Untersuchungen zum Einfluß von Penicillin G auf den Kollagenstoffwechsel dermaler Fibroblasten: Relevanz für die Therapie der systemischen progressiven Sklerodermie
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2001
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ABKUERZUNGSVERZEICHNIS
1
INHALTSVERZEICHNIS
ABKUERZUNGSVERZEICHNIS.4
1 EINLEITUNG.5
1.1 KOLLAGEN ALS EINER DER WICHTIGSTEN BESTANDTEILE DES BINDEGEWEBES.5
1.1.1 BINDEGEWEBE.5
1.1.2 KOLLAGEN.6
1.1.3 DIE MOLEKULARE CHARAKTERISTIK DES KOLLAGENS.7
1.1.4 KOLLAGENTYPEN UND IHRE STRUKTUR.7
1.1.5 SYNTHESE DES KOLLAGENS. 12
1.1.6 DEGRADATION DES KOLLAGENS.18
1.1.7 REGULATION DES KOLLAGENMETABOLISMUS.21
1.1.7.1 TRANSKRIPTIONALE UND TRANSLATIONALE KONTROLLE DER
KOLLAGENSYNTHESE.22
1.1.7.2 INTERZELLULAERE DEGRADATION DES PROKOLLAGENS.22
1.1.7.3 POSTTRANSLATIONALE REGULATION DER INTRAZELLULAEREN SYNTHESE.22
1.1.7.4 EXTRAZELLULAERE REGULATION DER KOLLAGENSYNTHESE.23
1.1.7.5 REGULATION DER KOLLAGENDEGRADATION.23
1.1.7.6 F EEDBACK-MECHANI SMEN.23
1.1.7.7 REGULATION UEBER DIE MEDIATOREN.24
1.1.7.8 ANDERE STOFFE.26
1.2 SKLERODERMIE.27
1.2.1 DEFINITION DER SKLERODERMIE.27
1.2.2 EPIDEMIOLOGIE. 27
1.2.3 EINTEILUNG DER SKLERODERMIE.28
1.2.4 KLINIK DER SKLERODERMIE.30
1.2.5 HISTOLOGIE.33
1.2.6 AETIOLOGIE.33
1.2.7 THERAPIE.39
2 FRAGESTELLUNG,
43
BIBLIOGRAFISCHE INFORMATIONEN
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ABKUERZUNGSVERZEICHNIS
2
3 MATERIALIEN UND METHODEN.44
3.1 MATERIALIEN.44
3.1.1 CHEMIKALIEN.44
3.1.2 MEDIEN, PUFFER UND LOESUNGEN (ZELLBIOLOGIE).44
3.1.3 PUFFER UND LOESUNGEN (MOLEKULARBIOLOGIE).45
3.1.4 KITS. 47
3.1.5 ANTIKOERPER.47
3.1.6 SONDEN FUER NORTHERN BLOT.48
3.1.7 FILME UND FOTOGRAFISCHES ZUBEHOER.48
3.2 METHODEN.48
3.2.1 KULTIVIERUNG VON HUMANEN DERMALEN FIBROBLASTEN.48
3.2.1.1 PRIMAERKULTUR. 48
3.2.1.2 PASSAGIEREN DER FIBROBLASTEN.49
3.2.2 VERSUCHE MIT FIBROBLASTEN AUS MONOLAYER-KULTUR.49
3.2.3 KOLLAGENGELE.49
3.2.4 PRAEPARATION VON GRNA.51
3.2.4.1 PRAEPARATION VON GRNA AUS DEN KOLLAGENGELEN MIT ULTRASPEC (NACH
CHOMCZYNSKI).51
3.2.4.2 PRAEPARATION VON MRNA AUS MONOLAYER-ZELLKULTUREN.51
3.2.5 NORTHEM-BLOT.52
3.2.5.1 FORMALDEHYDGEL-ELEKTROPHORESE.52
3.2.5.2 RNA-TRANSFER.52
3.2.5.3 NICHTRADIOAKTIVE HYBRIDISIERUNG DER RNA (MODIFIZIERT NACH
BOEHRINGER
MANNHEIM).53
3.2.6 FIBROBLASTENPROLIFERATION.'.54
3.2.7 KOLLAGEN TYP I PROTEIN-SYNTHESE (PROLIN-EINBAU).55
4 ERGEBNISSE.56
4.1 EINFLUSS VON PENICILLIN G AUF DIE PROLIFERATION DERMALER FIBROBLASTEN
VON GESUNDER
UND SKLERODERMIEKRANKER HAUT.56
4.2 EINFLUSS VON PENICILLIN G AUF DIE KONTRAKTION VON KOLLAGENGELEN
59
ABKUERZUNGSVERZEICHNIS
3
4.3 EINFLUSS VON PENICILLIN AUF DIE STEADY-STATE MRNA-KONZENTRATIONEN VON
KOLLAGEN
I, PROLINHYDROXYLASE, LYSYLHYDROXYLASE, KOLLAGENASE (MMP-1) UND TIMP.63
4.3.1 EXPRESSION DER MRNA IN GESUNDEN FIBROBLASTEN.66
4.3.2 EXPRESSION DER MRNA IN DEN SKLERODERMIEFIBROBLASTEN.70
4.3.3 EXPRESSION DER MRNA IN KOLLAGENGELEN.71
4.4 EINFLUSS VON PENICILLIN AUF DIE PRODUKTION DES KOLLAGENPROTEINS.73
5 DISKUSSION.74
5.1 EINFLUSS VON PENICILIN G AUF FIBROBLASTEN.74
5.2 PROLIFERATION.78
5.3 KOLLAGENGELE.777.79
5.4 EXPRESSION DER MRNA IN DEN MONOLAYERVERSUCHEN.83
5.5 VERGLEICH PENICILLIN UND PENICILLAMIN.88
6 ZUSAMMENFASSUNG.91
7 LITERATUR.93 |
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