Untersuchungen zu Interaktionen von Peritonealmakrophagen und peritonealen Fibroblasten bei der Peritonealdialyse:
Gespeichert in:
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Format: | Buch |
Sprache: | German |
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2001
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Beschreibung: | Berlin, Humboldt-Univ., Diss., 2001 |
Beschreibung: | 107 S. Ill., graph. Darst. : 30 cm |
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1 INHALTSVERZEICHNIS
1 INHALTSVERZEICHNIS.3
1.1 ABBILDUNGSVERZEICHNIS.6
2 VERZEICHNIS DER VERWENDETEN ABKUERZUNGEN.8
3 EINFUEHRUNG.10
3.1 ULTRASTRUKTUR UND ZELLPOPULATION DER PERITONEALMEMBRAN.13
3.2 HISTOLOGISCHE VERAENDERUNGEN IM VERLAUF DER CAPD-BEHANDLUNG.14
3.3 KLINIK DER CAPD-ASSOZIIERTEN PERITONITIS.16
3.4 WIRKUNG DES DIALYSATS AUF DIE PERITONEALMEMBRAN.16
3.5 MECHANISMEN DER PERITONEALEN INFEKTABWEHR.18
3.6 UNTERSUCHUNGSZIELE.21
4 ZELLKULTURTECHNIKEN.23
4.1 MATERIALIEN.23
4.2 PRAEPARATION UND VERARBEITUNG DER PRIMAERKULTUREN HUMANER PERITONEALER
FIBROBLASTEN (HPFB).23
4.2.1 PASSAGE DER ZELLKULTUREN.24
4.2.2 ETABLIERUNG VON RUHENDEN FIBROBLASTENKULTUREN.25
4.2.3 CHARAKTERISIERUNG DER ZELLEN.26
4.3 KULTIVIERUNG DER PERITONEALMAKROPHAGEN.27
4.3.1 HERSTELLUNG VON PERITONEALMAKROPHAGEN-KONDITIONIERTEM MEDIUM
(PMO-CM).28
4.3.2 HERSTELLUNG VON PERITONEALMAKROPHAGEN-KONDITIONIERTEM MEDIUM
NACH STIMULATION MIT STAPHYLOCOCCUS EPIDERMIDIS (PMO-S.EPI-CM). .28
4.4 AUFBEREITUNG DES DIALYSEEFFLUATS.29
4.4.1 AUFBEREITUNG DES INFEKTIOESEN DIALYSEEFFLUATS.29
4.5 INKUBATIONSEXPERIMENTE MIT HUMANEN PERITONEALEN FIBROBLASTEN.30
4.5.1 TABELLARISCHE UEBERSICHT UEBER DIE DURCHGEFUEHRTEN EXPERIMENTE.32
4.6 GESAMTPROTEINBESTIMMUNG IM ZELLYSAT.33
4.7 ZYTOKINANALYSE MITTELS ENZYMIMMUNASSAY.33
3
BIBLIOGRAFISCHE INFORMATIONEN
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4.7.1 ENZYMIMMUNASSAY FUER LNTERLEUKIN-6.33
4.8 ANALYSE DER MRNA-EXPRESSION FUER ZYTOKINE UND SCHLUESSELENZYME DES
ARACHIDONSAEURESTOFFWECHSELS MITTELS POLYMERASEKETTENREAKTION.36
4.8.1 RNA ISOLIERUNG UND REVERSE TRANSKRIPTION DER MRNA AUS HPFB.36
4.8.2 CDNA AMPLIFIKATION DURCH POLYMERASEKETTENREAKTION (PCR).36
4.8.3 OLIGONUCLEOTID-PRIMER FUER DIE PCR.37
4.9 STATISTISCHE AUSWERTUNG.38
5 ERGEBNISSE.39
