Immunmodulierende Proteine aus apikomplexen Parasiten: Isolation, Aufreinigung und funktionelle Charakterisierung der Mikronemen-Lektine von Sarcocystis muris (Apikomplexa)
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| Format: | Abschlussarbeit Buch |
| Sprache: | German |
| Veröffentlicht: |
2001
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| Beschreibung: | Dresden, Techn. Univ., 2001 |
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INHALT
1. EINLEITUNG
_5
1.1 DER ERREGER 5
1.2
PATHOGENITAET UND WIRTSCHAFTLICHE BEDEUTUNG 6
1.3 INVASION, INVASIVE STADIEN UND LEBENSZYKLUS 8
1.4
CHARAKTERISTISCHE ORGANELLEN AUS DEN APIKALKOMPLEX 12
1.5
LEKTINE UND ZUCKERBINDENDE PROTEINE BEI PARASITISCHEN PROTOZOEN 16
1.6 INFEKTIONSIM MUNOLOGIE 20
1.7 ZIEL DER ARBEIT 21
2. MATERIAL UND METHODEN
24
2.1 PARASITEN 24
2.2
SARCOCYSTIS MURIS-LEKTINE 24
2.2.1 CHEMIKALIEN 24
2.2.2
DURCHFUEHRUNG
DER
HPLC 24
2.3
FITC-MARKIERUNG VON PROTEINEN 25
2.3.1 CHEMIKALIEN UND LOESUNGEN 25
2.3.2 DURCHFUEHRUNG 25
2.4
SDS-PAGE, WESTERN BLOT UND DETEKTION DER PROTEINE MIT MONOKLONALEN
ANTIKOERPERN
25
2.4.1 CHEMIKALIEN UND LOESUNGEN 25
2.4.2
DURCHFUEHRUNG
SDS-PAGE,
WSTERN-BLOT UNF IMMUNDETEKTION:
27
2.5 VERSUCHSTIERE 29
2.5.1 CHEMIKALIEN UND LOESUNGEN 29
2.5.2 ISOLATION MURINER LYMPHOZYTEN AUS DER MILZ DER VERSUCHSTIERE 29
2.6
LYMPHOZYTENTRANSFORMATIONSTEST (LTT) 29
2.6.1 CHEMIKALIEN UND LOESUNGEN 30
2.6.2 DURCHFUEHRUNG 30
2.6.2.1 MITOGENE AKTIVITAET VON SML-P, SML-1, SML-2 UND SML-3 30
2.6.2.2 EINFLUSS DER PROTEINE AUF DIE MITOGEN INDUZIERTE PROLIFERATION
MURINER MILZZELLEN 30
I
BIBLIOGRAFISCHE INFORMATIONEN
HTTP://D-NB.INFO/963416227
INHALTSVERZEICHNIS
2.7
FLUORESZENZMIKROSKOPIE 32
2.7.1 CHEMIKALIEN UND LOESUNGEN 32
2.7.2 DURCHFUEHRUNG 32
2.8 FACSCAN-ANALYSE 32
2.8.1 ANTIKOERPER, CHEMIKALIEN UND LOESUNGEN 32
2.8.2 DURCHFUEHRUNG 34
2.8.2.1 STANDARDPROTOKOLL ZUR OBERFLAECHENFAERBUNG MURINER LYMPHOZYTEN FUER
DIE
DURCHFLUSSZYTOMETRIE 34
2.8.2.2 DURCHFLUSSZYTOMETRISCHE UNTERSUCHUNGEN ZUM APOPTOSEVERHALTEN
MURINER
LYMPHOZYTEN NACH BEHANDLUNG MIT SML UND VERSCHIEDENEN KOMMERZIELLEN
APOPTOSE-
INDUKTOREN 35
2.8.2.3 UNTERSUCHUNG DER VERSCHIEDENEN PHASEN DES ZELL-ZYKLUS AN
PRIMAEREN MURINEN
LYMPHOZYTEN 35
3.
ERGEBNISSE_3Z
3.1 PRAEPARATION DER LEKTINE: CHROMATOGRAMME, SDS-GELELEKTROPHORESEN UND
WESTERN BLOT-ANALYSE 37
3.2
MARKIERUNG DER PROTEINE MIT FLUORESZEIN-ISOTHIOCYANAT AM BEISPIEL VON
SARCOCYSTIS MURIS
-LEKTIN 1 SO
3.3
UNTERSUCHUNGEN ZUR MITOGENEN AKTIVITAET DER SARCOCYSTIS MURIS-LEKTINE 52
3.4 ZUM EINFLUSS DER
SARCOCYSTIS MURIS-LEKTINE AUF DIE MITOGEN INDUZIERTE
PROLIFERATION MURINER MILZZELLEN 56
3.5
BINDUNGSSTUDIEN 65
3.5.1
NACHWEIS EINER BINDUNG MIT HILFE DER FLUORESZENZMIKROSKOPIE 65
3.5.2 NACHWEIS DER BINDUNG VON
S. MURIS-LEKUENEN AN SPEZIELLE LYMPHOZYTEN-
SUBPOPULATIONEN 66
3.6 ANALYSE DES APOPTOSEVERHALTENS MURINER MILZZELLEN 70
3.7
ZELL-ZYKLUS-STUDIEN 77
4
, DISKUSSION_84
4.1
PRAEPARATION DER LEKTINE 84
4.2
FUNKTIONELLE ANALYSEN 89
4.4
IMMUNSUPPRESSION DURCH INFEKTIOESE ERREGER 97
II
INHALTSVERZEICHNIS
S. ZUSAMMENFASSUNG
.22
6. LITERATUR
.122
7. ANHANG
ABKUERZUNGSVERZEICHNIS
ABBILDUNGSVERZEICHNIS
CURRICULUM VITAE
LISTE DER PUBLIKATIONEN, TAGUNGSBEITRAEGE UND VORTRAEGE
DANKSAGUNG
ERKLAERUNG
117
120
123
125
129
130
III |
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