Isolierung und Charakterisierung fetaler Erythrozyten aus Nabelschnurblut und Schwangerenblut:
Gespeichert in:
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| Format: | Buch |
| Sprache: | German |
| Veröffentlicht: |
2001
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INHALTSVERZEICHNIS
A. EINLEITUNG
1. ISOLIERUNG FETALER ZELLEN AUS MUETTERLICHEM BLUT - GESCHICHTLICHES UND
STAND DER WISSENSCHAFT. 3
2. DER UPA-REZEPTOR (CD 87).
1 ]
B. ZIELSETZUNG
_
. 14
C. MATERIAL UND METHODEN
_
1. BLUTPROBENGEWINNUNG.
15
2. ZELLISOLIERUNG.
15
2.1.
DICHTEZENTRIFUZATION. 15
2.1.1.
EINFACHGRADIENT. 15
2.1.2.
DOPPELGRADIENT. 18
2.1.3.
DREIFACHGRADIENT. 20
2.2.
MAZNETSEOARATION (MACS). 22
2.2.1.
PRINZIP. 23
2.2.2.
ALLGEMEINE VERSUCHSSCHRITTE. 26
A) VORBEREITUNG DER TRENNSAEULEN
B) REINIGUNG UND TROCKNUNG DER SAEULEN
2.2.3.
MAGNETSEPARATION FETALER ERYTHROZYTEN. 27
A) POSITIVSELEKTION
B) NEGATIVSELEKTION
C) VARIATIONS- UND KOMBINATIONSMOEGLICHKEITEN
3. WEITERVERARBEITUNG DER ISOLIERTEN ZELLEN.
33
3.1.
DURCHFLUSSZVTOFLUOROMETRIE (FACS). 33
3.1.1.
PRINZIP. ^3
3.1.2.
EINFACHFAERBUNGEN. 35
A) ALLGEMEIN
B) SAEUREBEHANDLUNG DER ZELLEN
C) BLOCKIERUNGSVERSUCHE
BIBLIOGRAFISCHE INFORMATIONEN
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3.1.3.
DOPPELFAERBUNGEN. 39
3.1.4.
DNA-FAERBUNG. 40
3.2.
ZELL FIXIER UNS. 41
3.2.1.
CVTOSPINS. 41
3.2.2.
PARAFORMALDEHYD (PFA). 42
3.2.3.
ETHANOL. 43
3.3.
ZELLFAERBUNSEN. 43
3.3.1.
PANOPTISCHE FAERBUNG NACH PAPPENHEIM. 43
3.3.2.
VEREINFACHTE HE-FAERBUNG. 44
3.3.3.
SAEUREELUTION NACH KLEIHAUER-BETHKE. 44
3.4.
MOLEKULARBIOLOSISCHER ZELLAUFSCHLUSS. 46
3.4.1.
POLVMERASE-KETTEN-REAKTION (PCR). 46
A) ISOLIERUNG DER DNA
B) PCR-AMPLIFIKATION
D. ERGEBNISSE
_
1. MODELLVERSUCH ZUR ISOLIERUNG FETALER KERNHALTIGER ROTER BLUTZELLEN
AUS
NABELSCHNURBLUT. 49
2. ISOLIERUNG FETALER ERYTHROZYTENVORLAEUFERZELLEN AUS
SCHWANGERENBLUT. 85
3. DURCHFLUSSZYTOMETRISCHE VERSUCHE ZUM NACHWEIS VON UPA-REZEPTOREN
(CD 87) AUF FETALEN ERYTHROZYTEN. 90
E. DISKUSSION
_
. 113
F. ZUSAMMENFASSUNG
_
. 123
G. LITERATURVERZEICHNIS
_
. 124
H. ABKUERZUNGEN
_
. 145
I. DANKSAGUNG
_
147 |
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