5.1 ZELLKULTUR.39
5.1.1 MORPHOLOGIE DER PERITONEALEN FIBROBLASTEN IN KULTUR.39
5.1.2 CHARAKTERISIERUNG DER ZELLEN MITTELS INDIREKTER
IMMUNFLUORESZENZ.40
5.1.3 ZELLZAHL UND PROTEINMENGE DER HPFB PRO INKUBATIONSLOCH.41
5.1.4 ZYTOKINKONZENTRATION IM UEBERSTAND VON PERITONEALMAKROPHAGEN.41
5.2 IL-6: DOSIS- UND ZEITABHAENGIGE FREISETZUNG AUS HUMANEN PERITONEALEN
FIBROBLASTEN NACH STIMULATION MIT KULTURUEBERSTAND VON
PERITONEALMAKROPHAGEN.43
5.2.1 DOSISABHAENGIGE IL-6 FREISETZUNG.43
5.2.2 ZEITABHAENGIGE IL-6 FREISETZUNG.44
5.3 EINFLUSS VON IL-1 RA AUF DIE IL-6 AUSCHUETTUNG AUS HUMANEN
PERITONEALEN
FIBROBLASTEN NACH STIMULATION MIT KULTURUEBERSTAND VON
PERITONEALMAKROPHAGEN.46
5.3.1 WIRKUNG VON IL-1 RA AUF DIE DOSISABHAENGIGE II-6 SEKRETION.46
5.3.2 WIRKUNG VON IL-1 RA AUF DIE ZEITABHAENGIGE IL-6 FREISETZUNG.49
5.4 IL-6 SEKRETION AUS HUMANEN PERITONEALEN FIBROBLASTEN NACH
STIMULATION MIT
DIALYSEEFFLUAT.51
5.4.1 IL-6 SEKRETION AUS HPFB NACH STIMULATION MIT LACTAT- UND
HYDROGENCARBONAT-HALTIGEN DIALYSEEFFLUATEN.51
5.4.2 WIRKUNG VON IL-1 SS AUF DIE IL-6 SEKRETION DER HPFB NACH INKUBATION
MIT LACTAT- UND HYDROGENCARBONAT-HALTIGEN DIALYSEEFFLUATEN.53
5.5 IL-6 SEKRETION AUS HUMANEN PERITONEALEN FIBROBLASTEN NACH
STIMULATION MIT
DIALYSEEFFLUAT EINES CAPD-PATIENTEN MIT AKUTER PERITONITIS UND
IL-1RA.57
5.5.1 DOSISABHAENGIGE IL-6 SEKRETION.57
5.5.2 ZEITABHAENGIGE IL-6 SEKRETION.58
5.6 INDUKTION VON MRNA FUER IL-6 UND IL-8 UND FUER SCHLUESSELENZYME DES
ARACHIDONSAEURESTOFFWECHSELS IN HUMANEN PERITONEALFIBROBLASTEN NACH
STIMULATION MIT KULTURUEBERSTAND VON PERITONEALEN MAKROPHAGEN.60
5.7 TABELLARISCHE UEBERSICHT UEBER DIE VERSUCHSERGEBNISSE.66
6 DISKUSSION.^.70
4
6.1 METHODENKRITIK.70
6.1.1 KRITIKPUNKTE DES ZELLKULTURMODELLS.70
6.1.2 KRITIKPUNKTE DER ANALYTISCHEN TECHNIKEN.75
6.2 DISKUSSION DER ERGEBNISSE.75
6.2.1 DISKUSSION DER EXPERIMENTE MIT PERITONEALMAKROPHAGEN
KONDITIONIERTEM MEDIUM.76
6.2.2 DISKUSSION DER EXPERIMENTE MIT DIALYSEEFFLUATEN.79
6.2.3 INDUKTION VON MRNA FUER SCHLUESSELENZYME DES ARACHIDONSAEURE
STOFFWECHSELS AUS HPFB NACH STIMULATION.84
7 SCHLUSSFOLGERUNG.87
8 ZUSAMMENFASSUNG.89
9 LITERATURVERZEICHNIS. 91
10 ERKLAERUNG AN EIDES STATT.104
11 LEBENSLAUF.105
12 DANKSAGUNG. 107
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