2.2.1. Motilität.........................................................................................................24
2.2.2.2. Morphologie..................................................................................................25
3. Eigene Untersuchungen..............................................................................30
3.1. Material und Methode...................................................................................30
3.1.1. Spenderhengste..............................................................................................30
3.1.2. Versuchskonzeption......................................................................................32
3.1.3. Ermittlung der Parameter des Sexualverhaltens............................................32
3.1.4. Gewinnung der Ejakulate..............................................................................33
3.1.5. Untersuchung der Ejakulate..........................................................................33
3.1.5.1. Volumen........................................................................................................33
3.1.5.2. Aussehen.......................................................................................................33
3.1.5.3. Dichte und Gesamtspermienzahl...................................................................33
3.1.5.4. Motilität.........................................................................................................34
3.1.6. Aufbereitung der Ejakulate zur Kryokonservierung.....................................34
3.1.7. Konfektionierung des Samens.......................................................................34
3.1.8. Kryokonservierung........................................................................................35
3.1.9. Auftauen des Samens....................................................................................35
3.1.10. Untersuchungsmethoden der aufbereiteten Ejakulate...................................35
3.1.10.1. Motilitätsmessung.........................................................................................36
3.1.10.2. Eosin - Nigrosin Färbung..............................................................................36
3.1.10.3. Kombinierte CFDA-PI Färbung..................................................................37
3.1.10.4. Chlortetracyclin - Färbung (CTC - Färbung)..............................................40
3.1.10.5. Hypoosmotischer Schwelllungstest ( HOS )................................................41
3.2. Einsatz der Untersuchungsmethoden............................................................42
3.3 Statistische Methoden zur Auswertung der Ergebnisse................................43
4. Ergebnisse....................................................................................................45
4.1. Bewertung der Untersuchungsverfahren.......................................................45
4.1.1. Korrelationen zwischen den Ergebnissen der eingesetzten Färbeverfahren .45
4.1.2. Korrelationen zwischen Motüität und Morphologie ( Färbeverfahren ).......46
4.1.3. Korrelationen zwischen HOS und Motilität..................................................47
4.1.4. Korrelationen zwischen HOS und Morphologie...........................................48
4.1.5. Korrelativer Vergleich der Sameneigenschaften vor und nach
der Kryokonservierung.................................................................................49
4.2. Einfluss von exogenem GnRH auf die native Samenqualität und auf das
Sexualverhalten vor, während und nach der Behandlung mit GnRH, bzw.
Placebo..........................................................................................................51
4.2.1. Parameter des Sexualverhaltens....................................................................52
4.2.2. Eigenschaften des nativen Samens................................................................55
4.2.2.1 Volumen, Dichte und Gesamtspermienzahl..................................................55
4.2.2.2 Motilität.........................................................................................................57
4.2.2.3. Morphologie..................................................................................................59
4.2.2.3.1. Ergebnisse der Eosin - Nigrosin - Färbung...................................................59
4.2.2.3.2. Ergebnisse des hypoosmotischen Schwellungstests ( HOS )........................64
4.3. Eigenschaften des zentrifugierten und resuspendierten Samen vor,
während und nach der Behandlung mit GnRH, bzw Placebo.......................65
4.3.1. Motilität.........................................................................................................65
4.3.2. Morphologie..................................................................................................66
4.3.2.1. Ergebnisse der CTC - Färbung......................................................................66
4.3.2.2. Ergebnisse der CFDA - PI - Färbung............................................................68
4.4. Eigenschaften des aufgetauten Samen vor, während und nach
der Behandlung mit GnRH, bzw Placebo....................................................70
4.4.1. Motilität der Halteproben..............................................................................70
4.4.2. Morphologie..................................................................................................73
4.4.2.1. Ergebnisse der CTC - Färbung......................................................................73
4.4.2.2. Ergebnisse der CFDA - PI - Färbung............................................................76
4.4.2.3. Ergebnisse der Eosin - Nigrosin- Färbung...................................................78
4.4.2.4. Ergebnisse des hypoosmotischen Schweliungstests (HOS )........................83
4.5. Ermittlung der Anteile an Gefrierschäden.....................................................83
4.5.1. Motilität.........................................................................................................84
4.5.2. Morphologie..................................................................................................85
5. Diskussion....................................................................................................92
5.1. Spermatologische Untersuchungsverfahren im Vergleich............................92
5.2. Sexualverhalten der Hengste über den gesamten Versuchszeitraum............94
5.3. Erfolg der GnRH Behandlung auf die quantitative
Ejakulatzusammensetzung ( Volumen, Dichte und Gesamtspermienzahl ) .96
5.4. Einfluss der GnRH Behandlung auf die qualitativen Samenparameter
( Motilität und Morphologie ) des nativen und zentrifugierten Samens.......97
5.5. Einfluss der GnRH Behandlung auf die Motilität und Morphologie
aufgetauter Samenzellen im Behandlungszeitraum....................................100
5.6. Einfluss der GnRH Behandlung auf Gefrierschäden...................................102
5.7. Ausblick......................................................................................................105
6. Zusammenfassung.....................................................................................107
7. Summary....................................................................................................110
8. Literaturverzeichnis..................................................................................112
9. Anhang ......................................................................................................131
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